桃热激蛋白PpHSP20-32及其用途制造技术

本发明专利技术公开了一种桃热激蛋白PpHSP20

【技术实现步骤摘要】
桃热激蛋白PpHSP20
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32及其用途


[0001]本专利技术属于生物
，具体涉及桃热激蛋白PpHSP20
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32及其用 途。

技术介绍

[0002]随着全球气候的变化，温度是影响植物生长和地理分布的最重要因 素。植物由于其固着性，经受着昼夜交替、季节变化和天气变化等因素 引起的较大温度波动，致使植物演化出较强的温度适应能力。高温或低 温胁迫作为重要非生物胁迫因素之一，严重影响植物的生长。许多关于 植物对温度胁迫的响应机制被揭示，然而，植物对环境中非胁迫温度变化的感知和传导还未知。
[0003]大量的研究表明，热激蛋白(heat shock protein，HSP)在温度反应 中起重要作用，包括生长发育以及应激反应等。根据热激蛋白分子量大 小将其分为5大类：HSP100、HSP90、HSP70、HSP60和HSP20，其中 HSP20在植物中最为常见。HSP20也被称为小热激蛋白(Small heat shockprotein，sHSP)，分子量在15
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42kDa。
[0004]通过高温预处理，植物可以获得一定的耐热性。作为一类重要的分 子伴侣，HSP20的积累在这一过程中发挥着关键作用。HSP20还参与盐 胁迫、干旱胁迫等生物学过程。大部分HSP20s基因受热诱导，一些基 因的表达因氯化钠胁迫或干旱胁迫而增强。目前关于HSP20的研究主要 集中在其耐热性。在辣椒中，过表达CaHSP16.4能提高活性氧清除系统的稳定性进而增强对高温和干旱胁迫的耐受性。此外，许多HSP20s与 植物发育相关，如种子成熟与萌发、花粉发育和下胚轴伸长等。
[0005]目前关于不同植物的HSP20功能研究主要集中在其耐热性，而关于 其和植物株高以及非胁迫温度下表达有关的研究还鲜有报道，目前仅有 研究表明，AtHSP22基因在高温条件下(29℃)促进下胚轴伸长，但是 其是否引起植物植株高度变化的功能并没有报道。

技术实现思路

[0006]本专利技术的目的之一在于提供桃(Prunus persica L.)热激蛋白 PpHSP20
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32及其所编码的蛋白。
[0007]本专利技术的目的之二在于提供桃热激蛋白PpHSP20
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32及其所编码的 蛋白、重组载体在植物生长发育中的应用。
[0008]为实现上述目的，本专利技术采取如下技术方案：
[0009]本专利技术提供桃热激蛋白PpHSP20
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32，其序列如SEQ ID NO.1所示。
[0010]本专利技术还提供桃热激蛋白PpHSP20
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32编码的蛋白，其氨基酸序列如 SEQ ID NO.2所示。
[0011]本专利技术还提供包含所述桃热激蛋白PpHSP20
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32的重组载体。优选 地，所述重组载体为农杆菌表达载体。
[0012]利用所述基因或蛋白来获得转基因植物，所述植物包括但不限于拟 南芥。
[0013]具体地，所述转基因拟南芥的获取步骤包括：
[0014]A：构建含有所述桃热激蛋白PpHSP20
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32的重组载体；
[0015]B：将所构建的重组载体转化到拟南芥组织或细胞中；
[0016]C：培育筛选得到转基因拟南芥植株。
[0017]其中，序列中的SEQ ID NO.1共462bp，编码蛋白的氨基酸序列如 序列表中SEQ ID NO.2所示，共153个氨基酸。
[0018]本专利技术中术语“重组表达载体”指本领域熟知的细菌质粒、噬菌体、 酵母质粒、植物细胞病毒、哺乳动物细胞病毒或其他载体。总之，只要 能在宿主体内复制和稳定，任何质粒和载体都可以用。表达载体的一个 重要特征是通常含有复制起点、启动子、标记基因和翻译控制元件。
[0019]包含上述的适当DNA序列以及适当启动子或者控制序列的载体，可 以用于转化适当的宿主细胞，以使其能够表达蛋白质。其中，所述宿主 细胞可以是原核细胞，如细菌细胞；或是低等真核细胞，如酵母细胞； 或是高等真核细胞，如植物细胞。代表性例子有：大肠杆菌，链霉菌属、农杆菌；真菌细胞如酵母；植物细胞等。
[0020]本领域一般技术人员都清楚如何选择适当的载体、启动子、增强子 和宿主细胞。
[0021]用重组DNA转化宿主细胞可用本领域技术人员熟知的常规技术进 行。转化植物可使用农杆菌转化或基因枪转化等方法，例如喷洒法、叶 盘法、水稻幼胚转化法等。对于转化的植物细胞、组织或器官可以用常 规方法再生成植株。
[0022]本专利技术还提供桃热激蛋白PpHSP20
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32、桃热激蛋白PpHSP20
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32编 码的蛋白及桃热激蛋白PpHSP20
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32的重组载体在植物生长发育中的用 途，主要是在提高植物株高和/或莲座叶宽度、长度和/或耐热性方面的用途。
[0023]作为本专利技术的一种实施方式，将多核苷酸通过常规的方法克隆到适 当的载体中，将所述的带有外源基因的重组载体导入到植物细胞中，使 所述的植物细胞表达所述的桃热激蛋白PpHSP20
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32。可通过将所述植物 细胞再生成植物，获得过量表达所述多肽的植物。
[0024]具体地，一种培育转基因植物的方法，将所述桃热激蛋白 PpHSP20
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32基因导入目的植物，得到转基因植物，所述转基因植物的株 高、莲座叶宽度或长度和/或耐热性高于目的植物。
[0025]“促进目的植物中PpHSP20
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32基因的表达”的实现方式可为如下(1) 或(2)或(3)：
[0026](1)将PpHSP20
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32基因导入目的植物；
[0027](2)引入强启动子和/或增强子；
[0028](3)本领域内的其它常见方法。
[0029]本专利技术中，对于适用于本专利技术的植物没有特别的限制，只要其适合进行基因的转化操作，如各种农作物、花卉植物或林业植物等。所述的植物比如可以是(不限于)：双子叶植物、单子叶植物或裸子植物。更具体地，所述的植物包括(但不限于)：小麦、大麦、黑麦、水稻、玉米、高粱、甜菜、苹果、梨、李、桃、杏、樱桃、草莓、木莓、黑莓、豆、扁豆、豌豆、大豆、油菜、芥、罂粟、齐墩果、向日葵、椰子、蓖麻油植物、可可豆、花生、葫芦、黄瓜、西瓜、棉花、亚麻、黄麻、柑桔、柠檬、葡萄柚、菠菜、莴苣、芦笋、洋白菜、大白菜、小白菜、胡萝卜、洋葱、土豆、西红柿、青椒、鳄梨、桂皮、樟脑、烟草、坚果、咖啡、茄子、甘蔗、茶叶、胡椒、葡萄树、蚝麻草、香蕉、天然橡胶树和观赏植物等。
[0030]作为一种优选方式，所述的“植物”包括但不限于：桃、茄科、十 字花科、蔷薇科、葡萄科的植物。比如，所述的“植物”包括但不限于： 茄科的烟草和番茄；十字花科的拟南芥、蔷薇科的苹果、草莓；葡萄科 的葡萄等。
[0031]本专利技术中所说的“植本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种桃热激蛋白PpHSP20
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32，其特征在于，所述桃热激蛋白PpHSP20
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32的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。2.权利要求1所述的桃热激蛋白PpHSP20
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32编码的蛋白，其特征在于，其氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。3.权利要求1所述的桃热激蛋白PpHSP20
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【专利技术属性】
技术研发人员：连晓东，谭彬，冯贝贝，李天豪，冯建灿，郑先波，王小贝，张海朋，程钧，王伟，张郎郎，叶霞，李继东，
申请(专利权)人：河南农业大学，
类型：发明
国别省市：