一种皮特不动杆菌、其微生物菌剂及应用制造技术

本发明专利技术涉及工业微生物技术领域，具体公开一种皮特不动杆菌、其微生物菌剂及应用。所述皮特不动杆菌(Acinetobacter pittii)JW535，其保藏编号为CGMCC No.25479。本发明专利技术所提供的可氧化甲烷的细菌属于皮特不动杆菌，突破了以往甲烷氧化菌主要集中在甲基杆菌属的范畴，皮特不动杆菌JW535生长速率快，具有宽泛的pH耐受性，能够在环境pH改变条件下高效进行甲烷氧化过程，且对低浓度甲烷气体也能够进行高效氧化，同时，该菌株具有较高的耐盐性，对环境的适应性强，可有效降低由甲烷排放所引起的温室效应，还能应用于煤矿瓦斯消除，起到煤矿减灾和大气环境保护的双重作用，实用价值极高。实用价值极高。实用价值极高。

【技术实现步骤摘要】
一种皮特不动杆菌、其微生物菌剂及应用


[0001]本专利技术涉及工业微生物
，尤其涉及一种皮特不动杆菌、其微生物菌剂及应用。

技术介绍

[0002]甲烷(CH4)作为第二重要的温室气体被列入国际温室气体(GHG)清单，其温室效应仅次于二氧化碳，甲烷的全球变暖潜力是二氧化碳的20
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25倍。据统计，目前甲烷的年排放量占所有人为源温室气体排放量的16％，因此，采取积极有效的措施减少甲烷排放，对于温室气体减排具有非常深远的意义。垃圾填埋场、禽畜养殖粪尿存储设施排放的甲烷浓度低，一般低于5％(v/v)，不具备能源化利用价值，很难通过燃烧回收能量或采用化学氧化的方法将其去除。而生物法具有设备简单、处理费用低、生态环境友好等特点，非常适用于处理此类废气。
[0003]生物法净化甲烷主要是利用甲烷氧化菌实现甲烷的转化，因此，甲烷氧化菌是生物法净化甲烷的关键所在。甲烷氧化菌能够以甲烷作为唯一碳源和能源进行生长，此外，甲烷氧化菌能够以甲烷作为底物生产单细胞蛋白、甲烷氧化菌素、聚羟基脂肪酸等高附加值产品，不仅能够减少甲烷等温室气体排放，还能够生产有价值的代谢产物。目前，常见的甲烷氧化菌多为甲基杆菌属的相关细菌，没有其他菌属能够氧化甲烷的相关报道。此外，含甲烷废气中含有硫化氢、氨等组分，微生物转化上述组分会引起pH的改变，而pH的改变会严重影响甲烷氧化效率。因此，目前非常缺乏能够耐受酸碱环境且能够高效转化低浓度甲烷的甲烷氧化菌株。

技术实现思路

[0004]针对现有甲烷氧化菌不能耐受酸碱环境，以及甲烷氧化效率较低的问题，本专利技术提供一种皮特不动杆菌、其微生物菌剂及应用。
[0005]为解决上述技术问题，本专利技术提供的技术方案是：
[0006]一种皮特不动杆菌(Acinetobacter pittii)JW535，其保藏编号为CGMCC No.25479。
[0007]皮特不动杆菌JW535是从保定垃圾填埋场中已填埋15年的矿化垃圾中筛选出来的，分类命名为皮特不动杆菌(Acinetobacter pittii)，已于2022年08月03日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，简称CGMCC，菌种保藏号为CGMCC No.25479，保藏地址为：北京市朝阳区北辰西路1号院3号中国科学院微生物研究所。
[0008]本专利技术提供的皮特不动杆菌JW535的生物学特征为：在平板培养基上形态特征为白色不透明，菌落较小且微微凸起，边缘整齐，表面光滑，直径约为0.5～1.2mm，在液体培养基上呈白色混浊状态。
[0009]所述皮特不动杆菌JW535为革兰氏阴性菌，产H2S试验、脲酶、吲哚试验为阴性；甲基红试验、接触酶试验、柠檬酸盐利用试验、淀粉水解试验和明胶液化试验均为阳性。
[0010]本专利技术所提供的可氧化甲烷的细菌属于皮特不动杆菌，突破了以往甲烷氧化菌主要集中在甲基杆菌属的范畴，本专利技术分离筛选的皮特不动杆菌JW535生长速率快，具有宽泛的pH耐受性，能够在环境pH改变条件下高效进行甲烷氧化过程，且对低浓度甲烷气体也能够进行高效氧化，同时，该菌株具有较高的耐盐性，对环境的适应性强，可有效降低由甲烷排放所引起的温室效应，还能应用于煤矿瓦斯消除，起到煤矿减灾和大气环境保护的双重作用，实用价值极高。
[0011]本专利技术还提供了上述皮特不动杆菌JW535在甲烷氧化中的应用。
[0012]本专利技术还提供了上述皮特不动杆菌JW535在生产单细胞蛋白、甲烷氧化菌素或聚羟基脂肪酸中的应用。
[0013]本专利技术还提供了一种液体微生物菌剂，包含上述皮特不动杆菌JW535。
[0014]本专利技术提供的皮特不动杆菌JW535能够为温室气体甲烷作为碳源进行生长，且具有较高的pH耐受性和耐盐性，能够有效减少甲烷产生，对减少温室效应具有较好的效果，将其制成微生物菌剂方便运输和使用。
[0015]优选的，所述液体微生物菌剂的OD
600
为0.3～0.4。
[0016]本专利技术还提供了上述液体微生物菌剂的制备方法，包括如下步骤：
[0017]将所述皮特不动杆菌JW535接种至NMS液体培养基中，于25℃～40℃、110r/min～130r/min培养7～14d，得所述微生物菌剂。
[0018]优选的，所述NMS液体培养基包括溶液A和溶液B，其中，溶液A包括：KNO
3 1.000g，Na2HPO4·
12H2O 0.717g，KH2PO
4 0.272g，CaCl2·
6H2O 0.200g，乙二胺四乙酸铁铵5.000mg，MgSO4·
7H2O 1.000g，(NH4)2SO
4 0.033g和水1000mL。
[0019]需要说明的是，溶液A需要现用现配。
[0020]溶液B包括：ZnSO4·
7H2O 0.010g，FeSO4·
7H2O 0.200g，Na2MoO4·
2H2O 3.000mg，H3BO
3 0.030g，CoCl2·
6H2O 0.020g，CuSO4·
5H2O 0.030g，乙二胺四乙酸二钠0.500g，MnCl2·
4H2O 3.000mg，NiCl2·
6H2O 2.000mg和水1000mL。
[0021]优选的，溶液B的pH为6.8。
[0022]优选的，所述溶液A和溶液B的体积比为1:0.008～0.012。
[0023]优选的，所述NMS液体培养基的pH为6.8～7.0。
[0024]示例性的，所述NMS液体培养基于121℃灭菌30分钟后放入超净工作台备用。
[0025]示例性的，所述皮特不动杆菌JW535的接种体积占NMS液体培养基体积的10％。
[0026]优选的，培养的温度为25～40℃，NMS液体培养基的pH为6.8～7.0，Cu
2+
的浓度为18～22μmol/L。
[0027]本专利技术提供的皮特不动杆菌JW535具有较好的适应环境的能力，在环境pH改变以及较高盐度的环境中，依然能够高效氧化低浓度的甲烷气体，从而可有效减少甲烷气体的排放，减缓温室效应，在垃圾填埋场、禽畜养殖场等排放低浓度甲烷气体的场所具有较高的应用价值，同时，还能用于煤矿瓦斯消除，具有广阔的应用前景。
附图说明
[0028]图1为本专利技术皮特不动杆菌JW535在NMS固体培养基上的菌落形态；
[0029]图2为实施例1中基于ITS基因序列相似性构建的皮特不动杆菌JW535的系统发育
树。
具体实施方式
[0030]为了使本专利技术的目的、技术方案及优点更加清楚明白，以下结合实施例，对本专利技术进行进一步详细说明。应当理解，此处所描述的具体实施例仅仅用以解释本专利技术，并不用于限定本专利技术。
[0031]实施例所用培养基：
[0032]NMS液体培养基包括溶液A和溶液B，其中，溶液A包括：本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种皮特不动杆菌(Acinetobacter pittii)JW535，其特征在于，其保藏编号为CGMCC No.25479。2.权利要求1所述的皮特不动杆菌JW535在甲烷氧化中的应用。3.权利要求1所述的皮特不动杆菌JW535在生产单细胞蛋白、甲烷氧化菌素或聚羟基脂肪酸中的应用。4.一种液体微生物菌剂，其特征在于，包含权利要求1所述的皮特不动杆菌JW535。5.如权利要求4所述的液体微生物菌剂，其特征在于，所述液体微生物菌剂的OD
600
为0.3～0.4。6.如权利要求4或5所述的微生物菌剂，其特征在于，其制备方法包括如下步骤：将所述皮特不动杆菌JW535接种至NMS液体培养基中，于25℃～40℃、110r/min～130r/min培养7～14d，得所述微生物菌剂。7.如权利要求6所述的液体微生物菌剂，其特征在于，所述NMS液体培养基包括溶液A和溶液B，其中，溶液A包括：KNO
3 1.000g，Na2HPO4·
12H2O 0.717g，KH2PO
4 0.272g，CaCl2·
6H2O 0.200g，乙二胺四乙酸铁铵5.000mg，MgSO4·
7H2O 1.000g，(NH4)2SO...

【专利技术属性】
技术研发人员：刘春敬，范玉婧，高志岭，代宇菲，耿仕呈，刘臻岳，
申请(专利权)人：河北农业大学，
类型：发明
国别省市：