一种缓控释抗耐药复合纳米粒及其制备方法和应用技术

本发明专利技术公开了一种缓控释抗耐药复合纳米粒及其制备方法和应用，涉及医药制剂技术领域。本发明专利技术包括A.将6mg的Dox溶于500μL甲醇中，加入3mL CHCl3充分混合，再加入200μL三乙胺(TEA)；B.将PAMAM溶于500μL甲醇中，与A中溶液混合；C.B中液体在50℃下旋转蒸发1h后形成薄膜，加入PBS水化；D.C中液体超滤管离心过滤，用PBS重悬；E.制备脂质膜；F.取之前制备的PAMAM

【技术实现步骤摘要】
一种缓控释抗耐药复合纳米粒及其制备方法和应用


[0001]本专利技术涉及医药制剂
，特别是涉及一种缓控释抗耐药复合纳米粒及其制备方法和应用。

技术介绍

[0002]甲状腺未分化癌(ATC)是一种少见的预后较差的恶性肿瘤，在各类甲状腺癌中所占比例不到2％。由于其治愈率低，大多数患者在确诊后一年内死亡。通常选择手术和放射治疗来治疗和控制疾病的进展，但在治疗区域的大小上往往存在分歧，导致肿瘤周围的组织和器官受损。化疗一直被认为是一种常见且有效的治疗方法，但ATC具有部分干细胞性质，这可能有助于多药耐药效应(MDR)的发生和肿瘤的复发。阿霉素(Dox)是一种已被批准用于治疗ATC的化疗药物。但是，由于ATC细胞的MDR及其心脏毒性等的多种副作用，Dox的治疗效果受到了影响。目前已有研究证明，苯酚、碱性等特定成分具有抗MDR作用，PIP就是其中一种抗癌分子。它是黑胡椒的主要成分，具有抗抑郁、保肝、抗转移、抗甲亢、抗癌、抗炎症等多种功能。
[0003]在近年来的研究中，聚合纳米材料被认为是最有前景的靶向给药和控释载体之一。聚酰胺
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胺树枝状大分子(PAMAM)纳米颗粒因其特殊的空间结构赋予其良好的载药能力、控释性能而备受关注其核壳结构具有精细的化学结构和低多分散性，可以精确控制尺寸、分支、表面功能。通过改变其活性基团可以改变其载药性能。同时具有安全性高、生物相容性好的优点，在药物传递、基因传递、体内成像等生物医学领域具有良好的发展前景。
[0004]近年来，超声作为一种具有成像和治疗功能的医疗手段，得到了广泛的应用。LIFU，又称低强度聚焦超声，它精确控制和集中超声能量，辅助定时定位激发纳米粒中的药物进行释放，从而提高局部药物浓度，增强治疗效果，减少副作用和对周围正常组织的损伤。然而，LIFU单独作用并不能达到令人满意的治疗肿瘤效果，这可能是由于载药纳米颗粒在肿瘤中的积累相对较少。因此，肿瘤靶向分子被发现并被广泛研究，其中IR780以其显著的线粒体靶向能力而著称。即使在极低的浓度下，这种近红外显像剂也表现出相当强的线粒体靶向能力。
[0005]已有技术限制包括1.肿瘤的手术治疗与放射性治疗常常存在治疗区域选择的分歧而影响治疗效果与术后生存质量，而化学药物治疗过程中肿瘤常常产生多药耐药性；2.化疗药物阿霉素能够有效治疗肿瘤的同时对正常组织器官也具有较强的杀伤作用，导致其他组织损伤；3.树枝状大分子是具有控释功能的药物载体，但是单分子可携带的药物种类有限；4.脂质纳米粒携带阿霉素的载药量有限；5.胡椒碱具有一定的抗肿瘤多药耐药作用，但是抗肿瘤作用有限，给药途径有限；基于此，我们提出一种缓控释抗耐药复合纳米粒及其制备方法和应用。

技术实现思路

[0006]本专利技术的目的在于提供一种缓控释抗耐药复合纳米粒及其制备方法和应用，解决
上述背景中提出的问题。
[0007]为解决上述技术问题，本专利技术是通过以下技术方案实现的：
[0008]本专利技术为一种缓控释抗耐药复合纳米粒，包括一种线粒体靶向抗耐药缓控释树枝状大分子/脂质纳米微球的制备方法，制备方法包括如下步骤：
[0009]步骤一：将6mg的Dox溶于500μL甲醇中，加入3mL CHCl3充分混合，再加入200μL三乙胺(TEA)；
[0010]步骤二：将PAMAM(5mg)溶于500μL甲醇中，与步骤一中的溶液混合，在室温下将混合物放在摇床上过夜；
[0011]步骤三：步骤二中液体放入到圆底烧瓶中(100mL)，然后在50℃的条件下旋转蒸发1小时后形成薄膜，加入PBS(5mL)进行水化，混合物在摇床中室温孵育4小时；
[0012]步骤四：步骤三中液体使用超滤管(3000D)离心过滤，用PBS重悬，4℃保存备用，还包括冷冻干燥后进行保存；
[0013]步骤五：制备脂质膜(DPPC:DSPE
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PEG2000:胆固醇＝2:1:1，总重20mg)，脂质分子(20mg)、胡椒碱(1mg)和IR780(0.1mg)在三氯甲烷中共溶解，加入100mL圆底烧瓶中，用旋转蒸发仪42℃去除三氯甲烷形成薄膜，然后加入PBS(5mL)水化薄膜；
[0014]步骤六：取之前制备的PAMAM
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DOX纳米粒，再加入步骤五中的液体，然后使用超声波仪对整个液体体系进行超声波处理，强度为100W，持续5分钟；
[0015]步骤七：将悬浮液在8000转/分钟下离心10min，得到沉淀，即为所制备的纳米粒。
[0016]一种线粒体靶向抗耐药缓控释树枝状大分子/脂质纳米微球作为治疗甲状腺未分化癌的应用。
[0017]所述LIFU作为权力2中的辅助治疗和释药手段。
[0018]所述步骤六中超声波处理保持脉冲持续时间5秒，脉冲间隔5秒。
[0019]本专利技术为解决化疗药物靶向能力差、副作用多、给药途径有限的缺点，单一载体载药种类及数量有限的限制，以及肿瘤对于化疗药物的多药耐药效应影响治疗效果等的问题，和药物治疗不能精准定位的缺陷，方案以树枝状大分子(PAMAM)为核心负载阿霉素，以脂质材料为外壳装载胡椒碱及线粒体靶向分子IR780，制备出一种线粒体靶向抗耐药缓控释树枝状大分子/脂质纳米微球，该微球具有组织选择性好、生物相容性好和可降解性等优点。该微球不但能够携带化疗阿霉素实现靶向肿瘤的精准定位，避免杀伤其他器官组织的副作用，还能够利用树枝状大分子的缓释功能保持病灶区域的药物浓度，同时脂质膜上携带的胡椒碱能够对抗肿瘤的多药耐药作用，线粒体靶向分子IR还具有光声/荧光显像功能，能够实现诊疗一体化及可视化治疗，LIFU可以用来帮助纳米微球定点定时释放药物，能够辅助纳米微球的治疗，该微球制备工艺简单，易操作，适合扩大化生产。
[0020]本专利技术具有以下有益效果：
[0021]本专利技术以树枝状大分子(PAMAM)为核心负载阿霉素，不仅解决了药物外漏的副作用问题，还能够通过包载整体的树枝状大分子而非逸散在溶液中的溶质分子而增加脂质对于Dox的包载效率。以脂质材料为外壳装载胡椒碱及线粒体靶向分子，不但能够使阿霉素实现靶向肿瘤的精准定位，避免杀伤其他器官组织的副作用，还能够利用树枝状大分子的缓释功能保持病灶区域的药物浓度，同时脂质膜上携带的胡椒碱能够对抗肿瘤的多药耐药作用，线粒体靶向分子IR还具有光声/荧光显像功能，能够实现诊疗一体化及可视化治疗，
LIFU可以用来帮助纳米微球定点定时释放药物，能够辅助纳米微球的治疗。该微球还具有组织选择性好、生物相容性好和可降解性等优点，制备工艺简单，易操作，适合扩大化生产。
[0022]当然，实施本专利技术的任一产品并不一定需要同时达到以上所述的所有优点。
附图说明
[0023]为了更清楚地说明本专利技术实施例的技术方案，下面将对实施例描述所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图仅仅是本专利技术的一些实施例，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种缓控释抗耐药复合纳米粒，包括一种线粒体靶向抗耐药缓控释树枝状大分子/脂质纳米微球的制备方法，其特征在于：制备方法包括如下步骤：步骤一：将6mg的Dox溶于500μL甲醇中，加入3mL CHCl3充分混合，再加入200μL三乙胺(TEA)；步骤二：将PAMAM(5mg)溶于500μL甲醇中，与步骤一中的溶液混合，在室温下将混合物放在摇床上过夜；步骤三：步骤二中液体放入到圆底烧瓶中(100mL)，然后在50℃的条件下旋转蒸发1小时后形成薄膜，加入PBS(5mL)进行水化，混合物在摇床中室温孵育4小时；步骤四：步骤三中液体使用超滤管(3000D)离心过滤，用PBS重悬，4℃保存备用，还包括冷冻干燥后进行保存；步骤五：制备脂质膜(DPPC:DSPE
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PEG2000:胆固醇＝2:1:1，总重20mg)，脂质分子(20mg)、胡椒碱(1mg)和IR780(0....

【专利技术属性】
技术研发人员：王辉，隋国庆，王琦美慧，朱玲玉，董鹏，
申请(专利权)人：吉林大学，
类型：发明
国别省市：