一种基于超声波技术合成多肽锌/钙螯合物的方法技术

本发明专利技术涉及一种基于超声波技术合成多肽锌/钙螯合物的方法，包括以下步骤：(1)取碱性蛋白酶对天然蛋白进行酶解，酶解结束后，离心分离沉淀，取上清液备用；(2)将步骤(1)所得上清液置于超声波仪中超声震荡，再在超声震荡中加入锌/钙溶液，保温处理，得到混合溶液；(3)往步骤(2)所得混合溶液中加入乙醇，获得沉淀，干燥，即得到目标产物。与现有技术相比，本发明专利技术制备的肽锌/钙螯合物分子量控制在1000以下，金属锌/钙被包裹在肽分子内部，不受胃肠道中的植酸等影响，水解肽对人体无毒无害，不会产生氨基酸失衡，体外实验表明，有较高的锌/钙吸收率。率。

【技术实现步骤摘要】
一种基于超声波技术合成多肽锌/钙螯合物的方法


[0001]本专利技术属于生物医药
，涉及一种基于超声波技术合成多肽锌/钙螯合物的方法。

技术介绍

[0002]多肽锌/钙络合物有望成为新一代补锌剂，由于采用天然蛋白水解物作为肽源，这使得多肽锌/钙络合物作为补锌剂时对人体无毒无害，并且不受胃肠道中植酸等的影响，提高了锌的吸收率，这使其有成为新一代补锌剂的潜力。
[0003]钙、锌是人体必需的矿物质营养素。钙在人体的骨骼生长，血液凝固，细胞人代谢，神经传导和肌肉收缩中起着非常重要的作用，钙摄入或吸收不足会导致如骨质酥松症、高血压，结肠癌、肥胖症和肾结石等许多疾病，婴儿钙摄入不足容易引起生长发育迟缓、反复呼吸道感染、佝偻病等；妊娠期妇女钙元素缺乏容易引起妊娠高血压综合征以及影响胎儿生长发育等；老年人缺钙则容易引起骨质疏松症。缺锌将导致众多的慢性疾病，包括生长迟缓，免疫缺陷等。目前我国市场上钙制剂分为无机钙、有机酸钙、氨基酸钙几种类型，补锌剂主要为无机锌盐和简单有机锌，它们共同特点是吸收率不高，尤其受膳食中植物性食物中含有的植酸、草酸的严重影响，导致吸收效率低下，甚至产生结石隐患。肽锌/钙络合物类具有吸收效果好的特点，日益受到人们的重视。
[0004]通过查问相关文献，我们发现有许多报道采用大豆蛋白酶催化水解制备蛋白肽钙、肽锌螯合物。文献1(王俊强(江南大学食品学院),孔祥珍,华欲飞.大豆肽钙螯合物的制备、稳定性及表征[J].中国油脂,2019,44(10):46
‑
50)和2(东北农业大学.一种具有增强骨密度低分子量大豆肽
‑
钙螯合物的制备方法:CN201410320336.6[P].2014
‑
11
‑
26)采用通过醇洗、酸沉、水解工艺制备大豆肽，并与钙离子进行螯合反应，肽的相对分子量主要集中在小于lkDa；文献3(财团法人食品工业发展研究所.大豆胜肽
‑
钙螯合物的制备方法:CN201110387656.X[P].2013
‑
04
‑
17)采用不同的酶水解分解大豆；文献4(广州金酮医疗科技有限公司.一种蛋白肽及其钙螯合物与制备方法:CN201610641164.1/P1.2016
‑
12
‑
21)采用碱性蛋白酶与风味蛋白酶组成的复合酶,大豆蛋白粉配制成质量分数为4％的溶液并采用超声等不同条件的预处理；文献5(漯河永瑞生物科技有限公司.一种花生肽
‑
钙、锌螯合物的制备方法:CN202210146884.6[P].2022
‑
05
‑
13)和6(江南大学.稳定型钙离子螯合肽的制备方法与应用:CN202010931192.3[P]2020
‑
12
‑
18.)采用其他植物蛋白源花生蛋白、黑豆蛋白为原料酶催化水解，水解液制备时提到超声处理；文献7(郑英敏(广州大学化学化工学院),袁杨,苏东晓,等.大豆多肽
‑
锌螯合物的制备工艺优化及其结构表征[J].食品工业科技,2020.41(14):160
‑
165.)和8(叶美俊.多肽
‑
锌配合物的制备及其生物活性探究[D].2021.学位授予单位:广州大学)以及9(安徽珠峰生物科技有限公司.一种大豆源锌螯合肽、肽锌螯合物的制备方法及其用途:CN201710321375.1[P].2017
‑
09
‑
15.)大豆源蛋白酶水解，酶解成分子量小的活性肽、锌盐反应生成肽锌螯合物，采用了如木瓜蛋白酶、胃蛋白酶、胰蛋白酶、风味蛋白酶及其复合酶酶解。上述报道显示制备研究主要集中大豆催化水解
中酶的选择及优化条件，少数文献提到采用水解液的超声处理，对于在超声波辅助下的蛋白肽与金属锌或者钙络合反应研究未见报道。

技术实现思路

[0005]本专利技术的目的就是为了提供一种基于超声微波技术合成多肽锌/钙螯合物的方法。多肽锌/钙螯合物指的是多肽锌螯合物或多肽钙螯合物。
[0006]本专利技术的目的可以通过以下技术方案来实现：
[0007]一种基于超声微波技术合成多肽锌/钙螯合物的方法，包括以下步骤：
[0008](1)取碱性蛋白酶对天然蛋白进行酶解，酶解结束后，离心分离沉淀，取上清液备用；
[0009](2)将步骤(1)所得上清液置于超声波清洗仪中，先超声震荡，再在超声震荡中加入锌/钙溶液，保温处理，得到混合溶液；
[0010](3)往步骤(2)所得混合溶液中加入乙醇，获得沉淀，干燥，即得到目标产物。
[0011]进一步的，步骤(1)中，所述碱性蛋白酶为酶活力20万u/g的碱性蛋白酶。
[0012]进一步的，步骤(1)中，所述天然蛋白为大豆蛋白、酪蛋白或玉米蛋白。
[0013]进一步的，步骤(1)中，酶解过程中pH值被调节至8。
[0014]进一步的，步骤(1)中，酶解的温度为40
‑
60℃，时间为2
‑
5h。
[0015]进一步的，步骤(1)中，碱性蛋白酶与天然蛋白的添加量满足：酶底比为1:10。
[0016]进一步的，酶解前，还按照天然蛋白：水的质量比为1：18
‑
22往天然蛋白中加入水。
[0017]进一步的，步骤(1)中的上清液放入500Da
‑
800Da透析袋中，再放入透析液中，进行透析24
‑
48h，每隔12h更换一次透析液，收集好透析液，进行下一步反应。
[0018]进一步的，步骤(2)中，超声震荡的时间为20min。
[0019]进一步的，步骤(2)中，所述锌/钙溶液为硫酸锌/钙溶液、氯化锌/钙溶液、葡萄糖酸锌/钙溶液或氨基酸锌/钙溶液。此处的“锌/钙溶液”指的是锌溶液或钙溶液。
[0020]进一步的，步骤(2)中，锌/钙元素与所加入上清液中的肽的质量比为1:4～1:10。此处的锌/钙元素指的是锌元素或钙元素。此处的所用的肽的数均分子量为400到1000之间。
[0021]本专利技术采用超声波辅助处理，有效展开肽的卷曲构象，使之与金属络合，降温后肽分子构象恢复，从而把金属包裹在肽分子内部，避免消化液对肽锌/钙的分解作用，提高有效吸收率。本专利技术所得螯合物中，金属锌/钙被包裹在肽分子内部，可有效抵御消化液分解。
[0022]进一步的，步骤(2)中，保温处理的温度为40
‑
50℃，时间为1.5
‑
2.5h。
[0023]本专利技术创新之一是使用超声波技术将肽的构象打开，变为开链结构，有利于锌/钙离子与肽链上的螯合位点结合，在螯合反应结束后，恢复构象，将锌或者钙离子包裹在肽链中间，避免了金属离子在肠道吸收时的竞争拮抗，减少了许多生化过程，提高了人体对锌/钙的吸收率。本专利技术创新之二是锌/钙与肽链是以螯合的形式进行络本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种基于超声波技术合成多肽锌/钙螯合物的方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)取蛋白酶对天然蛋白进行酶解，酶解结束后，离心分离沉淀，取上清液备用；(2)将步骤(1)所得上清液置于超声波仪中超声震荡，再在超声震荡中加入锌/钙溶液，保温处理，得到混合溶液；(3)往步骤(2)所得混合溶液中加入乙醇，获得沉淀，干燥，即得到目标产物。2.根据权利要求1所述的一种基于超声波技术合成多肽锌/钙螯合物的方法，其特征在于，步骤(1)中，所述蛋白酶为酶活力20万u/g的碱性蛋白酶。3.根据权利要求1所述的一种基于超声波技术合成多肽锌/钙螯合物的方法，其特征在于，步骤(1)中，所述天然蛋白为大豆蛋白、酪蛋白或玉米蛋白。4.根据权利要求1所述的一种基于超声波技术合成多肽锌/钙螯合物的方法，其特征在于，步骤(1)中，酶解过程中pH值被调节至8。5.根据权利要求1所述的一种基于超声波技术合成多肽锌/钙螯合物的方法，其特征在于，步骤(1)中，酶解的温度为40
‑
60℃，时间为2
‑

【专利技术属性】
技术研发人员：吴孝兰，张文，柯德宏，凌芳，许胜，颜柯，罗强，
申请(专利权)人：华东理工大学，
类型：发明
国别省市：