一种外源添加AKG缓解冷诱导肺泡巨噬细胞活化的应用制造技术

本发明专利技术公开了一种外源添加AKG缓解冷诱导肺泡巨噬细胞活化的应用，其特征在于，包括以下步骤：S1、通过q

【技术实现步骤摘要】
一种外源添加AKG缓解冷诱导肺泡巨噬细胞活化的应用


[0001]本专利技术涉及医药
，具体为一种外源添加AKG缓解冷诱导肺泡巨噬细胞活化的应用。

技术介绍

[0002]常见的应激源包括：运输应激、冷应激、热应激、氧化应激、束缚应激和创伤应激等，应激会导致机体能量代谢出现变化，影响机体正常的神经内分泌、免疫及生殖等功能。目前，应激相关的研究涵盖了许多不同的物种，这其中包括但不限于人、禽畜、啮齿动物、无脊椎动物、植物甚至于微生物。涉及了神经、免疫、代谢、生殖等多个学科，研究范围之广，内容之多足以说明人们对应激现象愈来愈重视，并且显示出应激与人类的生产，生活息息相关，因此对应激的研究依旧值得探讨。
[0003]冷应激特指机体为抵御外界冷刺激而产生的全身非特异性的适应性反应冷应激由冷暴露诱导，从生产性能，免疫功能，抗氧化功能，神经内分泌功能等几个方面影响机体。肺脏组织的巨噬细胞主要分为肺泡巨噬细胞(Alveolar macrophage，AM)和肺间质巨噬细胞(Lung interstitial macrophages，IM)，这两类巨噬本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种外源添加AKG缓解冷诱导肺泡巨噬细胞活化的应用，其特征在于，包括以下步骤：S1、通过q
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PCR试验，对比在正常小鼠和冷刺激小鼠饲料中添加AKG后的炎症因子表达情况的差异；S2、体内实验：分离原代肺泡巨噬细胞，采集肺脏组织，提取总蛋白和总RNA用于分析炎症因子在冷刺激条件下饲喂正常饲料和在饲料中添加AKG的小鼠中的表达；S3、体外实验：小鼠肺泡巨噬细胞中炎症因子表达水平检测。对照组和加LPS刺激组的肺泡巨噬细胞提取总蛋白和总RNA，用于分析在LPS刺激的条件下正常培养基和在添加AKG的培养基中细胞炎症因子的表达情况，免疫荧光检测小鼠巨噬细胞的标志物；S4、AKG对肺泡巨噬细胞炎症因子抑制作用的试验选择长势良好且密度约为80％的MH
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S细胞，将培养瓶中的细胞接种于10cm细胞培养皿中继续培养，待细胞密度达60
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70％时，将培养皿中的上清弃去，用PBS清洗一次，LPS刺激作为阳性对照，添加AKG和LPS处理6h造模，收集培养皿中的肺泡巨噬细胞，收集好的细胞用提取细胞中的总蛋白并应用BCA蛋白浓度测定法将细胞中的总蛋白含量统一用于后续试验。在接下来的实验中采用Western blot实验技术检测肺泡巨噬细胞中iNOS、IL
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1β、和TNF
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α的蛋白表达情况。2.根据权利要求1所述的一种外源添加AKG缓解冷诱导肺泡巨噬细胞活化的应用，其特征在于：采用q
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PCR等方法，对比正常小鼠和冷刺激的小鼠饲料中添加AKG后的炎症因子表达情况的差...

【专利技术属性】
技术研发人员：徐彬，郭景茹，韩琦，史慧莹，吴文聪，李倩茹，
申请(专利权)人：黑龙江八一农垦大学，
类型：发明
国别省市：