【技术实现步骤摘要】
一种比率式聚集诱导ECL/EC传感平台、其制备方法及其检测循环肿瘤DNA的应用
[0001]本专利技术涉及一种基于电化学及电化学发光比率传感器超灵敏检测循环肿瘤DNA的应用,属于生物检测
技术介绍
[0002]肿瘤液体活检通过非侵入式的血液取样方式来获得肿瘤相关的分子生物学信息,如循环肿瘤DNA(circulating tumor DNA, ctDNA)、循环肿瘤细胞(circulating tumor cell, CTC)及外泌体等,已经广泛用于癌症的早期诊断、残留病变、复发监测、疗效评估、药物指导等方面。其中,ctDNA是由肿瘤细胞释放到血液中的基因组片段,并携带癌症特异的遗传和表观遗传异常,可以反映肿瘤的负担、转移和恶性进展,是一种非常重要的液体活检生物标志物。由于ctDNA在血液中的丰度极低,且半衰期很短,聚合酶链式反应(polymerase chain reaction, PCR)及DNA测序法等传统技术在检测ctDNA时存在一些局限性,如抗干扰能力不足、花费昂贵、检测时间长等。因而,开发一种低价、快速、 ...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
1.一种比率式聚集诱导ECL/EC传感平台,其特征在于,是基于二茂铁的EC信号及TPA
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BT 纳米粒子的ECL信号检测,随着靶标ctDNA浓度的增加,ECL强度逐渐增大,而EC信号逐渐降低,将ECL与EC信号进行比值,在100 aM
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100 pM范围内该比值与ctDNA的浓度对数线性相关。2.权利要求1所述的比率式聚集诱导ECL/EC传感平台的制备方法,其特征在于,步骤如下:步骤1、制备TPA
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BT材料;步骤2、纳米沉淀法合成TPA
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BT NPs;所得产物呈现出球状,具有良好的分散性,直径约为35 nm;步骤3、构建比率分析聚集诱导ECL/EC传感平台:(1).对金电极进行粉末抛光打磨、清洗、干燥备用;(2).将步骤2所得的TPA
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BT NPs修饰在金电极的工作区域,在室温下干燥;(3).将6
ꢀµ
L H1修饰在步骤3(2)处理后的金电极的工作区域,孵育90分钟后用磷酸盐缓冲液清洗待用;(4).为了防止非特异性结合,将6
ꢀµ
L MCH修饰在步骤3(3)处理后的金电极的工作区域,孵育15分钟后用磷酸盐缓冲液清洗待用;(5).将靶标、H2及Exo
ꢀⅢ
在37 ℃条件下共同孵育,通过E...
【专利技术属性】
技术研发人员:刘金霞,杨露霞,吴丽,周晓波,张轲,
申请(专利权)人:南通大学,
类型:发明
国别省市:
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