一种异源表达的贻贝蛋白前体及其应用制造技术

本发明专利技术公开了一种异源表达的贻贝蛋白前体及其应用，涉及基因工程、发酵工程与应用生物学领域，所述贻贝蛋白(Mfp2

【技术实现步骤摘要】
一种异源表达的贻贝蛋白前体及其应用


[0001]本专利技术涉及基因工程、发酵工程与应用生物学领域，尤其是涉及一种异源表达的贻贝蛋白前体及其应用。

技术介绍

[0002]贻贝蛋白，作为一种源于自然界的天然粘性物质，具有优异的黏附性、柔韧性和良好的生物相容性，且毒性低，不会引发人体免疫反应等诸多优良性质。贻贝正是通过其足丝分泌的贻贝粘蛋白将自己固定在海水下的岩石、船体、缆绳、漂流瓶等固体表面上，形成抗水的结合，耐受风浪等的冲刷。通过对贻贝蛋白固化后形成的足丝的分离鉴定，当前得到四大类共11种蛋白质，分别是贻贝足丝蛋白：mfp
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1～6六种，胶原前体蛋白(Pre
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Collagen，Precol三种，一种足丝纤维近端基质蛋白(proximal matrix threadprotein,PMTP)以及多酚氧化酶(polyphenol oxidase enzyme)。
[0003]贻贝蛋白具有广阔的应用领域，然而贻贝蛋白的大规模生产仍是一个未解决的难题。在医学领域，贻贝蛋白可用于烧伤、激光术后等皮肤损伤的修复及本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种异源表达的贻贝蛋白前体，其特征在于，所述贻贝蛋白前体具有如SEQ ID NO.1
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5任一所示的氨基酸序列，所述贻贝蛋白前体异源表达的菌株为酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)、毕氏酵母(Pichia.pastoris)、大肠杆菌(Escherichia coli)。2.一种如权利要求1所述的异源表达的贻贝蛋白前体在制备贻贝蛋白中的应用。3.根据权利要求2所述的应用，其特征在于，制备贻贝蛋白，具体包括以下步骤：(1)根据贻贝蛋白前体表达菌株的密码子偏好性分别设计如SEQ ID NO.1
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5所示的贻贝蛋白前体氨基酸序列的编码基因序列，将基因序列连接至PET28a载体上并转入大肠杆菌DH5α中，经过筛选扩培，抽提质粒并进行双酶切验证、回收，获得目的序列，将目的序列连接到蛋白表达载体上，转化受体菌，获得工程菌株；(2)将所述工程菌株经过活化和扩大化培养后进行发酵表达，发酵结束后，破碎菌体，使用亲和层析柱纯化发酵产物，获得纯化产物；(3)将所述纯化产物加入复合转化...

【专利技术属性】
技术研发人员：罗学才，施昊，尹若春，
申请(专利权)人：安徽大学绿色产业创新研究院，
类型：发明
国别省市：