肝素测定的试剂盒、应用及其制备方法技术

本申请提供一种肝素测定的试剂盒、应用及其制备方法。该试剂盒包括：试剂R1，其中，试剂R1包括潘生丁。本申请的试剂盒中，通过潘生丁代替现有技术中的硫酸葡聚糖，能够降低样本中游离PF4的干扰，降低肝素与抗凝蛋白结合的影响，从而提高肝素测试结果的准确性。从而提高肝素测试结果的准确性。从而提高肝素测试结果的准确性。

【技术实现步骤摘要】
肝素测定的试剂盒、应用及其制备方法


[0001]本申请涉及生化检验和体外诊断领域，特别涉及一种肝素测定的试剂盒、应用及其制备方法。

技术介绍

[0002]肝素是由二种多糖交替连接而成的多聚体，无论在体内还是体外，均具有很强的抗凝作用，临床上把它作为抗凝剂药物而广泛使用，主要用于血栓性疾病的治疗及心血管手术、血液透析、体外循环等过程的抗凝处理。
[0003]肝素作为药物，其活性功能的精准检测无论对于生产过程的质量控制还是临床治疗中患者的动态监控均具有重要的意义。作为生物活性物质，其检测不能单单用化学或物理的方法，必须与生物检测法结合，目前肝素的活性测定多采用凝固法和发色底物法。凝固法操作繁琐，耗时费力，精准性很差。相对于凝固法，发色底物法具有灵敏度高，操作简便的特点且检测范围更广。
[0004]利用发色底物法的原理产生了一些肝素活性测定方法。然而传统肝素测定的试剂盒的价格较贵，且检测结果的准确性较低。

技术实现思路

[0005]本申请提供一种肝素测定的试剂盒、应用及其制备方法，以解决现有技术中肝素测定的试剂盒的价格较贵，且检测结果的准确性较低的技术问题。
[0006]为解决上述技术问题，本申请采用的一个技术方案是：提供一种肝素测定的试剂盒，该试剂盒包括：试剂R1，试剂R1包括潘生丁。
[0007]进一步地，试剂R1还包括三羟甲基氨基甲烷缓冲液。
[0008]进一步地，试剂R1还包括第一稳定剂，第一稳定剂包括第一蛋白酶保护剂。
[0009]进一步地，第一蛋白酶保护剂包括：Prionex，第一稳定剂还包括吐温
‑
20、蔗糖、甘露醇、氯化钠和聚乙二醇中的至少一种。
[0010]进一步地，试剂盒还包括试剂R2和稀释液。
[0011]进一步地，试剂R2和稀释液均包括三羟甲基氨基甲烷缓冲液。
[0012]进一步地，稀释液还包括第三稳定剂和第三防腐剂，其中第三稳定剂包括第二蛋白酶保护剂。
[0013]进一步地，试剂R1、试剂R2和稀释液均为液态。
[0014]进一步地，试剂R1还包括牛的活化X因子和第一防腐剂。
[0015]进一步地，试剂R2还包括：发色底物、第二稳定剂和第二防腐剂。
[0016]进一步地，试剂R1、试剂R2及稀释液的pH值均为7.2～7.6。
[0017]进一步地，潘生丁的质量与试剂R1的质量的百分比为0.1％
‑
0.5％。
[0018]为解决上述技术问题，本申请采用的另一个技术方案是：提供一种如上述任一实施例的肝素测定的试剂盒在凝血检测中的应用。
[0019]为解决上述技术问题，本申请采用的又一个技术方案是：提供一种肝素测定的试剂盒的制备方法，该制备方法包括：通过潘生丁制备试剂R1；制备试剂R2；制备稀释液；将所述试剂R1、所述试剂R2和所述稀释液进行分装、装盒得到所述试剂盒。
[0020]本申请的有益效果是：区别于现有技术的情况，本申请提供的试剂盒包括试剂R1，其中，试剂R1包括潘生丁。本申请通过使用潘生丁代替现有技术中的硫酸葡聚糖，能够降低样本中游离PF4的干扰，降低肝素与抗凝蛋白结合的影响，从而提高肝素测试结果的准确性；且潘生丁的价格低廉，能够降低试剂盒的生产成本。
附图说明
[0021]为了更清楚地说明本申请实施例中的技术方案，下面将对实施例描述中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图仅仅是本申请的一些实施例，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他的附图，其中：
[0022]图1是本申请一实施例提供的肝素测定的试剂盒的制备方法的一实施例的流程示意图；
[0023]图2是本申请一实施例提供的参比试剂盒和实施例1的试剂盒测试UFH的结果相关性分析图；
[0024]图3是本申请一实施例提供的参比试剂盒和实施例1的试剂盒测试LMWH的结果相关性分析图；
[0025]图4是本申请一实施例提供的参比试剂盒和实施例1的试剂盒测试利伐沙班样本的结果相关性分析图；
[0026]图5是本申请一实施例提供的参比试剂盒和实施例2的试剂盒测试UFH的结果相关性分析图；
[0027]图6是本申请一实施例提供的参比试剂盒和实施例2的试剂盒测试LMWH的结果相关性分析图；
[0028]图7是本申请一实施例提供的参比试剂盒和实施例2的试剂盒测试利伐沙班样本的结果相关性分析图；
[0029]图8是本申请一实施例提供的参比试剂盒和实施例3的试剂盒测试UFH的结果相关性分析图；
[0030]图9是本申请一实施例提供的参比试剂盒和实施例3的试剂盒测试LMWH的结果相关性分析图；
[0031]图10是本申请一实施例提供的参比试剂盒和实施例3的试剂盒测试利伐沙班样本的结果相关性分析图。
具体实施方式
[0032]下面将结合本申请实施例中的附图，对本申请实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅是本申请的一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本申请中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本申请保护的范围。
[0033]需要说明，若本申请实施例中有涉及方向性指示(诸如上、下、左、右、前、后
……
)，则该方向性指示仅用于解释在某一特定姿态(如附图所示)下各部件之间的相对位置关系、运动情况等，如果该特定姿态发生改变时，则该方向性指示也相应地随之改变。
[0034]另外，若本申请实施例中有涉及“第一”、“第二”等的描述，则该“第一”、“第二”等的描述仅用于描述目的，而不能理解为指示或暗示其相对重要性或者隐含指明所指示的技术特征的数量。由此，限定有“第一”、“第二”的特征可以明示或者隐含地包括至少一个该特征。另外，各个实施例之间的技术方案可以相互结合，但是必须是以本领域普通技术人员能够实现为基础，当技术方案的结合出现相互矛盾或无法实现时应当认为这种技术方案的结合不存在，也不在本申请要求的保护范围之内。
[0035]普通肝素(unfractionated heparin，UFH)首先从肝脏发现而得名，是由糖醛酸链和葡萄胺链交替组成的多糖链混合物，带负电荷，平均分子量15000D。天然肝素主要存在于肥大细胞，现在主要从牛肺或猪小肠黏膜中提取，是动物体内一种天然抗凝血物质，它主要通过增强抗凝血酶III与凝血酶的结合能力，加速凝血酶的失活从而发挥抗凝作用，在体内外都有效果。
[0036]低分子肝素(LMWH，low molecular weight heparin，LMWH)是以UFH为原料，用物理、化学等方法将其分解或降解所得，其分子量约为UFH的三分之一。与UFH相比，LMWH戊糖链较短，抑制凝血酶的能力减弱，抑制Xa：IIa的比例升高，并且LMWH半衰期更长，具有较好的生物利用度，不易发生HIT(Heparin
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【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种肝素测定的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒包括：试剂R1，所述试剂R1包括潘生丁。2.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述试剂R1还包括三羟甲基氨基甲烷缓冲液。3.根据权利要求1或2所述的试剂盒，其特征在于，所述试剂R1还包括第一稳定剂，所述第一稳定剂包括第一蛋白酶保护剂。4.根据权利要求3所述的试剂盒，其特征在于，所述第一蛋白酶保护剂包括：Prionex，所述第一稳定剂还包括吐温
‑
20、蔗糖、甘露醇、氯化钠和聚乙二醇中的至少一种。5.根据权利要求2所述的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒还包括试剂R2和稀释液，所述试剂R2和所述稀释液均包括所述三羟甲基氨基甲烷缓冲液。6.根据权利要求4所述的试剂盒，其特征在于，所述稀释液还包括第三稳定剂和第三防腐剂，其中所述第三稳定剂包括第二蛋白酶保护剂。7.根据权利要求4所述的试剂盒，其特征在于，所述...

【专利技术属性】
技术研发人员：曹佳强，郑剑通，蔡晓霞，赵伟，
申请(专利权)人：深圳市帝迈生物技术有限公司，
类型：发明
国别省市：