一种植物-菌剂-生物炭联合修复高钼污染土壤的方法技术

一种植物

【技术实现步骤摘要】
一种植物
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菌剂
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生物炭联合修复高钼污染土壤的方法


[0001]本专利技术属于土壤修复
，具体涉及一种植物
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菌剂
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生物炭联合修复高钼污染土壤的方法。

技术介绍

[0002]钼作为一种稀有的重金属，熔点高的特性使其成为各行业的重要原材料，其大规模开采和使用过程会导致钼污染问题，进入土壤中的钼会沿着食物链不断传递和积累，当牧草含量高于2mg/kg时会对动物造成威胁，因此土壤钼污染的治理逐渐引起了研究人员的广泛关注。但是由于钼对人类的危害远小于其对反刍动物的危害，且其较其他重金属污染发生的频率低，关于钼污染土壤治理方法的报道极其有限。另外目前针对钼的研究内容主要集中在其作为微量元素对农作物产量的影响，将钼作为污染物的研究较少，且大部分着眼于微生物对其产生的还原作用上，针对钼去除的研究更是历历可数，因此适合寒冷地区钼污染土壤修复方案的提出迫在眉睫。

技术实现思路

[0003]本专利技术的目的是要解决现有钼污染土壤治理方法的报道极其有限，缺少一种适合寒冷地区重金属钼的生物修复方法，而提供一种植物
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菌剂
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生物炭联合修复高钼污染土壤的方法。
[0004]一种植物
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菌剂
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生物炭联合修复高钼污染土壤的方法，是按以下步骤完成的：
[0005]将生物炭均匀分散到高钼污染土壤中，然后在高钼污染土壤中撒入黑麦草种子，上部覆土，定期浇水使土壤保持湿润，再将液体菌剂浇入黑麦草根部，室温或低温培养，即完成修复高钼污染土壤；
[0006]所述的液体菌剂中菌株为解鸟氨酸拉乌尔菌(Raoultella ornithinolytica)A1，保藏在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏地址是北京市朝阳区北辰西路1号院3号，保藏日期为2022年05月26日，保藏号为CGMCC No.24973。
[0007]解鸟氨酸拉乌尔菌株的形态特征：将菌种划线接种于牛肉膏蛋白胨培养基上，30℃培养24h，菌落呈规则的圆形，直径约0.5mm，白色，表面光滑、凸起、湿润，不透明，质地粘稠。
[0008]本专利技术包含以下有益效果：
[0009]一、本专利技术显著提高了植物的生物量，有效降低土壤钼的含量，同时有利于土壤中钼向稳定态形式转化，修复效果良好；
[0010]二、在低温(10℃)条件下，虽然植物的生长收到抑制，土壤钼的总去除率降低，但土壤中的钼更容易向稳定态转化；
[0011]三、采用本专利技术的方法，低温(10℃)条件下，较容易利用态钼的含量降低32.2％。
[0012]本专利技术可获得一种植物
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菌剂
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生物炭联合修复高钼污染土壤的方法。
[0013]本专利技术还提供了上述解鸟氨酸拉乌尔菌的筛选鉴定方法，包括以下步骤：将采集
土壤依次富集培养、逐级筛选，即可获得；
[0014]所述的土壤采集自哈尔滨一垃圾回收站的表层土。
附图说明
[0015]图1为使用实施例的修复后土壤中的平均钼含量统计图；
[0016]图2为使用实施例的修复后土壤中各形态钼所占比例的统计图；
[0017]图3为使用实施例的修复后植物根际土壤pH统计图；
[0018]图4为使用实施例的修复后黑麦草地上部分长度的统计图。
具体实施方式
[0019]以下实施例进一步说明本专利技术的内容，但不应理解为对本专利技术的限制。在不背离本专利技术实质的情况下，对本专利技术方法、步骤或条件所作的修改和替换，均属于本专利技术的范围。
[0020]以下实施例进一步说明本专利技术的内容，但不应理解为对本专利技术的限制。在不背离本专利技术实质的情况下，对本专利技术方法、步骤或条件所作的修改和替换，均属于本专利技术的范围。
[0021]具体实施方式一：本实施方法是一种解鸟氨酸拉乌尔菌株的筛选、鉴定包括以下步骤：
[0022](一)富集和筛选：从哈尔滨某垃圾站采集表层土，得到土样，取5g土样装入45mL牛肉膏蛋白胨培养基中，30℃、200r/min的摇床中培养24h进行菌种富集，取2mL富集培养液于含MoO
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浓度为100mg/L的牛肉膏蛋白胨培养基，富集瓶混浊后，取1mL富集培养液于含MoO
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浓度为200mg/L的牛肉膏蛋白胨培养基，逐级提高MoO
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浓度到3000mg/L，取富集培养液于无菌生理盐水中，进行10
‑1～10
‑99个梯度的稀释，分别取20μL稀释液涂布于含MoO
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的固体平板上，倒置于30℃的恒温培养3天，选择平板中的白色单菌落在含MoO
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的固体牛肉膏蛋白胨平板上进行平板划线，如此重复3次，即获得纯菌，对其进行编号并甘油保藏。
[0023]所述牛肉膏蛋白胨培养基配方为：钼酸钠、牛肉膏3.0g、蛋白10.0g、NaCl5.0 g、水1000mL、pH为7.4～7.6，在120℃下灭菌30min；
[0024]所述含MoO
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的固体牛肉膏蛋白胨配方为：钼酸钠3000mg、琼脂15.0g、牛肉膏3.0g、蛋白10.0g、NaCl5.0 g、水1000mL、pH为7.4～7.6，在120℃下灭菌30min。
[0025](二)鉴定：将筛选获得的白色菌株寄送上海美吉生物医药科技有限公司进行测序，核苷酸序列如下：
[0026]AGGCTCAGATTGAACGCTGGCGGCAGGCCTAACACATGCAAGTCGAGCGGTAGCACAGAGAGCTTGCTCTCGGGTGACGAGCGGCGGACGGGTGAGTAATGTCTGGGAAACTGCCTGATGGAGGGGGATAACTACTGGAAACGGTAGCTAATACCGCATAACGTCGCAAGACCAAAGTGGGGGACCTTCGGGCCTCATGCCATCAGATGTGCCCAGATGGGATTAGCTAGTAGGTGGGGTAATGGCTCACCTAGGCGACGATCCCTAGCTGGTCTGAGAGGATGACCAGCCACACTGGAACTGAGACACGGTCCAGACTCCTACGGGAGGCAGCAGTGGGGAATATTGCACAATGGGCGCAAGCCTGATGCAGCCATGCCGCGTGTATGAAGAAGGCCTTCGGGTTGTAAAGTACTTTCAGCGAGGAGGAAGGCATTAAGGTTAATAACCTTAGTGATTGACGTTACTCGCAGAAGAAGCACCGGCTAACTCCGTGCCAGCAGCCGCGGTAATACGGAGGGTGCAAGCGTTAATCGGAATTACTGGGCGTAAAGCGCACGCAGGCGGTCTGTTAAGTCAGATGTGAAA本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种植物
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菌剂
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生物炭联合修复高钼污染土壤的方法，其特征在于该方法是按以下步骤完成的：将生物炭均匀分散到高钼污染土壤中，然后在高钼污染土壤中撒入黑麦草种子，上部覆土，定期浇水使土壤保持湿润，再将液体菌剂浇入黑麦草根部，室温或低温培养，即完成修复高钼污染土壤；所述的液体菌剂中菌株为解鸟氨酸拉乌尔菌(Raoultella ornithinolytica)A1，保藏在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏地址是北京市朝阳区北辰西路1号院3号，保藏日期为2022年05月26日，保藏号为CGMCC No.24973。2.根据权利要求1所述的一种植物
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菌剂
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生物炭联合修复高钼污染土壤的方法，其特征在于所述的生物炭的粒径为200目～250目。3.根据权利要求1所述的一种植物
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菌剂
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生物炭联合修复高钼污染土壤的方法，其特征在于所述的液体菌剂的制备方法为：一、向培养基中接种甘油保藏的解鸟氨酸拉乌尔菌(Raoultella ornithinolytica)A1，解鸟氨酸拉乌尔菌(Raoultella ornithinolytica)A1的接种量为1％；步骤一中所述的培养基配方为：牛肉膏3.0g、蛋白胨10.0g、NaCl 5.0g、水1000mL、p...

【专利技术属性】
技术研发人员：李昂，李春燕，邢洁，李东，李婉婷，
申请(专利权)人：黑龙江省环境科学研究院，
类型：发明
国别省市：