一种双重主客体锚定表位印迹聚合物的制备方法及其应用技术

本发明专利技术适用于生命科学技术领域，提供了一种双重主客体锚定表位印迹聚合物的制备方法及其应用，包括如下步骤：步骤（1）表位的选择和修饰；步骤（2）Au纳米星和Ag纳米粒子的合成；步骤（3）基底材料的选择及β－环糊精功能化；步骤（4）偶氮苯修饰的表位模板在基底材料上的锚定；步骤（5）定向表面印迹；步骤（6）偶氮苯修饰的表位模板的去除。本发明专利技术中的一种双重主客体锚定表位印迹聚合物的制备方法，制备的双重主客体锚定表位印迹聚合物与目标蛋白形成夹心复合物，以构建基于MIPs

【技术实现步骤摘要】
一种双重主客体锚定表位印迹聚合物的制备方法及其应用


[0001]本专利技术属于生命科学
，尤其涉及一种双重主客体锚定表位印迹聚合物的制备方法及其应用。

技术介绍

[0002]近年来，蛋白质的分析方法主要有免疫分析、肽质量指纹图分析、氨基酸序列分析和氨基酸组成分析等，质谱法是目前最广泛使用的蛋白质鉴定方法，但是随着医疗水平的提高，临床诊断需要检测限更低，灵敏度更高的检测方法。表面增强拉曼散射（SERS）技术的灵敏度已经达到单分子水平，适用于痕量检测并且具有检测快速、分辨率高等特点。
[0003]目前比较普遍的蛋白质研究手段的主要基础是抗原－抗体识别，抗体在生命科学领域中生物分子识别方面是人们普遍使用的生物试剂，但是抗体也存在很多缺点，制备过程复杂，价格高昂，一些抗体难以提纯或很难制备，并且抗体不稳定，重复性差，因此发展抗体的替代物不仅具有重要的科学意义，而且具有巨大的经济价值。
[0004]而分子印迹聚合物（MIPs）价格低廉，制备容易，对恶劣环境耐受力强，稳定性好，可重复使用，可以在复杂环境中选择性识别目标物，但传统分子印本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种双重主客体锚定表位印迹聚合物的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：步骤（1）、选择目标蛋白的C端和N端表位的氨基酸序列并对其进行修饰；步骤（2）、Au纳米星和Ag纳米粒子的合成；步骤（3）、基底材料的选择及β－环糊精功能化；步骤（4）、偶氮苯修饰的表位模板在基底材料上的锚定；步骤（5）、定向表面印迹；步骤（6）、偶氮苯修饰的表位模板的去除，得到分子印迹聚合物。2.根据权利要求1所述的双重主客体锚定表位印迹聚合物的制备方法，其特征在于，在步骤（1）中，对于目标蛋白C端的修饰，先引入赖氨酸，再利用赖氨酸上的氨基与4
‑
（苯基偶氮）苯甲酸进行反应，得到偶氮苯修饰的C端表位；对于目标蛋白N端的修饰，其末端存在可反应的氨基，直接与4
‑
（苯基偶氮）苯甲酸反应，得到偶氮苯修饰N端表位。3.根据权利要求1所述的双重主客体锚定表位印迹聚合物的制备方法，其特征在于，在步骤（2）中，配置0.1molHEPES水溶液，通过滴加1molNaOH溶液将pH值调节至7.4，将超纯水加入到2mLHEPES中，再加入40μL1%HAuCl4，混合物在不搅拌的情况下反应1h，得到蓝色AuNSs溶液；将含有0.0090g AgNO3的50 mL超纯水加热，沸腾后加入1 mL 1%柠檬酸三钠溶液，煮沸1h后，将该溶液冷却得到AgNPs。4.根据权利要求1所述的双重主客体锚定表位印迹聚合物的制备方法，其特征在于，在步骤（3）中，C端表位选择β－环糊精功能化的玻璃基底，N端表位选择β－环糊精和拉曼报告分子功能化的Ag纳米粒子基底，β－环糊精功能化玻璃基底的具体合成步骤如下：步骤（11）、制作氨基功能化的玻璃基底，将玻璃基底切成若干等分，并在其表面刻上大小相等的小圆圈，用食人鱼溶液和超纯水依次对玻璃基底...

【专利技术属性】
技术研发人员：贾琼，许伊童，马玖彤，郑海娇，
申请(专利权)人：吉林大学，
类型：发明
国别省市：