一种结核病的检测方法技术

本发明专利技术涉及医药分子生物学技术领域，采用传统PCR技术扩增目标靶基因DNA序列，利用T7转录生成ssRNA，利用cas

【技术实现步骤摘要】
一种结核病的检测方法


[0001]本专利技术涉及分子生物学领域，特别涉及结核分枝杆菌的检测方法。

技术介绍

[0002]规律成簇间隔短回文重复序列(clustered regularly interspaced short palindromic repeats，CRISPR)系统是存在于细菌和古细菌中的获得性免疫系统，CRISPR
‑
Cas系统是存在于约48％的细菌和约80％的古细菌中的自适应免疫系统。CRISPR基因座在大肠杆菌中以高度同源的重复序列呈现。依据Cas基因与位点结构之间的序列相似性将CRISPR
‑
Cas系统分为两大类：第一类系统(包括括Ⅰ、Ⅲ和Ⅳ型)存在于细菌和古细菌中，通常形成多亚基蛋白
‑
crRNA效应复合物；第二类系统(包括Ⅱ、
Ⅴ
和
Ⅵ
型)依赖于一个单一的crRNA引导蛋白进行目标干扰。其中能够非特异性切割单链RNA的Cas13a属于VI类，VI类中还有Cas13b、Cas13c等几种亚型。Cas13a(二类
Ⅵ‑...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
IN NO:2)IS1081
‑
c crDNAGGGGATTTAGACTACCCCAAAAACGAAGGGGACTAAAACGCCCGCAGCGGCCTGGCAGCGCTGCAGA(SEQ IN NO:3)IS1081
‑
d crDNAGGGGATTTAGACTACCCCAAAAACGAAGGGGACTAAAACCGCCAGGGCAGCTATTTCCCGGACTGGC(SEQ IN NO:4)IS1081
‑
e crDNAGGGGATTTAGACTACCCCAAAAACGAAGGGGACTAAAACCGGACCCGCCCGCTCGATGCCGGCCCGT(SEQ IN NO:5)。5.如权利要求4所述一种检测结核分枝杆菌的试剂盒，其特征在于所述crDNA序列可被T7 RNA聚合酶识别合成crRNA，进而能够被CRISPR Cas13a所识别。6.一种用于检测结核分枝杆菌TB DNA的crDNA在制备检测结核分枝杆菌试剂盒中的用途。7.如权利要求6所述一种用于检测结核分枝杆菌TB DNA的crDNA在制备检测结核分枝杆菌试剂盒中的用途。8.一种PCR扩增技术联合CRISPR
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Cas13a系统在检测结核分枝杆菌的方法中的应用；所述应用包括以下步骤：S01提取待测样本的DNA作为检测模板；S02检测模板通过设...

【专利技术属性】
技术研发人员：逄宇，任卫聪，李传友，李姗姗，
申请(专利权)人：北京市结核病胸部肿瘤研究所，
类型：发明
国别省市：