本发明专利技术公开了一种流感病毒通用和冠状病毒联合多肽及其疫苗的应用，属于疫苗制备技术领域。该疫苗为人工合成疫苗，具有易制作、毒性小、低成本、高效价、广谱性和保守性等特性，解决了现有技术通过扩增转化获得疫苗的繁杂流程，提高制备效率和应用效率。针对流感病毒和新型冠状病毒设计了对多种亚型流感病毒和冠状病毒均具有免疫保护联合多肽疫苗组分，利用Montanide ISA51为佐剂。通过对疫苗免疫小鼠滴鼻感染流感病毒后显示，疫苗免疫对甲型H1N1和H7N9流感病毒疫苗小鼠适应株均有保护作用，筛选的6条多肽组成的联合疫苗，同时对多种流感病毒具有保护作用，且具备抗冠状病毒的潜质。质。质。
【技术实现步骤摘要】
一种流感病毒通用和冠状病毒联合多肽及其疫苗的应用
[0001]本专利技术属于疫苗制备
，具体涉及一种流感病毒通用和冠状病毒联合多肽及其疫苗的应用。
技术介绍
[0002]流感病毒大爆发是迄今为止对人类生产生活影响最大的流行性疾病之一。上世纪爆发的三次大流感流行，都是由流感病毒引起的，给人类健康和经济造成了巨大危害和损失。不同流感病毒亚型的划分是基于红细胞凝集素HA和神经氨酸酶的序列，现阶段在人群中传播的主要流感病毒亚型为甲型H1N1，H3N2以及乙型流感病毒。
[0003]阻止流感最有效方法就是接种疫苗，现阶段针对流感病毒的上市疫苗主要包括全病毒灭活疫苗、裂解疫苗和亚单位疫苗，每种疫苗均含有甲1亚型、甲3亚型和乙型(两个系)3
‑
4种流感灭活病毒或抗原组份，但是流感病毒传播广泛，复杂多变，疫苗需要不断更新，且WHO的预测准确性有限。
[0004]传统疫苗是将病原体灭活或减毒制成的，存在生物危害性和遗传变异致使原疫苗效力丧失等问题。相对于传统的弱毒苗和灭活苗以及其他几种新型的疫苗，合成肽类疫苗安全、无毒、稳定，由于其分子结构小而简单，很少会出现严重的并发症及医源性感染问题。
[0005]流感病毒和冠状病毒均为易变异RNA病毒，随着病毒得变异，现存疫苗将不能很好的发挥保护作用，此外流感病毒有多种亚型可感染人，通用疫苗的研制一直为重点克服难题。目前的流感疫苗和冠状病毒疫苗主要是通过PCR的方法扩增基因，再通过质粒转化大肠该菌，获得工程菌，最终获得重组蛋白。操作过程繁琐，且耗时。
技术实现思路
[0006]本专利技术的目的在于提供一种流感病毒通用和冠状病毒联合多肽疫苗，该疫苗为人工合成疫苗，具有易制作、毒性小、低成本、高效价、广谱性和保守性等特性，解决了现有技术通过扩增转化获得疫苗的繁杂流程，提高制备效率和应用效率。
[0007]本专利技术通过以下技术方案实现：
[0008]一种流感病毒通用和冠状病毒联合多肽，包括6条多肽序列，其具体的氨基酸序列如SEQ ID NO.1
‑
SEQ ID NO.6所示。
[0009]一种流感病毒通用和冠状病毒联合多肽在制备流感病毒通用和冠状病毒联合多肽疫苗中的应用。
[0010]一种流感病毒通用和冠状病毒联合多肽疫苗，包含所述的流感病毒通用和冠状病毒联合多肽。
[0011]作为优选地，所述疫苗包括佐剂。
[0012]作为优选地，所述佐剂为Montanide ISA51。
[0013]一种联合多肽在制备预防流感病毒通用和冠状病毒的药物中的用途。
[0014]一种联合多肽疫苗在制备预防流感病毒通用和冠状病毒的药物中的用途。
[0015]与现有技术相比，本专利技术至少具有如下技术效果：
[0016]本专利技术提供了一种流感病毒通用和冠状病毒联合多肽及其疫苗，该疫苗为人工合成疫苗，具有易制作、毒性小、低成本、高效价、广谱性和保守性等特性，解决了现有技术通过扩增转化获得疫苗的繁杂流程，提高制备效率和应用效率。针对流感病毒和新型冠状病毒设计了对多种亚型流感病毒和冠状病毒均具有免疫保护联合多肽疫苗组分，利用Montanide ISA51为佐剂。通过对疫苗免疫小鼠滴鼻感染流感病毒后显示，疫苗免疫对甲型H1N1和H7N9流感病毒疫苗小鼠适应株均有保护作用，筛选的6条多肽组成的联合疫苗，同时对多种流感病毒具有保护作用，且具备抗冠状病毒的潜质。
附图说明
[0017]图1为实施例筛选及疫苗制备流程图；
[0018]图2为实施例多肽包被ELISA检测检测流感病毒免疫小鼠血清IgG水平示意图；
[0019]图3为实施例多肽包被ELISA检测检测冠状病毒免疫小鼠血清IgG水平示意图；
[0020]图4为实施例多肽包被ELISA检测免疫小鼠血清抗IgG浓度示意图；
[0021]图5为实施例脾脏淋巴细胞单个多肽刺激后IFN
‑
γ/CD4双阳性细胞占比示意图；
[0022]图6为实施例多肽免疫小鼠对甲型H1N1流感病毒感染的体重改变和致死率的影响示意图；
[0023]图7为实施例多肽免疫小鼠对甲型H7N9流感病毒感染的体重改变和致死率的影响示意图；
[0024]图8为实施例多肽免疫小鼠对感染H1N1病毒小鼠肺组织病毒载量的影响示意图；
[0025]图9为实施例多肽免疫小鼠对感染H7N9病毒小鼠肺组织病毒载量的影响示意图；
[0026]图10为实施例多肽免疫小鼠3免血清冠状病毒特异性中和抗体水平示意图。
具体实施方式
[0027]下面将结合实施例对本专利技术的实施方案进行详细描述，但是本领域技术人员将会理解，下列实施例仅用于说明本专利技术，而不应视为限制本专利技术的范围，实施例中未注明的具体条件，按照常规条件或者制造商建议的条件进行，所用试剂或仪器未注明生产厂商者，均为可以通过市售购买获得的常规产品。
[0028]实施例1：
[0029]一种流感病毒通用和冠状病毒联合多肽疫苗，基于GeneBank和GISAID流感病毒和冠状病毒序列数据库以及已发表治疗性单克隆抗体文献，通过联合多种组学技术对比筛选出了6条多肽序列，构建联合多肽疫苗，其中包括2条来源流感病毒NP蛋白、2条来自流感病毒M蛋白和2条来自新型冠状病毒S蛋白，均为保守抗原位点。6条多肽序列分别如下：
[0030]SEQ ID NO.1：Flu
‑
M1：DLEALMEWLKTRPILSPLTKGILGFVFTLTVP
[0031]SEQ ID NO.2：Flu
‑
M2：IIGILHLILWILDRLFFKCIYRLF
[0032]SEQ ID NO.3：Flu
‑
NPA：DLIFLARSALILRGSVAHKSC
[0033]SEQ ID NO.4：Flu
‑
NPB：PGIADIEDLTLLARSMVVVR
[0034]SEQ ID NO.5：
[0035]Cov
‑
RBD1：FTGCVIAWNSNNLDSKVGGNYNYLYRLFRKSN
[0036]SEQ ID NO.6：
[0037]Cov
‑
RBD2：QAGSTPCNGVEGFNCYFPLQSYGFQPTNGVGY
[0038]1、筛选及疫苗制备流程如图1所示：
[0039]在Genebank中下载流感和冠状病毒蛋白氨基酸序列并进行比对，结合已发表流感和冠状病毒相关广谱单克隆抗体文献，针对流感病毒NP蛋白和M蛋白、冠状病毒S蛋白高度保守区，选择具有潜在单克隆抗体高度亲和潜在表位区域，截取长度为24
‑
32个氨基酸长度的多肽，病毒通过生物信息学分析表位区域多肽所含针对小鼠和人的CD4、CTL T细胞表位以及刺激产生γ干扰素位点情况，综合筛选出高质量6条多肽序列；
[0040]本文档来自技高网...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
1.一种流感病毒通用和冠状病毒联合多肽，其特征在于，包括6条多肽序列，其具体的氨基酸序列如SEQ ID NO.1
‑
SEQ ID NO.6所示。2.一种如权利要求1所述的流感病毒通用和冠状病毒联合多肽在制备流感病毒通用和冠状病毒联合多肽疫苗中的应用。3.一种流感病毒通用和冠状病毒联合多肽疫苗，其特征在于，包含权利要求1所述的流感病毒通用和冠状病毒联合多肽。4.根据权利要求3所...
【专利技术属性】
技术研发人员：高荣保，张卓涵，
申请(专利权)人：中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所，
类型：发明
国别省市：
还没有人留言评论。发表了对其他浏览者有用的留言会获得科技券。