一种一测多评测定强骨胶囊中3种成分含量的方法技术

本发明专利技术涉及一种药物的分析检测方法，具体涉及一种采用一测多评法测定强骨胶囊中3种成分含量的方法。本发明专利技术的测定方法包括以下步骤：1)采用柚皮苷作为内标进行一测多评，建立柚皮苷与咖啡酸和新北美圣草苷之间的相对校正因子；2)通过相对校正因子计算强骨胶囊中咖啡酸和新北美圣草苷的含量，采用液相色谱法进行测定。该方法所得结果与外标法无明显差异，具有较高的重复性、稳定性及可信度，可为强骨胶囊的质量评价提供参考依据。胶囊的质量评价提供参考依据。胶囊的质量评价提供参考依据。

【技术实现步骤摘要】
一种一测多评测定强骨胶囊中3种成分含量的方法


[0001]本专利技术涉及一种药物的分析检测方法，具体涉及一种采用一测多评法测定强骨胶囊中3种成分含量的方法。

技术介绍

[0002]强骨胶囊其主要成分为骨碎补总黄酮，收载于《国家食品药品监督管理局国家药品标准》，具有补肾、强骨、止痛的功效，临床用于肾阳虚所致骨萎，症见骨脆易折、腰背或四肢关节疼痛，畏寒肢冷或抽筋、下肢无力、夜尿频多；原发性骨质疏松症、骨量减少见上述证候者。骨碎补总黄酮主要由咖啡酸、新北美圣草苷、柚皮苷组成。研究发现柚皮苷具有促进骨形成的作用，将柚皮苷作用于成骨样细胞，发现柚皮苷能较好的促进成骨样细胞活性；研究表明柚皮苷通过破骨细胞信号通路直接影响骨代谢，具有促进骨损伤修复、减缓骨质疏松的作用。骨碎补中的新北美圣草苷和柚皮苷两者在促进成骨细胞的增殖和分化作用上相当。
[0003]朱常成等在“HPLC法对不同产地骨碎补习用品柚皮苷的含量测定”中采用了HPL方法对不同品种骨碎补中的主要成分柚皮苷进行含量测定，检测结果如下：柚皮苷在157.5
‑
472.5ng范围内有良好的线性关系，且精密度、稳定性、重复性的RSD均低于2％；微波法对于药材中的柚皮苷的提取效率更高，用提取器提取的效率偏低，但相比之下用纯甲醇作溶剂效率较高些。该试验采用的新型提取方法即闪式提取器提取法简便稳定、重复性好。但其提取效率不高。
[0004]中国专利“一种测定骨碎补中柚皮苷含量的方法”公开了一种测定骨碎补中柚皮苷含量的方法，包括下述步骤：(1)将骨碎补样品粉碎，过三号筛，取过筛后的样品粉末0.25g；将样品粉末与1g石英砂混合，装于放有纤维滤膜的ASE萃取池中，加石英砂至与池口平行，用甲醇萃取；收集萃取液，并使用甲醇定容至50ml；(2)采用HPLC法测定甲醇萃取液中柚皮苷的含量。该专利使得测定骨碎补中柚皮苷含量的方法更加简便、准确。但其只能测定骨碎补样品中一种成分的含量且成本较高。
[0005]一测多评法是通过测定中药中一种代表性成分的含量，依据校对校正因子推算出骨碎补中其他多种待测成分含量的一种多指标同步质量控制方法。一测多评法可对多种成分含有量同时进行测定，已广泛应用于中成药质量控制，并且解决了检测过程中对照品用量大或价格昂贵的问题。目前，骨碎补总黄酮的测定方法较为复杂，且只能测定骨碎补中一种成分的含量，测定成本较高且提取效果差。因此，提供一种能够测定骨碎补总黄酮中多种含量的方法，且提取效果好、稳定性强并能降低成本是很有必要的。

技术实现思路

[0006]本专利技术的目的是提供一种测定强骨胶囊中咖啡酸、新北美圣草苷和柚皮苷含量的方法，具有重复性好、稳定性高和可信度强等特点，大大节省了资源、降低了检测成本。
[0007]为实现上述专利技术目的，本专利技术的技术方案为：一种一测多评法测定强骨胶囊中3种
成分含量的方法，其特征在于，采用柚皮苷作为内标进行一测多评，建立柚皮苷与咖啡酸和新北美圣草苷之间的相对校正因子，通过相对校正因子计算强骨胶囊中咖啡酸和新北美圣草苷的含量，采用液相色谱法进行测定，包括以下步骤：
[0008](1)对照品溶液的制备：咖啡酸、新北美圣草苷、柚皮苷用溶剂溶解，制成对照品贮备液，定容，混匀，得对照品溶液；
[0009](2)供试品溶液的制备：
[0010]强骨胶囊样品和溶剂混合，超声处理使溶解，放冷，定容，混匀，滤过，取续滤液，得供试品溶液；
[0011](3)色谱条件：
[0012]流动相A：甲醇；流动相B：磷酸水溶液；
[0013]洗脱条件：
[0014]0min
‑
50min，流动相A的体积分数由10
‑
30％升高至50
‑
70％；
[0015]50min
‑
60min，流动相A的体积分数为70
‑
90％；
[0016]60min
‑
70min，流动相A的体积分数为10
‑
30％；
[0017]检测波长：250nm
‑
260nm；流速：0.8
‑
1.2mL/min；柱温：25
‑
40℃；
[0018]色谱柱：C18柱；
[0019](4)测定：将供试品溶液注入高效液相色谱仪，采用内标法计算，通过与柚皮苷的相对校正因子计算咖啡酸、新北美圣草苷的含量。
[0020]根据本专利技术的一些实施方式，上述步骤(1)和步骤(2)中所述溶剂为甲醇。
[0021]根据本专利技术的一些实施方式，上述步骤(1)中，所述对照品溶液的浓度为36.64
‑
306.3μg/mL。
[0022]根据本专利技术的一些实施方式，所述超声处理的时间为20
‑
40分钟，功率为300
‑
800W、频率为30
‑
50KHz；
[0023]优选地，所述超声处理时间为30min，功率为500W、频率为40KHz。
[0024]根据本专利技术的一些实施方式，所述检测波长为256nm，流速为1mL/min，柱温为30℃。
[0025]根据本专利技术的一些实施方式，所述梯度洗脱的条件为：
[0026]0min
‑
50min，流动相A的体积分数由20％升高至60％；
[0027]50min
‑
60min，流动相A的体积分数为80％；
[0028]60min
‑
70min，流动相A的体积分数为20％。
[0029]根据本专利技术的一些实施方式，所述流动相B为质量分数0.01
‑
1％的磷酸水溶液；
[0030]优选地，流动相B为质量分数0.1％的磷酸水溶液。
[0031]根据本专利技术的一些实施方式，所述C18柱选自Eclipse Plus C18柱，AglientZORBAX SB
‑
C18柱，Aglient TC
‑
C18(2)柱，4.6mm
×
250mm，5μm色谱柱中的至少一种；
[0032]优选地，所述C18柱为AglientZORBAX SB
‑
C18柱。
[0033]根据本专利技术的一些实施方式，步骤(4)中所述相对校正因子的计算公式为(f)＝(Ai
×
Cr)/(Ar
×
Ci)；
[0034]式中Ai为内标的峰面积，Ar为待测成分的峰面积，Ci为内标的浓度，Cr为待测成分
的浓度。
[0035]本专利技术还提供了一种一测多评法测定强骨胶囊中3种成分含量的方法在检测强骨胶囊中咖啡酸、新北美圣草苷和柚皮苷含量中的应用。
[0036]本专利技术提供的强骨胶囊的质量评价方法，一测多评法解决了目前强骨胶囊质量评价方法成本高、对照品用量大且价格昂贵的问题，该检测方法重本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种一测多评法测定强骨胶囊中3种成分含量的方法，其特征在于，采用柚皮苷作为内标进行一测多评，建立柚皮苷与咖啡酸和新北美圣草苷之间的相对校正因子，通过相对校正因子计算强骨胶囊中咖啡酸和新北美圣草苷的含量，采用液相色谱法进行测定，包括以下步骤：1)对照品溶液的制备：咖啡酸、新北美圣草苷、柚皮苷用溶剂溶解，制成对照品贮备液，定容，混匀，得对照品溶液；2)供试品溶液的制备：强骨胶囊样品和溶剂混合，超声处理使溶解，放冷，定容，混匀，滤过，取续滤液，得供试品溶液；3)色谱条件：流动相A：甲醇；流动相B：磷酸水溶液；洗脱条件：0min
‑
50min，流动相A的体积分数由10
‑
30％升高至50
‑
70％；50min
‑
60min，流动相A的体积分数为70
‑
90％；60min
‑
70min，流动相A的体积分数为10
‑
30％；检测波长：250nm
‑
260nm；流速：0.8
‑
1.2mL/min；柱温：25
‑
40℃；色谱柱：C18柱；4)测定：将供试品溶液注入高效液相色谱仪，采用内标法计算，通过与柚皮苷的相对校正因子计算咖啡酸、新北美圣草苷的含量。2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤(1)和步骤(2)中所述溶剂为甲醇。3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤(1)中，所述对照品溶液的浓度为36.64
‑
306.3μg/mL。4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤(2)中所述超声时间为20
‑
40分钟，功率为300
‑
800W、频率为30
‑
50KHz。5.根据权利要求...

【专利技术属性】
技术研发人员：孟祥杰，胡洋叶，潘耀宗，余海谦，王恒斌，
申请(专利权)人：北京岐黄制药有限公司，
类型：发明
国别省市：