玄柏爽声复方提取物的质量检测方法及指纹图谱构建方法技术

本发明专利技术公开了一种玄柏爽声复方提取物的质量检测方法及指纹图谱构建方法。该方法包括下述步骤：利用高效液相色谱检测供试品溶液即可；其中，供试品溶液为含有玄柏爽声复方提取物的溶液；高效液相色谱检测中，选择210

【技术实现步骤摘要】
玄柏爽声复方提取物的质量检测方法及指纹图谱构建方法


[0001]本专利技术涉及一种玄柏爽声复方提取物的质量检测方法及指纹图谱构建方法。

技术介绍

[0002]玄柏爽声颗粒方由玄参、山豆根、紫菀、黄柏、桔梗、蝉蜕、甘草组成，功能清热润燥、消肿止痛、开音利咽。复旦大学附属眼耳鼻喉科医院应用“玄柏爽声颗粒”治疗喉瘖临床应用已有四十余年，疗效明确，临床基础广泛。尽管玄柏爽声复方临床应用基础广泛，但缺乏有效的质量控制手段。
[0003]玄参是方中君药，代表性有效成分包括哈巴苷、哈巴俄苷、安格洛苷C、毛蕊花糖苷以及肉桂酸。
[0004]山豆根是方中臣药，其中生物碱成分为其抗炎主要活性成分，包括苦参碱和氧化苦参碱。有报道其毒性成分亦来源于其生物碱，其中金雀花碱、氧化苦参碱、苦参碱和被认为于其神经系统、消化系统及呼吸系统的毒性相关。
[0005]黄柏(川)是方中佐药，其中生物碱类是其抗炎抗氧化的活性成分，药根碱、盐酸黄柏碱和盐酸小檗碱为其代表指标活性成分。
[0006]桔梗是方中使药，皂苷类成分为主要活性成分，其中桔梗皂苷D为其代表，也是药典规定含量测定的有效成分。
[0007]甘草同为方中使药，药典规定甘草苷和甘草酸为含量测定指标成分。
[0008]紫菀为方中使药，紫菀酮为其黄酮类活性成分也是药典规定含量测定成分。新绿原酸是紫菀配方颗粒部颁标准中测定的成分。
[0009]蝉蜕为方中使药，2015版药典中以性状鉴别为主，有报道其有效成分为多种氨基酸。
[0010]药品的质量是保证临床用药安全有效的前提，由于中药成分复杂，个别成分的定性定量分析仍难以全面反应药品的全面信息。中药指纹图谱目前是控制中药复方质量的有效手段，通过建立指纹图谱建立的质量标准可有效控制产品中有效成分和毒性成分的含量，是临床用药安全、有效的有力保障。指纹图谱作为整体上对某药物进行质量控制比起单一组分甚至多组分定性定量方法更加明显。
[0011]因此，为了有效控制产品中有效成分和毒性成分的含量，迫切需要对玄柏爽声复方提取物建立可反应内在关键物质变化的全面的质量检测方法，从而更有效地控制玄柏爽声复方提取物的质量，对玄柏爽声复方在临床的用药安全具有重大的意义。

技术实现思路

[0012]本专利技术所要解决的技术问题是为了克服现有技术中缺乏有效的针对玄柏爽声复方提取物全面质量控制方法的缺陷，提供了一种玄柏爽声复方提取物的质量检测方法及指纹图谱构建方法。该质量检测方法可对提取物各成分比例特征、关键工艺毒性成分含量变化进行全面的追踪和控制，可以客观、全面、准确的评价玄柏爽声复方提取物的质量，对控
制玄柏爽声复方提取物的质量和保证临床疗效具有重要意义。
[0013]本专利技术通过以下技术方案解决上述技术问题：
[0014]本专利技术提供了一种玄柏爽声复方提取物的质量检测方法其包括下述步骤：
[0015]利用高效液相色谱检测供试品溶液即可；
[0016]其中，所述供试品溶液为含有玄柏爽声复方提取物的溶液；
[0017]所述高效液相色谱检测中，选择210
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225nm、260
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270nm和310
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330nm三个检测波长范围共同用来检测；
[0018]所述高效液相色谱检测中，流动相包括：流动相A为磷酸水溶液或乙酸水溶液，流动相B为甲醇，流动相C为乙腈；
[0019]采用梯度洗脱方式洗脱，所述梯度洗脱的条件如下所述：
[0020][0021]上述百分比为流动相A、流动相B或流动相C的体积与“流动相A、流动相B和流动相C”总体积之比。
[0022]本专利技术中，所述玄柏爽声复方提取物一般可通过下述三种方式制得：
[0023]方法一：取玄柏复方组合物适量，加水煎煮，合并煎液，即可；
[0024]方法二：取玄柏复方组合物适量，加水煎煮，合并煎液；将所述煎液沉淀，取上清液；其中，所述沉淀的条件为：(a)在0
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8℃下沉淀3
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8h，或(b)在15
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29℃下沉淀4
‑
8h；将所述上清液浓缩至相对密度为1.02
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1.10，即可；
[0025]方法三：取玄柏复方组合物适量，加水煎煮，合并煎液；将所述煎液沉淀，取上清液；其中，所述沉淀的条件为：(a)在0
‑
8℃下沉淀3
‑
6h，或(b)在15
‑
29℃下沉淀4
‑
8h；将所述上清液浓缩至相对密度为1.02
‑
1.10，干燥，既可。
[0026]其中，以重量份计，所述玄柏复方组合物包括以下组分：玄参2
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6份、山豆根1
‑
3份、紫菀1
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3份、黄柏1
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3份、桔梗1
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3份、蝉蜕1
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3份和甘草1
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3份。
[0027]其中，以重量份计，所述玄柏复方组合物较佳地包括以下组分：玄参3份、山豆根1份、紫菀2份、黄柏2份、桔梗2份、蝉蜕2份和甘草2份。
[0028]其中，所述煎煮的次数可为本领域常规，较佳地为两次。所述煎煮的过程中，第一次煎煮加水量可为8
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12倍，例如8倍、10倍。所述煎煮的过程中，第二次煎煮加水量可为6
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8倍，例如6倍、8倍。所述煎煮的时间可为本领域常规，一般为加热至沸腾，自沸腾时开始计时，每次保持微沸1
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1.5小时，例如1小时或1.5小时。所述煎煮之后一般还需过80目筛。
[0029]其中，所述沉淀的条件为(a)时，所述沉淀的温度较佳地为4℃。所述沉淀的时间可为4h或6h。
[0030]在一优选的实施方案中，所述沉淀的条件为在4℃下沉淀4h。
[0031]其中，所述沉淀的条件为(b)时，所述沉淀的温度可为15
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25℃，例如25℃。所述沉淀的时间较佳地为6h。
[0032]在一优选的实施方案中，所述沉淀的条件为在25℃下沉淀6h。
[0033]其中，所述浓缩的压力可为本领域常规，较佳地为常压浓缩。所述常压一般指一个大气压。
[0034]其中，所述相对密度是在70℃下测试。
[0035]其中，所述相对密度可为1.02
‑
1.075，较佳地为1.03
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1.07，例如1.05。
[0036]其中，所述浓缩之后较佳地可通过加入辅料后再进行干燥。
[0037]所述辅料的种类可为本领域常规，较佳地为糊精。
[0038]所述干燥的操作和条件可为本领域常规，较佳地为喷雾干燥。
[0039]所述干燥的温度可为本领域常规，较佳地为110
‑
120℃。
[0040]本专利技术中，所述供试品溶液的制备方法可为本领域常规本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种玄柏爽声复方提取物的质量检测方法，其特征在于，其包括下述步骤：利用高效液相色谱检测供试品溶液即可；其中，所述供试品溶液为含有玄柏爽声复方提取物的溶液；所述高效液相色谱检测中，选择210
‑
225nm、260
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270nm和310
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330nm三个检测波长范围共同用来检测；所述高效液相色谱检测中，流动相包括：流动相A为磷酸水溶液或乙酸水溶液，流动相B为甲醇，流动相C为乙腈；采用梯度洗脱方式洗脱，所述梯度洗脱的条件如下所述：上述百分比为流动相A、流动相B或流动相C的体积与“流动相A、流动相B和流动相C”总体积之比。2.如权利要求1所述的玄柏爽声复方提取物的质量检测方法，其特征在于，所述供试品溶液的制备方法为将所述玄柏爽声复方提取物分散于溶剂中制得；所述溶剂较佳地为醇类溶剂或水；较佳地，当所述溶剂为醇类溶剂时，所述醇类溶剂为甲醇水溶液或乙醇水溶液，较佳地为甲醇水溶液；所述甲醇水溶液的体积百分数为大于0且小于等于50％，例如15％或50％；所述乙醇水溶液的体积百分数为大于0且小于等于50％，例如15％；较佳地，所述分散为超声分散；所述超声的功率较佳地为500W；所述超声的频率较佳地为40kHz；所述超声的时间较佳地为15～90min，更佳地为30～60min，例如30min或60min。3.如权利要求2所述的玄柏爽声复方提取物的质量检测方法，其特征在于，所述玄柏爽声复方提取物通过下述三种方式制得：方法一：取玄柏复方组合物适量，加水煎煮，合并煎液，即可；方法二：取玄柏复方组合物适量，加水煎煮，合并煎液；将所述煎液沉淀，取上清液；其中，所述沉淀的条件为：(a)在0
‑
8℃下沉淀3
‑
8h，或(b)在15
‑
29℃下沉淀4
‑
8h；将所述上清液浓缩至相对密度为1.02
‑
1.10，即可；方法三：取玄柏复方组合物适量，加水煎煮，合并煎液；将所述煎液沉淀，取上清液；其中，所述沉淀的条件为：(a)在0
‑
8℃下沉淀3
‑
6h，或(b)在15
‑
29℃下沉淀4
‑
8h；将所述上清
液浓缩至相对密度为1.02
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1.10，干燥，既可。4.如权利要求3所述的玄柏爽声复方提取物的质量检测方法，其特征在于，以重量份计，所述玄柏复方组合物包括以下组分：玄参2
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6份、山豆根1
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3份、紫菀1
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3份、黄柏1
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3份、桔梗1
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3份、蝉蜕1
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3份和甘草1
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3份；其中，以重量份计，所述玄柏复方组合物较佳地包括以下组分：玄参3份、山豆根1份、紫菀2份、黄柏2份、桔梗2份、蝉蜕2份和甘草2份；和/或，所述沉淀的条件为(a)时，所述沉淀的温度为4℃；和/或，所述沉淀的条件为(a)时，所述沉淀的时间为4h或6h；较佳地，所述沉淀的条件为在4℃下沉淀4h；和/或，步骤(2)中，所述沉淀的条件为(b)时，所述沉淀的温度为15
‑
25℃，例如25℃；和/或，步骤(2)中，所述沉淀的条件为(b)时，所述沉淀的时间为6h；较佳地，所述沉淀的条件为在25℃下沉淀6h；和/或，所述相对密度为1.02
‑
1.075，较佳地为1.03
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1.07，例如1.05。5.如权利要求1所述的玄柏爽声复方提取物的质量检测方法，其特征在于，所述高效液相色谱检测中，色谱柱为C
18
的色谱柱且所述色谱柱的粒度为3～3.5μm，较佳地为Diamonsil Spersil C
18
，其规格为4.6mm
×
250mm，3μm或Agilent ZORABX SB C
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【专利技术属性】
技术研发人员：黄滔敏，秦晶，于春峰，李小霞，周逸彬，周丽萍，谢胜盛，
申请(专利权)人：复旦大学附属眼耳鼻喉科医院，
类型：发明
国别省市：