具有肽聚糖分解活性的蛋白质及编码该蛋白质的DNA、微生物分解制剂以及微生物分解方法技术

本文提供来自膨胀芽孢杆菌属物种(Tumebacillus sp.)NITE BP

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】具有肽聚糖分解活性的蛋白质及编码该蛋白质的DNA、微生物分解制剂以及微生物分解方法


[0001]本专利技术涉及具有肽聚糖分解活性的蛋白质及编码该蛋白质的DNA、微生物分解制剂以及微生物分解方法。

技术介绍

[0002]利用活性污泥法进行污水净化时，被除去的有机物成为包含微生物(细菌)的絮状物，产生称为剩余污泥的污泥。从废水处理设备排出的剩余污泥在产业废弃物中占多达20％以上的比例。通常而言，剩余污泥在脱水、干燥之后被燃烧处理(非专利文献1：平成30年度事业、产业废弃物排出、处理情况调查报告书，平成28年度实绩(概略版)，非专利文献2：山本昌幸，“关于污水的燃烧技术”，日本燃料学会志，一般社团法人日本燃烧学会，2011，第53卷，164号，p91
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96)。
[0003]现有技术文献
[0004]非专利文献
[0005]非专利文献1：“平成30年度事业、产业废弃物排出、处理情况调查报告书，平成28年度实绩(概略版)”[在线]，平成31年3月，环境省环境再生、资源循环局废弃物规制课[令和2年3月17日检索]，互联网<URL：https：//www.e
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stat.go.jp/stat
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search/file
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download？statInfId＝000031887949&fileKind＝2>
[0006]非专利文献2：山本昌幸，“关于污水的燃烧技术”，日本燃料学会志，一般社团法人日本燃烧学会，2011，第53卷，164号，p91
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96

技术实现思路

[0007]专利技术要解决的课题
[0008]然而，燃烧处理剩余污泥时，会产生温室效应气体，因此，出于对环境的考虑，要求将剩余污泥减容。作为将剩余污泥减容的方法，提出了分解构成剩余污泥的微生物的方法。
[0009]本专利技术的目的在于提供可分解肽聚糖的新蛋白质及编码该蛋白质的DNA、微生物分解制剂以及微生物分解方法。
[0010]用于解决课题的手段
[0011]本专利技术涉及以下例示的[1]～[11]。
[0012][1]一种蛋白质，其来自膨胀芽孢杆菌属物种(Tumebacillus sp.)NITE BP
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02779，且具有肽聚糖分解活性。
[0013][2]根据[1]所述的蛋白质，其为分泌蛋白质。
[0014][3]一种蛋白质，其为以下(A1)～(A3)中任一种蛋白质，
[0015](A1)包含序列号2的1～164位氨基酸序列，且具有肽聚糖分解活性的蛋白质，
[0016](A2)包含序列号2的1～164位氨基酸序列中1～10个氨基酸残基被取代、缺失、插入或添加的氨基酸序列，且具有肽聚糖分解活性的蛋白质，
[0017](A3)包含相对于序列号2的1～164位氨基酸序列具有90％以上同一性的氨基酸序列，且具有肽聚糖分解活性的蛋白质。
[0018][4]根据[1]～[3]中任一项所述的蛋白质，其中，
[0019]上述肽聚糖分解活性为分解N
‑
乙酰胞壁酸与N
‑
乙酰葡萄糖胺之间的糖苷键的活性。
[0020][5]一种蛋白质，其为以下(a1)～(a4)中任一种蛋白质，
[0021](a1)由序列号2的1～164位氨基酸序列组成的蛋白质，
[0022](a2)由序列号2的1～164位氨基酸序列中1位的Ala被Met取代的氨基酸序列组成的蛋白质，
[0023](a3)由序列号2的1～164位氨基酸序列中1位的Ala被Met取代，在该Met的N末端添加序列号21记载的氨基酸序列的氨基酸序列组成的蛋白质，
[0024](a4)由序列号2的1～164位氨基酸序列中在1位的Ala的N末端添加Met的氨基酸序列组成的蛋白质。
[0025][6]一种蛋白质，其为以下(B1)～(B3)中任一种蛋白质，
[0026](B1)包含序列号4(SEQ ID No：4)的1～493位氨基酸序列，且具有肽聚糖分解活性的蛋白质，
[0027](B2)包含序列号4的1～493位氨基酸序列中1～10个氨基酸残基被取代、缺失、插入或添加的氨基酸序列，且具有肽聚糖分解活性的蛋白质，
[0028](B3)包含相对于序列号4的1～493位氨基酸序列具有90％以上同一性的氨基酸序列，且具有肽聚糖分解活性的蛋白质。
[0029][7]根据[1]、[2]或[6]所述的蛋白质，其中，
[0030]上述肽聚糖分解活性为N
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乙酰胞壁酰
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L
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丙氨酸酰胺酶活性。
[0031][8]一种蛋白质，其为以下(b1)～(b4)中任一种蛋白质，
[0032](b1)由序列号4的1～493位氨基酸序列组成的蛋白质，
[0033](b2)由序列号4的1～493位氨基酸序列中1位的Glu被Met取代的氨基酸序列组成的蛋白质，
[0034](b3)由序列号4的1～493位氨基酸序列中1位的Glu被Met取代，在该Met的N末端添加序列号21记载的氨基酸序列的氨基酸序列组成的蛋白质，
[0035](b4)由序列号4的1～493位氨基酸序列中在1位的Glu的N末端添加Met的氨基酸序列组成的蛋白质。
[0036][9]一种DNA，其编码[1]～[8]中任一项所述的蛋白质。
[0037][10]一种载体，其包含[9]所述的DNA。
[0038][11]一种转化体，其包含[9]所述的DNA或[10]所述的载体。
[0039][12]一种微生物分解制剂，其包含选自由[1]～[8]中任一项所述的蛋白质、以及[11]所述的转化体及其培养物组成的组中的至少1种。
[0040][13]一种微生物分解方法，其包括使选自由[1]～[8]中任一项所述的蛋白质、以及[11]所述的转化体及其培养物组成的组中的至少1种作用于靶标微生物的工序。
[0041]专利技术效果
[0042]根据本专利技术，能够提供可分解肽聚糖的新蛋白质及编码该蛋白质的DNA、微生物分
解制剂以及微生物分解方法。
[0043]附图简单说明
[0044][图1]为示出代表性的肽聚糖的结构及可被肽聚糖分解酶切割的部位的图。
[0045][图2]为示出了在实验4中添加膨胀芽孢杆菌属物种(Tumebacillus sp.)NITE BP
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02779之后的剩余污泥的干燥重量的图。
[0046][图3]为在实验6中将膨胀芽孢杆菌属物种(Tumebacillus sp.)NITE BP
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02779的培养上清液利用柱层析法(Column chromatography)进行分级，并检查了肽聚糖分解活性的图。
[0047][图4本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】1.一种蛋白质，其来自膨胀芽孢杆菌属物种(Tumebacillus sp.)NITE BP
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02779，且具有肽聚糖分解活性。2.根据权利要求1所述的蛋白质，其为分泌蛋白质。3.一种蛋白质，其为以下(A1)～(A3)中任一种蛋白质，(A1)包含序列号2的1～164位氨基酸序列，且具有肽聚糖分解活性的蛋白质，(A2)包含序列号2的1～164位氨基酸序列中1～10个氨基酸残基被取代、缺失、插入或添加的氨基酸序列，且具有肽聚糖分解活性的蛋白质，(A3)包含相对于序列号2的1～164位氨基酸序列具有90％以上同一性的氨基酸序列，且具有肽聚糖分解活性的蛋白质。4.根据权利要求1～3中任一项所述的蛋白质，其中，所述肽聚糖分解活性为分解N
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乙酰胞壁酸与N
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乙酰葡萄糖胺之间的糖苷键的活性。5.一种蛋白质，其为以下(a1)～(a4)中任一种蛋白质，(a1)由序列号2的1～164位氨基酸序列组成的蛋白质，(a2)由序列号2的1～164位氨基酸序列中1位的Ala被Met取代的氨基酸序列组成的蛋白质，(a3)由序列号2的1～164位氨基酸序列中1位的Ala被Met取代，在该Met的N末端添加序列号21记载的氨基酸序列的氨基酸序列组成的蛋白质，(a4)由序列号2的1～164位氨基酸序列中在1位的Ala的N末端添加Met的氨基酸序列组成的蛋白质。6.一种蛋白质，其为以下(B1)～(B3)中任一种蛋白质，(B1)包含序列号4的1～493位氨基酸序列，且具有肽聚糖分解活性的蛋白质，(B2)包含序...

【专利技术属性】
技术研发人员：满井智和，播磨晃帆，大西优介，
申请(专利权)人：株式会社片冈微生物研究所，
类型：发明
国别省市：