一种BADSCs膜片与导电纳米纤维复合心脏贴片及其制备方法技术

本发明专利技术具体涉及一种BADSCs膜片与导电纳米纤维复合心脏贴片及其制备方法。该复合心脏贴片主要由棕色脂肪来源的干细胞（BADSCs）膜片逐层堆叠，并附着于导电纳米纤维薄膜（PSN）表面组成，其中导电纳米纤维薄膜主要由电纺聚(ε

【技术实现步骤摘要】
一种BADSCs膜片与导电纳米纤维复合心脏贴片及其制备方法


[0001]本专利技术涉及生物科技、再生生物工程、医用心脏贴片
，具体涉及一种BADSCs膜片与导电纳米纤维复合心脏贴片及其制备方法。

技术介绍

[0002]由血液供应中断引起的缺血性心肌梗死（简称MI）占疾病和死亡的大部分。目前心肌梗死的治疗原则主要是保护和维持心脏功能，挽救垂死的心肌，防止梗死面积扩大。然而，天然心肌细胞的有限增殖和伴随的炎症反应经常导致纤维重塑和心力衰竭。一般来说，心肌梗死的有效治疗需要引入功能性物质，例如注射活细胞、蛋白质和基因等。而心肌细胞的及时更新对于治疗心肌梗死具有重要意义。迄今为止，基于干细胞的疗法已成为各种难治性疾病的新兴解决方案，包括急性心肌梗死。然而，注射后的低细胞保留仍然影响干细胞疗法的治疗效率。
[0003]近年来，人工心脏贴片在提供心肌再生疗法方面显示出巨大潜力，从而促进了心脏组织重塑。例如，制造了具有临床相关大小的人类诱导多能干细胞衍生的心肌贴片用于治疗MI。这种心脏贴片不仅显着减少了梗死面积，并可改善了心脏功能。与含有生物制本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种BADSCs膜片与导电纳米纤维复合心脏贴片的制备方法，其特征在于：该导电纳米纤维复合心脏贴片主要由棕色脂肪来源的干细胞（BADSCs）膜片逐层堆叠，并附着于导电纳米纤维(PSN)薄膜表面组成；其中PSN薄膜主要由电纺聚(ε
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己内酯)(PCL)、丝素蛋白(SF)和碳纳米管(CNTs)共混并通过静电纺丝制得，制备步骤如下：S1:BADSCs的分离：从大鼠的肩胛骨部位分离出棕色脂肪组织，进而将这些组织用冷的Dulbecco磷酸盐缓冲溶液洗涤，并用小剪刀切碎至体积大小为1mm3左右，然后用混合消化酶溶液在37℃摇床中，间隔摇动30
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50分钟；接下来，将BADSCs细胞组织通过200目细胞筛过滤，并将所得细胞悬液以1000rpm匀速离心5
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10分钟，备用；S2:BADSCs的培养：将步骤S1中所得的细胞沉淀重悬于α
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MEM基础培养基中，并使用血细胞计数器计数；将分离的细胞按照6万/ cm2接种到温敏性六孔板中，在37℃下孵育,并保持每隔一天更换一次培养基；S3: BADSCs膜片的制备：将步骤S2中的细胞培养10天后，将六孔板移至室温静置1小时，然后以单层细胞膜片的形式收集细胞，并进行H&E染色以观察BADSCs细胞膜片；BADSCs细胞膜片的平均厚度为200
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300μm；S4:SF的制备：将天然蚕丝在特制的碳酸钠溶液中煮沸50分钟，然后用沸腾的去离子水洗涤；并经过重复五次的洗涤后，丝胶被完全去除；然后，将脱胶的蚕丝纤维在60℃下溶解于溴化锂溶液中；随后在离心机中以 8000 rpm离心20分钟，去除杂质以及未能充分溶解的丝素纤维；并使用MWCO=3.5 kDa的透析袋，将上清液于去离子水中进行透析；最后，经过冷冻干燥处理，获得再生丝素蛋白,并在4℃下干燥储存直至使用；S5:PSN薄膜的制备：通过称重获取足量的SF，将干燥后的SF与PCL分别溶解在六氟异丙醇溶剂中，分别制备浓度为10wt% 的PCL溶液和相同浓度的SF溶液；进而将PCL溶液、SF溶液和浓度为10mg/ml的CNTs溶液充分混合来制备纺丝溶液；然后，使用以下参数通过静电纺丝获得PSN薄膜：电压为18kV，针尖
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收集器距离为15cm，溶液流速保持2ml/h；将获得的PSN薄膜浸入75%的酒精中，保持30分钟以使SF交联；最后，将所制备的PSN薄膜放置于离心管中，在室温下真空干燥7天，并于4℃的冰箱内保存备用；S6:扫描电子显微镜（SEM）测试：...

【专利技术属性】
技术研发人员：王丽，卫新博，肖圣钊，
申请(专利权)人：王丽，
类型：发明
国别省市：