磺胺类和四环素类抗生素的人工复合抗原、广谱检测抗体及其ELISA检测方法技术

本发明专利技术提供了磺胺类和四环素类抗生素的人工复合抗原、广谱检测抗体及其ELISA检测方法，属于免疫分析技术领域。本发明专利技术构建磺胺类(sulfonamides,SAs)和四环素类(tetracyclines,TCs)抗生素的人工复合抗原，在人工抗原内引入磺胺片段和四环素片段，通过戊二醛连接臂将磺胺片段、四环素片段与载体蛋白连接，得到磺胺类和四环素类抗生素的人工复合抗原。此人工复合抗原经动物免疫后可以得到对SAs和TCs具有特异性、效价高的广谱抗体，可以直接检测样品中SAs和TCs总量。本发明专利技术提供了一种磺胺类和四环素类抗生素总量的ELISA检测方法，此法对SAs和TCs类抗生素线性良好。此法对SAs和TCs类抗生素线性良好。此法对SAs和TCs类抗生素线性良好。

【技术实现步骤摘要】
磺胺类和四环素类抗生素的人工复合抗原、广谱检测抗体及其ELISA检测方法


[0001]本专利技术涉及免疫分析
，特别涉及磺胺类和四环素类抗生素的人工复合抗原、广谱检测抗体及其ELISA检测方法。

技术介绍

[0002]抗生素从生产到消费中的各个环节都有可能进入环境，环境中残留的抗生素会导致耐药基因的产生，改变微生物生态环境；同时由于食物链积累，抗生素也会对人体造成不可预计的危害。目前，抗生素对水体的污染日益严重，医疗卫生、畜牧养殖、水产养殖成为环境水体中抗生素的主要污染源。虽然各地污染程度大不相同，但是检出频率较高，在我国检出浓度较大的抗生素种类依次为：磺胺类、四环素类、大环内酯类、喹诺酮类、氯霉素类。因此，构建快速高效的抗生素类物质的检测方法显得尤为重要。
[0003]目前国内外对水体中抗生素的检测方法主要是仪器分析法，此类方法对仪器条件要求高，前处理操作相对复杂、耗时。ELISA利用抗原
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抗体特异性反应，很好的弥补了仪器分析法的不足，由于不需要昂贵的仪器设备，且特异性强、灵敏度高、操作简便快捷，在现场筛选和本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种人工复合抗原，具有式I所示结构：式I中，“N
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Protein
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N”表示载体蛋白。2.根据权利要求1所述的人工复合抗原，其特征在于，所述载体蛋白为牛血清蛋白或卵清蛋白。3.权利要求1或2所述的人工复合抗原的制备方法，包括以下步骤：将磺胺、戊二醛、载体蛋白、醇溶剂和缓冲溶液混合，进行第一偶联反应，得到具有式a所示结构的化合物；将所述具有式a所示结构的化合物、四环素和戊二醛混合，进行第二偶联反应，得到具有式I所示结构的人工复合抗原。4.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于，所述第一偶联反应的温度为22～26℃，时间为4～5h；所述第二偶联反应的温度为22～26℃，时间为4～5h。5.权利要求1或2所述的人工复合抗原或权利要求3或4所述制备方法制备得到的人工复合抗原在制备磺胺类和四环素类抗生素广谱检测抗体中的应用。6.一种磺胺类和四环素类抗生素广谱检测抗体，由权利要求1或2所述的人工复合抗原或权利要求3或4所述制备方法制备得到的人工复合抗原免疫宿主动物得到。7.一种检测磺胺类和/或四环素类抗生素的试剂盒，包括包被抗原，封闭剂，权利要求6所述的磺胺类和四环素类抗生素广谱检测抗体，酶标二抗，显色剂，酶标板；所述包被抗原为权利要求1或2所述的人工复合抗原或权利要求3或4所述制备方法制
备得到的人工复合抗原；所述包被抗原结构中的载体蛋白与制备磺胺类和四环素类抗生素...

【专利技术属性】
技术研发人员：刘旭东，张玉超，吴福勇，余梅，
申请(专利权)人：茅台学院，
类型：发明
国别省市：