负载囊泡及其制备方法、试剂盒、药品和用途技术

本发明专利技术涉及一种负载囊泡及其制备方法、试剂盒、药品和用途。负载囊泡包含DNA修饰的纳米粒，囊泡层，所述囊泡层包覆在所述DNA修饰的纳米粒的外部，反义DNA，所述反义DNA负载于所述纳米粒和/或所述囊泡层上；制备方法包含：将DNA修饰的纳米粒和囊泡层进行组装，得到框架，将反义DNA与所述框架混合进行反应，以便所述反义DNA负载于所述DNA修饰的纳米粒或所述囊泡层上，制得负载囊泡。该负载囊泡进入细胞后，能够释放反义DNA，其能够靶向与mRNA互补结合后，抑制mRNA翻译，从而促进癌细胞凋亡，具有稳定性强和可控释放反义DNA等优点；并且，该制备方法操作简单。方法操作简单。

【技术实现步骤摘要】
负载囊泡及其制备方法、试剂盒、药品和用途


[0001]本专利技术属于生物
，具体地，涉及一种负载囊泡及其制备方法、试剂盒、药品和用途。

技术介绍

[0002]近年来，人们开发了多种抗癌药物，包括小分子化疗药物。然而，传统的化疗药物带来了严重的副作用，包括全身毒性和多药耐药性(MDR)等。基于核酸的治疗方法的出现提供了替代性抗癌治疗，这有助于改善小分子治疗药物的副作用。
[0003]因此，亟需提供一种稳定有效的核酸药物。

技术实现思路

[0004]本专利技术旨在至少在一定程度上解决现有技术中存在的技术问题至少之一。为此，本专利技术提供了一种负载囊泡及其制备方法、试剂盒、药品和用途，该负载囊泡负载有反义DNA，其进入到细胞内，能促进癌细胞凋亡，且具有稳定性高、可控释放反义DNA等优点；并且，该制备方法具有操作简单等优点。
[0005]需要说明的是，本专利技术是基于专利技术人的下列工作而完成的：
[0006]反义寡核苷酸主要由15
‑
25个核苷酸组成，包括反义DNA和反义RNA。反义DN本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种负载囊泡，其特征在于，包含：DNA修饰的纳米粒；囊泡层，所述囊泡层包覆在所述DNA修饰的纳米粒的外部；反义DNA，所述反义DNA负载于所述纳米粒和/或所述囊泡层上。2.根据权利要求1所述的负载囊泡，其特征在于，所述囊泡层包括组装DNA，所述组装DNA的至少一部分与所述纳米粒上的修饰DNA的至少一部分互补；任选地，所述组装DNA为PPO
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S
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S
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b
‑
DNA或者PPO
‑
S
‑
S
‑
DNA；任选地，所述纳米粒为金纳米粒，所述修饰DNA为巯基DNA；任选地，所述纳米粒为二水合双(对
‑
磺酰苯基)苯基膦化二钾盐保护的金纳米粒。3.根据权利要求2所述的负载囊泡，其特征在于，所述反义DNA与所述组装DNA的序列相同；任选地，所述反义DNA和所述组装DNA具有SEQ ID NO:1所示的核苷酸序列或者具有与其至少80％同源性的核苷酸序列；任选地，所述修饰DNA具有如SEQ ID NO：2所示的核苷酸序列或者具有与其至少80％同源性的核苷酸序列；任选地，所述反义DNA为PPO
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S
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S
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b
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DNA或者PPO
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S
‑
S
‑
DNA；任选地，所述负载囊泡的直径为30
‑
50nm。4.一种制备权利要求1
‑
3任一项所述的负载囊泡的方法，其特征在于，包含：(1)将DNA修饰的纳米粒和囊泡层进行组装，得到框架；(2)将反义DNA与所述框架混合进行反应，以便所述反义DNA负载于所述DNA修饰的纳米粒或所述囊泡层上，制得所述负载囊泡。5.根据权利要求4所述的方法，其特征在于，步骤(2)中，所述反义DNA与所述框架于25
‑
40℃条件下反应15
‑
60min；任选地，所述反义DNA与所述框架的摩尔比600
‑
1000：1，优选为660
‑
670:1。6.根据权利要求5所述的方法，其特征在于，所述DNA修饰的纳米粒的制备步骤包含：将巯基DNA与金纳米粒加入至缓冲液中静置12
‑
24h，然后加入NaCl至终浓度为400
‑
600mM，继续反应得到含有DNA修饰的纳米粒的粗液；任选地，所述巯基DNA的摩尔量为所述金纳米粒摩尔量的100
‑
400倍，优选为200倍；任选地，所述缓冲液包含0.4
‑
0....

【专利技术属性】
技术研发人员：董原辰，章亚男，
申请(专利权)人：中国科学院化学研究所，
类型：发明
国别省市：