一种用于软骨损伤修复的可注射水凝胶的制备方法技术

本发明专利技术公开一种用于软骨损伤修复的可注射水凝胶的制备方法，包括：步骤一、提供负载2

【技术实现步骤摘要】
一种用于软骨损伤修复的可注射水凝胶的制备方法


[0001]本专利技术属于生物医用材料
，具体涉及一种用于软骨损伤修复的可注射水凝胶的制备方法。

技术介绍

[0002]急性创伤或者重复性微创伤可能会导致软骨损伤，若不及时治疗，损伤部位炎症会引起多种降解酶活性提高，加速关节软骨的降解，最终发展为软骨关节退行性疾病，以致影响患者身心健康。
[0003]由于关节软骨结构组成的特殊性，其在损伤后无法进行自我修复。目前软骨损伤修复用医用材料基本依托软骨分化，采用移植细胞进行处理，这种方式会造成细胞体外培养和免疫排斥，引发新的风险。目前的因软骨损伤造成的软骨组织缺陷而植入的软骨修复填充材料，仅具有针对促进新生软骨再生的生物相容性、软骨分化活性和可控的降解性能，无法满足当前软骨损伤修复的要求。

技术实现思路

[0004]本专利技术所要解决的技术问题在于针对上述现有技术的不足，提供一种用于软骨损伤修复的可注射水凝胶的制备方法。本专利技术通过提供负载 2
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基氨基甲酰)苯甲酸的牛血清白蛋白纳米颗粒分散液、提取丝素蛋白以及将上述分散液、丝素蛋白、E7肽、辣根过氧化物酶和过氧化氢溶液混合，得到用于软骨损伤修复的可注射水凝胶，该水凝胶兼具招募内源性干细胞和良好的软骨分化能力的用于软骨损伤修复的生物医用材料。
[0005]为解决上述技术问题，本专利技术采用的技术方案是：一种用于软骨损伤修复的可注射水凝胶的制备方法，其特征在于，包括：r/>[0006]步骤一、提供负载2
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基氨基甲酰)苯甲酸的牛血清白蛋白纳米颗粒，具体包括：
[0007]步骤101、将2
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基氨基甲酰)苯甲酸溶液滴加到牛血清白蛋白溶液中，得到混合体系；
[0008]步骤102、将无水乙醇连续加入到所述混合体系中，得到浑浊体系；
[0009]步骤103、向所述浑浊体系中加入戊二醛溶液，搅拌，离心纯化，得到负载2
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基氨基甲酰)苯甲酸的牛血清白蛋白纳米颗粒；
[0010]步骤二、提取丝素蛋白，具体包括：将经精细脱胶和干燥后蚕茧溶解于LiBr溶液中，得到蚕丝体系，将所述蚕丝体系经水浴溶解、过滤和透析冻干，得到丝素蛋白；
[0011]步骤三、制备可注射水凝胶，具体包括：将丝素蛋白溶液、E7肽溶液、负载2
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基氨基甲酰)苯甲酸的牛血清白蛋白纳米颗粒分散液、辣根过氧化物酶水溶液和过氧化氢溶液混合，得到用于软骨损伤修复的可注射水凝胶。
[0012]上述的用于软骨损伤修复的可注射水凝胶的制备方法，其特征在于，步骤101中，所述混合体系中2
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基氨基甲酰)苯甲酸的质量为牛血清白蛋白质量的0.01
倍～0.05倍；所述2
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基氨基甲酰) 苯甲酸溶液为2
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基氨基甲酰)苯甲酸和无水乙醇的混合溶液，所述牛血清白蛋白溶液为牛血清白蛋白的水溶液。
[0013]上述的用于软骨损伤修复的可注射水凝胶的制备方法，其特征在于，步骤102中，将无水乙醇连续加入到所述混合体系中为以 1.5mL/min～2.0mL/min的速率进行加入。
[0014]上述的用于软骨损伤修复的可注射水凝胶的制备方法，其特征在于，步骤102中，所述无水乙醇的体积为牛血清白蛋白质量的190倍～590倍，所述无水乙醇体积的单位为mL,牛血清白蛋白质量的单位为g。
[0015]上述的用于软骨损伤修复的可注射水凝胶的制备方法，其特征在于，步骤103中，所述戊二醛溶液的质量百分含量为8wt％～10％，所述戊二醛溶液的体积为牛血清白蛋白质量的1250倍，所述戊二醛溶液体积为μL，牛血清白蛋白质量的单位为g；所述搅拌的时间为24h～48h。
[0016]上述的用于软骨损伤修复的可注射水凝胶的制备方法，其特征在于，步骤二中，所述精细脱胶为将蚕茧置于碳酸钠溶液中煮沸，所述碳酸钠溶液的质量为蚕茧质量的40倍～60倍，所述碳酸钠溶液的质量百分含量为 0.5wt％～0.8％；所述LiBr溶液浓度为9.3M～9.8M。
[0017]上述的用于软骨损伤修复的可注射水凝胶的制备方法，其特征在于，步骤三中，所述用于软骨损伤修复的可注射水凝胶在上述体系混合后静置 3min～7min即可成胶；
[0018]上述的用于软骨损伤修复的可注射水凝胶的制备方法，其特征在于，步骤三中，所述丝素蛋白溶液为丝素蛋白溶解于去离子水中得到的丝素蛋白溶液，所述丝素蛋白溶液中丝素蛋白的质量百分含量为2.5％～10％；所述丝素蛋白质量为E7肽质量的125倍～500倍。
[0019]上述的用于软骨损伤修复的可注射水凝胶的制备方法，其特征在于，步骤三中，所述负载2
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基氨基甲酰)苯甲酸的牛血清白蛋白纳米颗粒分散液为负载2
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基氨基甲酰)苯甲酸的牛血清白蛋白纳米颗粒重悬于水中得到的负载2
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基氨基甲酰)苯甲酸的牛血清白蛋白纳米颗粒分散液。
[0020]上述的用于软骨损伤修复的可注射水凝胶的制备方法，其特征在于，步骤三中，所述丝素蛋白体积、负载2
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基氨基甲酰)苯甲酸的牛血清白蛋白纳米颗粒分散液体积、辣根过氧化物酶水溶液体积和过氧化氢溶液体积的比值为200:6:5:5。
[0021]本专利技术与现有技术相比具有以下优点：
[0022]1、本专利技术的用于软骨损伤修复的可注射水凝胶的制备方法通过提供负载2
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基氨基甲酰)苯甲酸的牛血清白蛋白纳米颗粒分散液、提取丝素蛋白以及将上述分散液、丝素蛋白、E7肽、辣根过氧化物酶和过氧化氢溶液混合，得到用于软骨损伤修复的可注射水凝胶，该水凝胶兼具招募内源性干细胞和良好的软骨分化能力的用于软骨损伤修复的生物医用材料。
[0023]2、作为优选，本专利技术的方法包括将提取得到的丝素蛋白与辣根过氧化物酶和过氧化氢混合，以促进丝素蛋白分子上的酚羟基发生化学交联。
[0024]3、本专利技术的方法首次通过去溶剂法合成负载2
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基氨基甲酰)苯甲酸的牛血清白蛋白纳米颗粒本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种用于软骨损伤修复的可注射水凝胶的制备方法，其特征在于，包括：步骤一、提供负载2
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基氨基甲酰)苯甲酸的牛血清白蛋白纳米颗粒，具体包括：步骤101、将2
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基氨基甲酰)苯甲酸溶液滴加到牛血清白蛋白溶液中，得到混合体系；步骤102、将无水乙醇连续加入到所述混合体系中，得到浑浊体系；步骤103、向所述浑浊体系中加入戊二醛溶液，搅拌，离心纯化，得到负载2
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基氨基甲酰)苯甲酸的牛血清白蛋白纳米颗粒；步骤二、提取丝素蛋白，具体包括：将经精细脱胶和干燥后蚕茧溶解于LiBr溶液中，得到蚕丝体系，将所述蚕丝体系经水浴溶解、过滤和透析冻干，得到丝素蛋白；步骤三、制备可注射水凝胶，具体包括：将丝素蛋白溶液、E7肽溶液、负载2
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基氨基甲酰)苯甲酸的牛血清白蛋白纳米颗粒分散液、辣根过氧化物酶水溶液和过氧化氢溶液混合，得到用于软骨损伤修复的可注射水凝胶。2.根据权利要求1所述的用于软骨损伤修复的可注射水凝胶的制备方法，其特征在于，步骤101中，所述混合体系中2
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基氨基甲酰)苯甲酸的质量为牛血清白蛋白质量的0.01倍～0.05倍；所述2
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基氨基甲酰)苯甲酸和无水乙醇的混合溶液，所述牛血清白蛋白溶液为牛血清白蛋白的水溶液。3.根据权利要求1所述的用于软骨损伤修复的可注射水凝胶的制备方法，其特征在于，步骤102中，将无水乙醇连续加入到所述混合体系中为以1.5mL/min～2.0mL/min的速率进行加入。4.根据权利要求1所述的用于软骨损伤修复的可注射水凝胶的制备方法，其特征在于，步骤102...

【专利技术属性】
技术研发人员：杨静，范代娣，马晓轩，张佳，朱晨辉，董芳名，
申请(专利权)人：西北大学，
类型：发明
国别省市：