一种柑橘属果实提取物及其制备方法与应用技术

本发明专利技术涉及医药技术领域，尤其涉及一种柑橘属果实提取物及其制备方法与应用。本发明专利技术提供了一种柑橘属果实提取物，所述提取物主要成分为多甲氧基黄酮。本发明专利技术的目的在于克服天然来源、低毒副作用和用于内分泌治疗的雌激素受体降解剂的缺乏问题，提供了一种柑橘属果实提取物作为雌激素受体降解剂治疗乳腺癌的方法。具体是提供了一种柑橘属果实提取物及其制备方法，以及提取物在治疗雌激素受体阳性乳腺癌上的用途，即通过泛素

【技术实现步骤摘要】
一种柑橘属果实提取物及其制备方法与应用


[0001]本专利技术涉及医药
，尤其涉及一种柑橘属果实提取物及其制备方法与应用。

技术介绍

[0002]癌症是威胁人类健康的重大杀手之一，其中乳腺癌患者发病率高居第一位。雌激素受体阳性乳腺癌是乳腺癌常见类型，病情受到雌激素影响，通常内分泌治疗是有效的治疗手段。由于无法完全抑制ER信号传导，导致难以有效抑制癌细胞增殖，加上耐药问题，临床用药受限，因此ER阳性乳腺癌亟需新的治疗小分子药物。
[0003]现有代表治疗药物为他莫昔芬和氟维司群。临床上他莫昔芬耐药问题逐渐显现出来。氟维司群虽具有比他莫昔芬更高的的疗效及更低的副作用，可有效延长患者的生存期，但由于价格昂贵，加上肌肉注射、溶解性差和口服利用度缺乏等问题，限制了它的广泛应用。近年来，用于乳腺癌的雌激素受体降解剂的开发越来越多，更多集中于小分子合成化合物或药物组合物(CN110343101A，CN 111646972A，CN 112041307A，CN 112424205A，CN112638916A，CN 112912078A，CN 113614076A，CN 114302879A，CN114502539A，CN 114656452A和CN 114667147A)。而天然来源的雌激素受体降解剂报道较少，为充分开发丰富植物资源，以方便、快捷、经济为目的，寻找天然来源的雌激素受体降解剂具有重要意义。
[0004]柑橘是世界最大类药食两用水果，是芸香科植物的重要分支，品种资源丰富，分布广泛，主要集中在湖北、湖南、广东、福建等长江流域以南各省，是种植面积最大的水果。柑橘属果实化学成分类型多样，主要包括黄酮类、萜类、香豆素类、生物碱类等，以黄酮成分为主；生物活性广泛，目前已对柑橘属植物的化合物进行了抗肿瘤、抗炎、抗氧化、抗病毒和预防心血管疾病等多方面的研究。文献[Journal ofAgricultural and Food Chemistry,2011,59(6):2314
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2323.]研究发现，与其他柠檬苦素类化合物以及合成柠檬苦素衍生物相比，去乙酰诺米林对雌激素受体阳性乳腺癌细胞抑制率要高出400倍，是最有效的雌激素受体阳性乳腺癌细胞抑制剂。这一研究给专利技术者提供了一种思路，从柑橘属果实中寻找更安全、更高效的雌激素受体降解剂治疗乳腺癌成为一种可能。
[0005]因此，针对上述科学问题，进一步挖掘柑橘属果实活性物质成分，并拓展其作为新的乳腺癌治疗方案，推进柑橘精深加工往大健康产业发展，具有重要的基础和应用基础研究价值。

技术实现思路

[0006]本专利技术的目的在于克服天然来源、低毒副作用和用于内分泌治疗的雌激素受体降解剂的缺乏问题，提供了一种柑橘属果实提取物作为雌激素受体降解剂治疗乳腺癌的方法。具体是提供了一种柑橘属果实提取物及其制备方法，以及提取物在治疗雌激素受体阳性乳腺癌上的用途，即通过泛素
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蛋白酶体途径降解雌激素受体，进而显著抑制雌激素受体阳性乳腺癌的生长。
[0007]为了实现上述专利技术目的，本专利技术提供以下技术方案：
[0008]本专利技术提供了一种柑橘属果实提取物，所述提取物主要成分为多甲氧基黄酮；
[0009]所述多甲氧基黄酮包括5,7,8,4',5'
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五甲氧基黄酮、5,6,7,4',5'
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五甲氧基黄酮、5,6,7,8,3',4'
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六甲氧基黄酮、3,5,6,7,8,3',4'
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七甲氧基黄酮和5,6,7,8,4'
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五甲氧基黄酮中的一种或多种。
[0010]本专利技术还提供了所述的柑橘属果实提取物的制备方法，包括如下步骤：
[0011](1)将柑橘属果实与水混合后粉碎，一次离心去渣，得物料1，将物料1与盐酸混合，静置冷却至室温，二次离心，收集沉淀，为物料2；
[0012](2)将步骤(1)所得物料2用水洗涤，三次离心得沉淀，加入无水乙醇浸提2～4次，合并浸提液，减压浓缩，干燥，得柑橘属果实提取物。
[0013]优选的，步骤(1)所述柑橘属果实与水混合比例为8～12g：1mL；所述一次离心和二次离心的转速独立为8000～12000rpm，时间独立为8～12min。
[0014]优选的，步骤(1)所述物料1与盐酸的体积比为1：1.5～2.5；所述静置的时间为12～16h。
[0015]优选的，步骤(2)所述物料2与水的质量体积比为1g：8～12mL，洗涤3次；所述三次离心的转速为8000～12000rpm，时间为8～12min；每次浸提，所述沉淀与无水乙醇的质量体积比为1g：1.5～2.5mL，所述浸提的温度为22～28℃，浸提的时间为12～18min。
[0016]优选的，所述柑橘属果实包括橘、橙或柑。
[0017]优选的，所述柑橘属果实包括全果、果皮或果肉。
[0018]本专利技术还进一步提供了所述的柑橘属果实提取物，所述的柑橘属果实提取物的制备方法制备得到的柑橘属果实提取物在制备治疗乳腺癌药物中的应用。
[0019]优选的，所述药物为雌激素受体降解剂。
[0020]优选的，所述乳腺癌为雌激素受体阳性乳腺癌。
[0021]与现有技术相比，本专利技术具有如下的有益效果：
[0022](1)本专利技术构造模型所使用的是两种以上细胞雌激素受体阳性乳腺癌细胞株进行验证，同时使用的动物实验进一步明确所述抗肿瘤药物混合提取物对雌激素受体阳性乳腺癌的疗效及对雌激素受体的降解作用。
[0023](2)本专利技术提供所述一种柑橘属果实提取物作为雌激素受体降解剂是来源于芸香科柑橘属植物的天然成分，可作为添加成分制备食品、保健品和药物，还提供了该类提取物作为雌激素受体降解剂治疗乳腺癌的用途，弥补了天然来源的雌激素受体降解剂的缺失。
附图说明
[0024]为了更清楚地说明本专利技术实施例或现有技术中的技术方案，下面将对实施例或现有技术描述中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图仅仅是本专利技术的实施例，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据提供的附图获得其他的附图。
[0025]图1为实施例1的提取物与人乳腺癌MCF7细胞共孵育后结晶紫活细胞染色结果；
[0026]图2为实施例1的提取物对人乳腺癌MCF7细胞生长抑制曲线；
[0027]图3为实施例1的提取物随着时间梯度及浓度梯度对人雌激素受体阳性乳腺癌细
胞MCF7的雌激素受体蛋白水平的影响；
[0028]图4为实施例4使用MG132(蛋白酶体途径抑制剂)，BAF
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A1(溶酶体途径抑制剂)分别抑制蛋白降解相关途径后，实施例1的雌激素受体降解剂在不同时间梯度对人及鼠的雌激素受体阳性乳腺癌细胞MCF7、T47D和SSM2的雌激素受体蛋白水平的影响。
[0029]图5为实施例5中SSM2
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129小鼠同种移植瘤模本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种柑橘属果实提取物，其特征在于，所述提取物主要成分为多甲氧基黄酮；所述多甲氧基黄酮包括5,7,8,4',5'
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五甲氧基黄酮、5,6,7,4',5'
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五甲氧基黄酮、5,6,7,8,3',4'
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六甲氧基黄酮、3,5,6,7,8,3',4'
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七甲氧基黄酮和5,6,7,8,4'
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五甲氧基黄酮中的一种或多种。2.权利要求1所述的柑橘属果实提取物的制备方法，包括如下步骤：(1)将柑橘属果实与水混合后粉碎，一次离心去渣，得物料1，将物料1与盐酸混合，静置冷却至室温，二次离心，收集沉淀，为物料2；(2)将步骤(1)所得物料2用水洗涤，三次离心得沉淀，加入无水乙醇浸提2～4次，合并浸提液，减压浓缩，干燥，得柑橘属果实提取物。3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，步骤(1)所述柑橘属果实与水混合比例为8～12g：1mL；所述一次离心和二次离心的转速独立为8000～12000rpm，...

【专利技术属性】
技术研发人员：邓张双，秦烨，王羿语，孙梦，杜姝，
申请(专利权)人：三峡大学，
类型：发明
国别省市：