β-葡聚糖与M2巨噬细胞靶向肽偶联物、制备方法及重塑肿瘤微环境和免疫抗肿瘤的应用技术

本发明专利技术公开一种β

【技术实现步骤摘要】
β
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葡聚糖与M2巨噬细胞靶向肽偶联物、制备方法及重塑肿瘤微环境和免疫抗肿瘤的应用


[0001]本专利技术属于化学合成医药
，一种β
‑
葡聚糖与M2巨噬细胞靶向肽偶联物、制备方法及其在抗肿瘤、重塑肿瘤微环境和增强免疫中的应用。

技术介绍

[0002]β
‑
葡聚糖是一类由葡萄糖残基通过β
‑
糖苷键以不同连接方式组成的多糖，β
‑ꢀ
葡聚糖类化合物在自然界中广泛存在，天然来源的β
‑
葡聚糖主要存在于各种真菌、细菌与海藻中，且不同结构的β
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葡聚糖有不同的生物活性。β
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葡聚糖被广泛报道可以通过激活巨噬细胞、树突细胞等发挥免疫调节、抗炎、抗病毒及抗肿瘤等作用。
[0003]巨噬细胞源自免疫系统中单核细胞，几乎存在于所有组织中。巨噬细胞作为一种具有可塑性和多能性的细胞群体，在体内外不同的微环境影响下，表现出明显的功能差异。根据活化状态和发挥功能的不同，巨噬细胞主要可分为经典活化的M1型巨噬细胞，和替本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种β
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葡聚糖与M2巨噬细胞靶向肽偶联物，其特征在于，所述β
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葡聚糖与M2巨噬细胞靶向肽偶联物的结构如下：其中所述糖肽偶联物结构式中n＝1～50，m＝1
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10。2.一种如权利要求1所述的β
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葡聚糖与M2巨噬细胞靶向肽偶联物的制备方法，其特征在于：(1)首先对β
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葡聚糖还原端进行氨基修饰，将末端带有胺基的二酰肼、二酰胺等连接臂通过还原胺化反应，连接到β
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葡聚糖还原末端，得到末端胺基的β
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葡聚糖衍生物(BG
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R
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NH2)；(2)然后再将末端带有马来酰亚胺的NHS活泼酯通过酰胺反应，与末端胺基的β
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葡聚糖衍生物反应形成酰胺键，得到末端马来酰亚胺的β
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葡聚糖衍生物(BG
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Mal)；(3)最终利用M2型巨噬细胞靶向肽末端巯基通过高效Click反应与末端马来酰亚胺的β
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葡聚糖衍生物共价偶联，得到β
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葡聚糖还原末端与M2型巨噬细胞靶向肽共价偶联的糖肽偶联物(BG
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MP)。3.根据权利要求2所述β
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葡聚糖与M2巨噬细胞靶向肽偶联物的制备方法，其特征在于，所述β
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葡聚糖与M2巨噬细胞靶向肽偶联物的具体制备步骤如下：(1)将β
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葡聚糖(BG)与连接臂己二酸二酰肼(ADH)溶解于二甲亚砜/乙酸混合反应溶剂中，氮气保护下，于60℃水浴中反应1小时，随后加入氰基硼氢化钠(NaBH3CN)，继续反应48小时，反应结束后，加入等体积氯化钠盐溶液，混匀，加入4倍体积无水乙醇醇沉，离心10分钟，沉淀再次加氯化钠溶液只刚好溶解沉淀，继续醇沉，反复3次后收集沉淀，透析48小时后经减压浓缩后经冷冻干燥即可得β
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葡聚糖还原末端带有氨基的β
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葡聚糖衍生物(BG
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ADH)。(2)将上述得到的β
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葡聚糖衍生物(BG
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ADH)与末端带有马来酰亚胺的NHS活泼酯(sulfo
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SMCC)溶解在PBS缓冲溶液中，氮气保护下，于40℃水浴中反应3小时，反应结束后，加入等体积氯化钠盐溶液，反复醇沉3次后收集沉淀，透析后经浓缩、冻干即可得β
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葡聚糖还原末端马来酰亚胺基团的β
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葡聚糖衍生物(BG
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SMCC)。(3)将上述得到的β
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葡聚糖衍生物(BG
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SMCC)与M2型巨噬细胞靶向肽(M2pep)溶解于DMSO/DMF混合溶剂中，氮气保护下，于40℃水浴中反应4小时，反应结束后，加入等体积氯化钠盐溶液，反复醇沉3次后收集沉淀，透析后经浓缩、冻干即可得β
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葡聚糖还原末端与M2型巨噬细胞靶向肽共价偶联的糖肽偶联物(BG
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MP)。
4.根据权利要求3所述的β
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葡聚糖与M2巨噬细胞靶向肽偶联物的制备方法，其特征在于：β
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【专利技术属性】
技术研发人员：蔡超，李佳，于广利，杨雨，刘杨，王德鹏，
申请(专利权)人：中国海洋大学，
类型：发明
国别省市：