一种集分泌与富集蛋白于一体的新型细胞工厂制造技术

本实用新型专利技术公开了一种集分泌与富集蛋白于一体的新型细胞工厂，包括分泌舱和富集舱，所述分泌舱和富集舱之间通过滤板连接，分泌舱顶板的两侧分别设有一个通口，通口呈对称分布，所述通口向下垂直延伸有通道，并在通道对应分泌舱内部开口端具有通孔，所述分泌舱通过通孔、通道和通口与外界连通；富集舱顶板一侧亦设有一个通口，该通口向下垂直延伸有通道，并在通道开口端具有通孔，富集舱通过通孔、通道和通口与外界连通。本申请富集舱设有蛋白吸附珠，分泌舱用来进行细胞扩增，细胞扩增过程中，分泌的目的蛋白随着液体交换逐渐流向富集舱，简化了操作步骤，节约人力成本和时间成本。节约人力成本和时间成本。节约人力成本和时间成本。

【技术实现步骤摘要】
一种集分泌与富集蛋白于一体的新型细胞工厂


[0001]本专利技术涉及培养容器领域，具体为一种集分泌与富集蛋白于一体的新型细胞工厂。

技术介绍

[0002]重组蛋白技术较为成熟，选择一段相应蛋白基因，连接一个合适载体，导入宿主细胞，筛选建立细胞系。然后规模化培养细胞，就可以源源不断的产生目的蛋白，用于科研或者作为生产资料。如若目的蛋白功能强大，需求量大，那么就需要进一步扩大细胞培养规模，来满足需求。配套的细胞培养容器也得到了进一步的革新发展，出现细胞工厂来满足大规模扩增细胞。
[0003]在实际应用中，由于细胞培养液成分较细胞内部成分简单，便于后续蛋白的分离，故设计载体时，常常在蛋白上加一段信号肽，使目的蛋白分泌到细胞培养液中。培养过程中，细胞分布不均导致少数细胞死亡，细胞膜破裂，细胞内容物释放到细胞培养液中，目的蛋白存在被酶类物质降解的风险。同时，释放出的粘性物质也会吸附目的蛋白，影响蛋白分离。故此，需要对细胞培养液进行预处理。
[0004]预处理包括离心，过滤步骤，大规模生产蛋白直接导致细胞培养液体积大，需要进行的预处理耗时长，人力消耗大。多次进行离心操作，蛋白损失量大。离心步骤伴随着温度变化，影响总蛋白质量。以及预处理整个过程处于有菌环境，培养基富含营养，利于菌的生长，细胞培养液污染风险大，也会造成蛋白质量下降。

技术实现思路

[0005]为了解决现有技术中存在的技术问题，而提出的一种集分泌与富集蛋白于一体的新型细胞工厂。
[0006]一种集分泌与富集蛋白于一体的新型细胞工厂，包括分泌舱和富集舱，所述分泌舱和富集舱之间通过滤板连接，分泌舱顶板的两侧分别设有一个通口，通口呈对称分布，所述通口向下垂直延伸有通道，并在通道对应分泌舱内部开口端具有通孔，所述分泌舱通过通孔、通道和通口与外界连通；富集舱顶板一侧亦设有一个通口，该通口向下垂直延伸有通道，并在通道开口端具有通孔，富集舱通过通孔、通道和通口与外界连通。
[0007]作为进一步改进方案，所述的滤板设为两部分，两部分之间可留有空间。
[0008]作为进一步改进方案，靠近分泌舱的滤板部分为由惰性助滤剂组成的助滤层，靠近富集舱侧的滤板部分为0.2μm口径滤膜。所述惰性助滤剂可采用：纤维素材质。
[0009]作为进一步改进方案，所述富集舱内部填充蛋白吸附珠。
[0010]作为进一步改进方案，所述蛋白吸附珠为Protein A凝胶柱、Ni
+
珠或磁珠。
[0011]作为进一步改进方案，所述富集舱和分泌舱为多层结构，从而使所述的新型细胞工厂为多层结构。
[0012]作为进一步改进方案，所述分泌舱、富集舱、通孔、通道和通口为一体式结构。
[0013]为实现上述目的，本专利技术提供如下技术方案：
[0014]一种集分泌与富集蛋白于一体的新型细胞工厂，包括分泌舱、富集舱以及滤板，所述分泌舱顶部设有两个位于两侧边缘的通口，所述富集舱顶部可设有一个通口，所述通口下端连接通道垂直伸入富集舱/分泌舱内部，所述富集舱内部设有蛋白吸附珠，所述分泌舱内部设有培养液及相应细胞系，所述富集舱与分泌舱分别位于滤板两侧，所述富集舱/分泌舱通过滤板进行液体交换。
[0015]进一步的，所述通口、通道、富集舱、分泌舱为一体式结构，分泌舱与富集舱通过通孔与通道连通，通道通过通口与外界连通。
[0016]进一步的，所述分泌舱可设为多层结构，相对应的，所述通道对应每层设有通孔，所述滤板与分泌舱对应分布，所述富集舱与分泌舱对应分布。
[0017]进一步的，所述蛋白吸附珠可选用Protein A凝胶柱、Ni
+
珠、磁珠等商业化填充料。
[0018]进一步的，所述滤板分为两部分，分泌舱侧为助滤部分，富集舱侧为0.2μm口径滤膜，两部分之间可留有空间。
[0019]与现有技术相比，本技术的有益之处是：
[0020]1、本申请中，富集舱和分泌舱分别位于滤板两侧，并通过滤板进行液体交换，富集舱设有蛋白吸附珠，分泌舱用来进行细胞扩增，细胞扩增过程中，分泌的目的蛋白随着液体交换逐渐流向富集舱，吸附至蛋白吸附珠上，完成蛋白富集，取出蛋白吸附珠，可直接进行下一步操作。简化了操作步骤，节约人力成本和时间成本。
[0021]2、本申请中，滤板与分泌舱相接的一侧覆盖惰性助滤剂，可防止粘性物质堵塞滤板，保证富集舱与分泌舱液体交换的畅通，延长容器使用寿命。
[0022]3、本申请，结构简单，使用方便，使用寿命长，降低耗材成本。同时，简化了步骤，具有蛋白收集率高，质量好的优点，值得使用。
附图说明
[0023]为了更清楚地说明本技术实施例或现有技术中的技术方案，下面将对实施例或现有技术描述中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图仅仅是本技术地一些实施例，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图示出的结构获得其他附图。
[0024]图1为本申请的一种集分泌与富集蛋白于一体的新型细胞工厂的整体外观图。
[0025]图2为本申请的一种集分泌与富集蛋白于一体的新型细胞工厂的内部示意图。
[0026]图中：1
‑
分泌舱、2
‑
富集舱、3
‑
通道、4
‑
通孔、5
‑
滤板、6
‑
通口。
具体实施方式
[0027]下面将结合本技术实施例中的附图，对本技术实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本技术的一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本技术中的实施例，本领域普通技术人员在没有作出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本技术保护的范围。
[0028]请参阅图1、2，本专利技术提供一种技术方案：
[0029]一种集分泌与富集蛋白于一体的新型细胞工厂，包括分泌舱1、富集舱2以及滤板5。分泌舱1顶板的两侧分别设有一个通口6，通口6呈对称分布，所述通口6向下垂直延伸有通道3，并在通道对应分泌舱内部开口端具有通孔4，即通口6向分泌舱1内部延申有通道3，通道3靠近分泌舱1内部开有通孔4，分泌舱1通过通孔4与通道3连通，通道3通过通口6与外界连通，来进行内容物更换。
[0030]富集舱2顶板也设有一个通口，通口向下垂直延伸有通道，并在通道开口端具有通孔，该通孔通过通道与通口6连通，通口6、通道3、通孔4以及富集舱2内部之间的排布和连通与分泌舱1设置相似。所述分泌舱、富集舱、通孔、通道和通口为一体式结构。
[0031]分泌舱1与富集舱2呈水平排布，两者以滤板5为间隔，并通过滤板5进行内容物的交换。滤板5呈垂直放置，滤板5设为两部分，靠近分泌舱1侧为惰性助滤部分，为由惰性助滤剂组成的助滤层，该惰性助滤剂可采用纤维素材质，靠近富集舱2侧的滤板为0.2μm口径滤膜，两部分滤板之间可留一定空间。
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【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种集分泌与富集蛋白于一体的新型细胞工厂，其特征在于：包括分泌舱和富集舱，所述分泌舱和富集舱之间通过滤板连接，分泌舱顶板的两侧分别设有一个通口，通口呈对称分布，所述通口向下垂直延伸有通道，并在通道对应分泌舱内部开口端具有通孔，所述分泌舱通过通孔、通道和通口与外界连通；富集舱顶板一侧亦设有一个通口，该通口向下垂直延伸有通道，并在通道开口端具有通孔，富集舱通过通孔、通道和通口与外界连通；所述富集舱内部填充蛋白吸附珠。2.根据权利要求1所述的新型细胞工厂，其特征在于：所述的滤板设为两部分，两部分之间可留有空间。3.根据权利要求...

【专利技术属性】
技术研发人员：张云天，范春雷，吴王亲，张咪，伍曼菲，
申请(专利权)人：浙江中医药大学，
类型：新型
国别省市：