一种用于筛选无MCRV种蟹的荧光定量RT-PCR检测试剂盒及检测方法技术

本发明专利技术涉及水产病原检测领域，具体是一种用于筛选无青蟹呼肠孤病毒种蟹的荧光定量RT

【技术实现步骤摘要】
一种用于筛选无MCRV种蟹的荧光定量RT
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PCR检测试剂盒及检测方法


[0001]本专利技术涉及水产动物病原检测与病害防控
，具体地说，是一种用 于筛选无MCRV种蟹的荧光定量RT
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PCR检测试剂盒及检测方法。

技术介绍

[0002]拟穴青蟹(Scylla paramamosain)俗称青蟹，是我国重要的海水养殖品种。 病害是青蟹健康养殖主要的威胁，青蟹呼肠孤病毒(Mud Crab Reovirus， MCRV)养殖青蟹的主要病原。MCRV是一种双链无囊膜RNA病毒，基因组 包含12个节段，预测存在13个开放阅读框架，可编码13个蛋白。早期研究 显示，该病毒感染可导致近100％的死亡率。近年来的研究显示，该病毒感染 非常普遍，几乎所有青蟹养殖池塘都可以检测到该病毒。因此，筛选无MCRV 种蟹，从繁育阶段净化病原，获取无MCRV病原苗种(SPF)势在必行。
[0003]目前，已存在几种MCRV检测方法，例如普通RT
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PCR检测方法、RT
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【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一对特异性引物，其特征在于，上游引物和下游引物的核苷酸序列分别如SEQ ID NO:2和SEQ ID NO:3所示。2.一种如权利要求1所述的特异性引物在筛选无青蟹呼肠孤病毒种蟹中的应用。3.根据权利要求2所述的应用，其特征在于，所述的特异性引物在制备筛选无青蟹呼肠孤病毒种蟹的荧光定量RT
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PCR检测试剂盒中的应用。4.一种用于筛选无青蟹呼肠孤病毒种蟹的荧光定量RT
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PCR检测试剂盒，其特征在于，所述的试剂盒检测青蟹呼肠孤病毒基因组片段VP11的ORF区；所述的试剂盒包括基于VP11的ORF区设计的一对特异性引物，上游引物MCRVRF的序列如SEQ ID NO:2所示，下游引物MCRVRR的序列如SEQ ID NO:3所示。5.根据权利要求4所述的试剂盒，其特征在于，所述的试剂盒还包括含有SYBR Green染料的Taq酶预混试剂和含随机引物Random6...

【专利技术属性】
技术研发人员：李新苍，储旭，周俊芳，房文红，王元，赵姝，
申请(专利权)人：中国水产科学研究院东海水产研究所，
类型：发明
国别省市：