一种结核杆菌抗酸染色液及其配制和染色方法技术

本发明专利技术提供一种结核杆菌抗酸染色液及其配制和染色方法，涉及疾病筛查技术领域。一种结核杆菌抗酸染色液，包括：碱性品红，石炭酸，亚甲基蓝，95％乙醇和浓盐酸。本发明专利技术的结核杆菌抗酸染色液，易于着色，且染色后的标本颜色鲜艳，便于观察，可以提高结核杆菌的检出率。其配制方法操作简单方便，能够减少非必要的工作量，减少实验室污染，提高工作效率。其染色方法能够提高标本染色后的着色效果，加深标本的颜色深度，更便于检验人员辨认出抗酸杆菌，提高工作效率，还可以降低标本染色成本，具有较好的经济效益。的经济效益。

【技术实现步骤摘要】
一种结核杆菌抗酸染色液及其配制和染色方法


[0001]本专利技术涉及疾病筛查
，具体而言，涉及一种结核杆菌抗酸染色液及其配制和染色方法。

技术介绍

[0002]结核(Tuberculosis，简称TB)是常见并可致命的一种传染病，由分枝杆菌又称结核杆菌导致。结核通常感染并破坏肺以及淋巴系统，但其它器官如脑、中枢神经系统、循环系统、泌尿系统、骨骼、关节、甚至皮肤亦可受感染。结核病死亡率较高，而早期快速、有效的病原学诊断对即时治疗结核病、减少病死率和后遗症极其重要。
[0003]目前，在当前国家结核病防治规划的框架下，基层结核病的控制是以发现和控制传染源为主，而痰涂片抗酸杆菌阳性的结核患者是社会上最主要的传染源，故痰涂片抗酸杆菌镜检结果对诊断传染性肺结核是一项重要指标。针对低收入且结核病疫情严重的发展中国家，痰涂片镜检非常符合成本效益原则的细菌学实验技术。如何探讨更适合基层实验室人员使用的痰涂片染色液配制方法，能使基层实验室人员掌握更加科学简单的染色液配制方法。

技术实现思路

[0004]本专利技术的目的在于提供一种结核杆菌抗酸染色液，易于着色，且染色后的标本颜色鲜艳，便于观察，可以提高结核杆菌的检出率。
[0005]本专利技术的另一目的在于提供一种结核杆菌抗酸染色液的配制方法，操作简单方便，能够减少非必要的工作量，减少实验室污染，提高工作效率。
[0006]本专利技术的另一目的还在于提供一种结核杆菌抗酸染色液的染色方法，提高标本染色后的着色效果，加深标本的颜色深度，更便于检验人员辨认出抗酸杆菌，提高工作效率，还可以降低标本染色成本，具有较好的经济效益。
[0007]本专利技术解决其技术问题是采用以下技术方案来实现的。
[0008]本专利技术提出一种结核杆菌抗酸染色液，包括：
[0009]工作液，以500mL为例，包括以下组分：2
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8g碱性品红，40
‑
60mL95％乙醇，20
‑
30mL液态石炭酸，余量为蒸馏水；
[0010]脱色液，以500mL为例，包括以下组分：20
‑
50mL质量分数为36
‑
38％浓盐酸和450
‑
480mL95％乙醇；
[0011]复染液，以500mL为例，包括以下组分：0.5
‑
1g亚甲基蓝，40
‑
60mL95％乙醇，余量为蒸馏水。
[0012]本专利技术提出一种结核杆菌抗酸染色液的配制方法，包括以下步骤：
[0013]向碱性品红中加入95％乙醇，震荡5
‑
15min，得到品红溶液，将石炭酸水浴加热液化，然后将液态石炭酸加入到品红溶液中，加入蒸馏水定容至500mL，混合，得到工作液；
[0014]将浓盐酸加入到95％乙醇中，混合，得到脱色液；
[0015]将亚甲基蓝加入到95％乙醇中，震荡5
‑
15min，再加入蒸馏水定容至500mL，得到复染液。
[0016]本专利技术提出一种结核杆菌抗酸染色液的染色方法，包括以下步骤：
[0017]S1、将标本涂片加热固定，滴加工作液至标本涂片表面，加热5
‑
10min，静置5
‑
15min，水洗；
[0018]S2、自S1水洗后的标本涂片外缘滴加脱色液，脱色，水洗；
[0019]S3、向S2水洗后的标本涂片滴加复染液，染色，水洗，干燥，镜检。
[0020]本专利技术实施例至少具有以下有益效果：
[0021]本专利技术中，复染液在上述配比下，终浓度可以达到0.16％，具有着色时间短的特点，且在复染后标本外观颜色鲜艳，显微镜下背景明亮，更便于检验人员辨认抗酸杆菌，从而提高抗酸杆菌的检出率。该染色液易于着色，且染色后的标本颜色鲜艳，便于观察，可以提高结核杆菌的检出率。
[0022]本专利技术中，相比较经典旧染色法(萋
‑
尼氏法)，可以减少染色液的配制步骤，避免配制过程中反复碾磨碱性复红染料，还可以防止混合过程中试剂外溢污染环境的情况，提高工作液的配制速度。该配制方法操作简单方便，能够减少非必要的工作量，减少实验室污染，提高工作效率。
[0023]本专利技术中，通过染色
‑
脱色
‑
复染步骤，可以提高标本染色后的着色效果，加深标本的颜色深度，更便于检验人员辨认出抗酸杆菌，提高工作效率，还可以降低标本染色成本，具有较好的经济效益。
具体实施方式
[0024]为使本专利技术实施例的目的、技术方案和优点更加清楚，下面将对本专利技术实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述。实施例中未注明具体条件者，按照常规条件或制造商建议的条件进行。所用试剂或仪器未注明生产厂商者，均为可以通过市售购买获得的常规产品。
[0025]需要说明的是，在不冲突的情况下，本专利技术中的实施例及实施例中的特征可以相互组合。下面将参考具体实施例来详细说明本专利技术。
[0026]一种结核杆菌抗酸染色液，包括：
[0027]工作液，以500mL为例，包括以下组分：2
‑
8g碱性品红，40
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60mL95％乙醇，20
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30mL液态石炭酸，余量为蒸馏水；
[0028]脱色液，以500mL为例，包括以下组分：20
‑
50mL质量分数为36
‑
38％浓盐酸和450
‑
480mL95％乙醇；
[0029]复染液，以500mL为例，包括以下组分：0.5
‑
1g亚甲基蓝，40
‑
60mL95％乙醇，余量为蒸馏水。
[0030]碱性品红，是一种有机化合物，化学式为C
19
H
18
ClN3，主要用作生物染色剂，溶于冷、热水中呈红紫色，极易溶于酒精中呈红色。
[0031]石炭酸，又称苯酚，是羟基(
‑
OH)与芳烃核(苯环或稠苯环)直接相连形成的有机化合物。
[0032]亚甲基蓝是一种芳香杂环化合物，亚甲蓝的水溶液在氧化性环境中蓝色。
[0033]复染液在上述配比下，终浓度可以达到0.16％，具有着色时间短的特点，且在复染后标本外观颜色鲜艳，显微镜下背景明亮，更便于检验人员辨认抗酸杆菌，从而提高抗酸杆菌的检出率。该染色液易于着色，且染色后的标本颜色鲜艳，便于观察，可以提高结核杆菌的检出率。
[0034]本专利技术的染色液与试剂盒(武汉贝索公司生产)相比较，试剂盒染色后痰膜外观颜色略淡，显微镜下背景灰暗，且试剂盒价格昂贵，每份痰标本成本5元左右。本专利技术的染色液染色后痰片易于观察，成本很低，每份痰标本1元左右，可以降低工作成本，提高经济效率。
[0035]一种结核杆菌抗酸染色液的配制方法，包括以下步骤：
[0036]向碱性品红中加入95％乙醇，震荡5
‑
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【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种结核杆菌抗酸染色液，其特征在于，包括：工作液，以500mL为例，包括以下组分：2
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8g碱性品红，40
‑
60mL95％乙醇，20
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30mL液态石炭酸，余量为蒸馏水；脱色液，以500mL为例，包括以下组分：20
‑
50mL质量分数为36
‑
38％浓盐酸和450
‑
480mL95％乙醇；复染液，以500mL为例，包括以下组分：0.5
‑
1g亚甲基蓝，40
‑
60mL95％乙醇，余量为蒸馏水。2.一种如权利要求1所述的结核杆菌抗酸染色液的配制方法，其特征在于，包括以下步骤：工作液：向碱性品红中加入95％乙醇，震荡5
‑
15min，得到品红溶液，将石炭酸水浴加热液化，然后将液态石炭酸加入到品红溶液中，加入蒸馏水定容至500mL，混合；脱色液：将浓盐酸加入到95％乙醇中，混合；复染液：将亚甲基蓝加入到95％乙醇中，震荡5<...

【专利技术属性】
技术研发人员：邓梅光，
申请(专利权)人：上饶市广丰区疾病预防控制中心，
类型：发明
国别省市：