一种利用抑制铁载体筛选细菌群体感应抑制剂的方法技术

本发明专利技术公开了一种利用抑制铁载体筛选细菌群体感应抑制剂的方法。属于病原微生物预防与控制领域，具体步骤：首先，制备CAS培养基，再将制备的CAS培养基与病原菌工作液混匀；然后，将CAS培养基与病原菌工作液的混匀液倒入至培养皿中；最后，采用牛津杯法给药，药物周围呈蓝绿色时即为群体感应抑制剂；本发明专利技术具有简便、快速且通用的优点，可快速高效的筛选病原菌的群体感应抑制剂。本发明专利技术筛选出的群体感应抑制剂可以抑制病原菌生物被膜形成，达到抗感染的目的，具有较好的预防和治疗细菌感染的相关疾病的临床应用前景。病的临床应用前景。病的临床应用前景。

【技术实现步骤摘要】
一种利用抑制铁载体筛选细菌群体感应抑制剂的方法


[0001]本专利技术属于病原微生物预防与控制领域，涉及了一种利用抑制铁载体筛选细菌群体感应抑制剂的方法，具体是涉及群体感应抑制剂的筛选方法和应用，可以用于病原菌群体感应抑制剂的筛选，特别适用于生长时无颜色病原菌群体感应抑制剂的筛选。

技术介绍

[0002]细菌群体感应(QS，quorum sensing)是细胞种内、种间、乃至细菌与宿主之间信号交流的一种机制，包括自诱导物的产生、释放和识别响应，随着细菌数量的增多，自诱导物达到一定阈值，会导致生物被膜的形成、毒力因子的生成与释放、生物发光等。群体感应系统在调控细菌生物被膜的形成，毒力因子的产生过程中发挥至关重要的作用。群体感应作为一种靶标，通过对其进行抑制，破坏滋扰细菌菌群内的通信系统。群体感应抑制剂是一类通过影响群体感应系统来干扰生物被膜形成或破坏生物被膜及毒力因子合成等行为的物质，其抑制群体感应系统既可以增强抗菌药物的效果，又不会诱导抗菌药物耐药性的产生。铁离子是地球上绝大多数生物生存必不可少的元素之一，环境中的大部分铁都是以化合物的形式存在本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种利用抑制铁载体筛选细菌群体感应抑制剂的方法，其特征在于，首先，制备CAS培养基，再将制备的CAS培养基与病原菌工作液进行混匀；然后，将CAS培养基与病原菌工作液的混匀液倒入至培养皿中；最后，采用牛津杯法给药，药物周围呈蓝绿色时，即为群体感应抑制剂。2.根据权利要求1所述的一种利用抑制铁载体筛选细菌群体感应抑制剂的方法，其特征在于，其具体操作步骤：(1)、首先，量取80mL固体培养基、10mL的磷酸盐缓冲液和10mL的CAS染液，将量取好的三者进行混匀后，于121℃高温下进行灭菌15min，从而获得CAS培养基；(2)、然后，从划线平板中挑取病原菌的单菌落，将其接种到5mL的液体培养基中，置于28
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37℃、180rpm的条件下振荡17
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48h后得到病原菌种子液，将得到的病原菌种子液按照1:1000的浓度稀释于液体培养基中，从而得病原菌工作液，搁置待用；(3)、再次，将步骤(1)中得到的进行了灭菌后的CAS培养基冷却至30
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40℃时，将其与步骤(2)中得到的病原菌工作液进行混匀，再将混匀好的含病原菌工作液的CAS培养基倒入至培养皿中，此时培养皿呈现蓝绿色；(4)、最后，待步骤(3)中CAS培养基与病原菌工作液混合的培养皿凝固后，将牛津杯置于培养皿中，再将溶解好的药物加入至牛津杯中，从而得到待培养的培养皿；将待培养的培养皿置于28
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37℃的恒温培养箱中过夜培养16
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48h，观察牛津杯周围的颜色变化即可判断该药物是否为病原菌的QSI，此时病原菌生长后的平板颜色显橙黄色，如牛津杯的周围显示为蓝绿色，则为该药物抑制了病原菌的铁载体，即该病原菌的群体感应抑制剂。3.根据权利要求2所述的一种利用抑制铁载体筛选细菌群体感应抑制剂的方法，其特征在于，在步骤(1)中，所述固体...

【专利技术属性】
技术研发人员：贾爱群，尹璐军，沈旺，
申请(专利权)人：海南大学，
类型：发明
国别省市：