用于尿素酶活性快速筛查的凝胶试剂、试剂盒及快速筛查方法技术

本发明专利技术提供了一种用于尿素酶活性快速筛查的凝胶试剂、试剂盒及快速筛查方法，涉及医疗检测的技术领域。凝胶试剂包括以下浓度的组分：尿素7mg/ml

【技术实现步骤摘要】
用于尿素酶活性快速筛查的凝胶试剂、试剂盒及快速筛查方法


[0001]本专利技术涉及医疗检测的
，尤其涉及一种用于尿素酶活性快速筛查的凝胶试剂、试剂盒及快速筛查方法。

技术介绍

[0002]幽门螺杆菌是一种螺旋形、微厌氧、对生长条件要求十分苛刻的细菌，1983年首次从慢性活动性胃炎患者的胃黏膜活检组织分离成功，是目前所知能够在人体胃部生存的唯一微生物种类。幽门螺杆菌已经被证实可引起活动性慢性胃炎，是胃癌和粘膜相关淋巴型淋巴瘤的危险因素。
[0003]目前已知的幽门螺杆菌感染诊断方法分为侵入式诊断方法和非侵入式诊断方法，侵入式诊断方法是指使用内视镜采集组织进行检查的方法，非侵入式诊断方法是指不使用内视镜的方法。其中侵入性诊断方法主要有组织病理诊断法、快速尿素酶实验法等，快速尿素酶实验法是通过检测由幽门螺杆菌大量分泌的脲酶活性以诊断患者是否感染幽门螺杆菌的方法，这一方法能够直接确认是否感染幽门螺杆菌，其诊断的准确率高，而且诊断迅速。
[0004]目前对尿素酶的检测方法主要有纳式试剂比色法、拉曼光谱法、酚红指示剂法、胶体金免疫层析法为基础的唾液测试板、精密试纸法均可以实现对唾液中的尿素酶的定性分析。现有技术中公开了一种幽门螺杆菌检测试剂盒，包括反应液和指示剂试纸，反应液包括柠檬酸
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柠檬酸钠缓冲液、氯化镍和尿素，指示剂试纸可检测pH4.5
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7.0范围内的变化。
[0005]然而，现有技术中的幽门螺杆菌检测试剂的检测速度较慢，需要花费大量的时间等待指示剂试纸的显色反应，难以适用于幽门螺杆菌的快速检测。因此，为了提高对幽门螺杆菌的筛查速率，有必要开发一种用于尿素酶活性快速筛查的凝胶试剂、试剂盒及快速筛查方法，通过筛查检测尿素酶的活性，来获知受试者是否感染幽门螺杆菌。

技术实现思路

[0006]本专利技术的目的在于提供一种用于尿素酶活性快速筛查的凝胶试剂、试剂盒及快速筛查方法，通过对尿素酶活性进行快速筛查，从而准确获知受试者是否感染幽门螺杆菌。
[0007]第一方面，本专利技术提供用于尿素酶活性快速筛查的凝胶试剂，采用如下的技术方案：
[0008]凝胶试剂包括以下浓度的组分：
[0009][0010]通过采用上述技术方案，有益效果在于：凝胶形成物能够形成凝胶整体，将尿素、指示剂等其他组分进行混合；对尿素酶的活性进行检测时，尿素在尿素酶的作用下，被分解为氨，缓冲液对整体的pH值进行调节，而氨在其中能够与指示剂反应，出现显色反应，从而达到对尿素酶活性的检测；抑制剂在凝胶试剂中能够抑制非目标蛋白的表达，从而相对提高尿素酶的表达，能够提高指示剂对尿素酶进行显色检测的速率；促进剂能够提高尿素酶的活性，从而提高尿素酶对尿素进行分解的速率，有利于提高指示剂对尿素酶活性进行检测的速率。
[0011]可选的，所述指示剂为苯酚红。
[0012]通过采用上述技术方案，其有益效果在于：当尿素在尿素酶的作用下，分解为氨后，氨在凝胶试剂中显碱性，而苯酚红与氨接触后，苯酚红显红色，红色为显眼色，容易被观测到尿素酶的阳性反应。
[0013]可选的，所述抑制剂包括对羟基苯甲醚与Proclin300的组合物，且所述抑制剂中的溶剂为乙醇；优选为，所述对羟基苯甲醚与所述Proclin300的浓度比为2：1。
[0014]通过采用上述技术方案，其有益效果在于：对羟基苯甲醚和Proclin300溶解在乙醇中，有利于对羟基苯甲醚和Proclin300在凝胶试剂中进行均匀分散，同时，对羟基苯甲醚和Proclin300均可以对非目标蛋白起到抑制活性的作用，有利于尿素酶的表达，进一步提高对尿素酶进行检测的速率。
[0015]可选的，所述促进剂包括对羟基苯甲酸、酪蛋白和壳聚糖中的至少一种。
[0016]通过采用上述技术方案，其有益效果在于：对羟基苯甲酸、酪蛋白和壳聚糖均可以对尿素酶的活性起到促进作用，有利于尿素酶的表达，进一步提高对尿素酶进行检测的速率。
[0017]可选的，所述促进剂至少包括酪蛋白与壳聚糖的两种组合，优选为，所述酪蛋白与壳聚糖的浓度比为1：1。
[0018]通过采用上述技术方案，其有益效果在于：促进剂中包括浓度比为1：1的酪蛋白与壳聚糖，对尿素酶活性的促进作用较好，能够较快速的对尿素酶进行显色反应。
[0019]可选的，所述缓冲液调节所述凝胶试剂pH至5
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8。
[0020]通过采用上述技术方案，其有益效果在于：pH在5
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8之间，为尿素酶的活性表达pH
[0037]本实施例1
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5中凝胶试剂中各组分的浓度如表1所示。
[0038]表1实施例1
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5中凝胶试剂各组分的浓度
[0039][0040][0041]实施例6
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11
[0042]本实施例6
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11中凝胶试剂中各组分与实施例2中的凝胶试剂的不同之处在于促进剂的组分与浓度，实施例6
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11中凝胶试剂的促进剂的组分和浓度如表2所示。
[0043]表2实施例6
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11的凝胶试剂中的促进剂的组分与浓度
[0044][0045]本实施例1
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11中，指示剂为苯酚红。
[0046]一些实施例中，指示剂可以是能够与氨发生显色反应的试剂。
[0047]本实施例1
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11中，缓冲液为2
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(N
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吗啉)乙磺酸一水物和氢氧化钠混合后的溶液，能够调节凝胶试剂整体pH至5
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8。
[0048]一些实施例中，缓冲液为能够调整凝胶试剂整体pH至5
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8的溶液。
[0049]一些实施例中，缓冲液为配合指示剂显色的溶液。
[0050]本实施例1
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11中，凝胶形成物为琼脂。
[0051]一些实施例中，凝胶也可以是明胶。
[0052]本专利技术实施例还提出了一种用于尿素酶活性快速筛查的试剂盒，应用了本实施例1
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11中的凝胶试剂。
[0053]试剂盒包括承载玻片，承载玻片上表面的中心内凹开设有检测部，凝胶试剂位于检测部中，且承载玻片位于检测部的开口处贴合有标签，标签用于记录受试者的身份信息，并且标签贴合在承载玻片上后，能够对检测部的开口处进行密封贴合。
[0054]一些实施例中，承载玻片为塑料玻璃片，呈透明长方形。
[0055]一些实施例中，标签使用粘胶固定贴合在承载玻片上。
[0056]本专利技术实施例还提出一种用于尿素酶活性快速筛查的快速筛查方法，应用了上述的试剂盒，快速筛查方法包括以下步骤：
[0057]S100、取待测样本；
[0058]S200、将待测样本暴露于凝胶试剂中；
[0059]S300、观察凝胶试剂变色情况；
[0060]S410、凝胶试剂变本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.用于尿素酶活性快速筛查的凝胶试剂，其特征在于，包括以下浓度的组分：2.根据权利要求1所述的凝胶试剂，其特征在于，所述指示剂为苯酚红。3.根据权利要求1所述的凝胶试剂，其特征在于，所述抑制剂包括对羟基苯甲醚与Proclin300的组合物，且所述抑制剂中的溶剂为乙醇。4.根据权利要求1所述的凝胶试剂，其特征在于，所述促进剂包括对羟基苯甲酸、酪蛋白和壳聚糖中的至少一种。5.根据权利要求4所述的凝胶试剂，其特征在于，所述促进剂至少包括酪蛋白与壳聚糖的两种组合。6.根据权利要求1所述的凝胶试剂，其特征在于，所述缓冲液调节所述凝胶试剂pH至5
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8。7.用于尿素酶活性快速筛查的试剂盒，其特征在于，包括如权利要求1
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7...

【专利技术属性】
技术研发人员：许奕鹏，杨晓辉，
申请(专利权)人：杨晓辉，
类型：发明
国别省市：