一种用于靶向治疗肿瘤的重组融合蛋白及其制备方法技术

本发明专利技术涉及生物医药领域，具体涉及一种用于靶向治疗肿瘤的重组融合蛋白及其制备方法。本发明专利技术将蛋白传导域TAT与GLIPR1结合构成融合蛋白来提高GLIPR1的靶向性以及穿透能力，优化GLIPR1蛋白主要靠内吞作用进入细胞质的缺陷。本发明专利技术制备的重组融合蛋白TAT

【技术实现步骤摘要】
一种用于靶向治疗肿瘤的重组融合蛋白及其制备方法


[0001]本专利技术涉及生物医药领域，具体涉及一种用于靶向治疗肿瘤的重组融合蛋白及其制备方法。
技术背景
[0002]胶质瘤致病相关蛋白1（GLIPR1）又称为RTVP1，最早由Murphy, E.V.等于1995年发现于人类成胶质细胞瘤，全长266个氨基酸残基，具有一段信号肽和一段跨膜区段，与PR家族（致病相关蛋白家族）以及CRISP家族（富含半胱氨酸的分泌蛋白家族）同源。20世纪末，GLIPR1被发现作为抑癌基因在前列腺癌中通过诱导细胞的凋亡及癌基因蛋白的降解发挥抑癌作用，受p53调控。肺癌A549细胞中高表达GLIPR1后，显著抑制A549细胞的生长，GLIPR1还可抑制小鼠肺部异种移植肿瘤的生长。此外，在骨肉瘤、膀胱癌中均发现GLIPR1的表达量较低，说明GLIPR1在多种实体瘤中发挥抑癌作用。经腺病毒载体介导的GLIPR1（AdGlipr1）和GLIPR1基因修饰的肿瘤细胞疫苗在前列腺癌小鼠模型中显示出显著的抗肿瘤活性。去除跨膜区段后的GLIPR1蛋白（GLIPR1
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【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种靶向治疗肿瘤的重组融合蛋白，其特征在于，所述的重组融合蛋白为TAT
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GLIPR1，是由蛋白传导域修饰GLIPR
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1形成的融合蛋白，其氨基酸序列如Seq_1所示。2.根据权利要求1所述的重组融合蛋白，其特征在于，TAT
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GLIPR1中含有如Seq_3所示的蛋白传导域序列，以及如Seq_4所示的TAT编码基因。3.根据权利要求1所述的重组融合蛋白，其特征在于，所述重组融合蛋白TAT
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GLIPR1具有如Seq_2所示的编码基因核苷酸序列。4.一种重组融合蛋白TAT
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GLIPR1的制备方法，所述方法包括步骤有：（1）以含有GLIPR1基因的cDNA克隆质粒pLX304
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GLIPR1为模板，设计特异性引物序列，通过PCR扩增编码获得重组融合蛋白TAT
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GLIPR1的基因片段；（2）将基因片段双酶切后与表达载体pET
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15b连接，形成重组表达载体pET
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15b
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tat
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glipr...

【专利技术属性】
技术研发人员：生秀梅，王均洁，高迪，张涵，崔璨，
申请(专利权)人：江苏大学，
类型：发明
国别省市：