一种凤梨百合的叶片再生组培繁殖方法技术

本发明专利技术属于植物无性繁殖技术领域，公开了一种凤梨百合的叶片再生组培繁殖方法，包括以下步骤：以凤梨百合新鲜叶片为外植体，消毒后接种于初代培养基上，诱导出1cm以上的芽：将诱导出的芽接种于生根培养基中，培养至生根；取长高至5cm以上的生根苗叶片，剪成1

【技术实现步骤摘要】
一种凤梨百合的叶片再生组培繁殖方法


[0001]本专利技术属于植物无性繁殖
，涉及一种凤梨百合的叶片再生组培繁殖方法。

技术介绍

[0002]凤梨百合(Eucomis autummalis)，是百合科凤梨百合属多年生球茎草本，又称菠萝花、菠萝百合、彩凤兰。原产南非。小花密聚在花茎上，形成粗粗的花穗，花穗先端顶部的小叶苞片成放射状伸展。整体看花的形状犹如菠萝。花期长，从春季能开到夏季。花色也较丰富，有白色、黄色、粉色、淡绿以及复色等。凤梨百合，株高大约有40
‑
60厘米，叶宽带形，大约有20
‑
30厘米左右，是一种观赏性很强的观花观叶植物，尤其可栽培于室内，作为家庭园艺观赏是品位很高的。其种球抗性极强、极耐热、耐寒度优于朱顶红。在园林中可广泛应用，具备绿化的功能，它可生长在公园内，也可作为城市绿化的较好的植物栽植在路边或广场上，可配置花带、花坛、花台、花镜等，用来美化环境，可做成鲜切花来美化室内环境，亦可作为插花、花篮、花环、花束的材料。对于水土保持起非常重要的作用，它们根系发达，再生能力强，可在山坡上种植，可保护山区有限的土壤不被流水冲走。
[0003]目前常见的凤梨百合繁殖方式有无性繁殖和有性繁殖两种，其无性繁殖主要有鳞片繁殖、籽球繁殖、珠芽繁殖和叶片扦插，但其繁殖周期长，繁殖数量有限；而有性繁殖时间长，种性易变，且我国国内栽培气候原因，果实很难成熟。申请公布号为CN114885690A的专利技术专利公开了一种利用凤梨百合规模化生产繁殖方法，其采用无性系扦插繁殖，使叶片具叶脉却无芽点的形态学下部叶片再生根系及球茎，但80日小球茎繁殖系数为2.03，繁殖时间较长。

技术实现思路

[0004]本专利技术的目的在于提供一种凤梨百合的叶片再生组培繁殖方法，可用于凤梨百合的大规模工厂化繁殖。
[0005]为实现上述目的，本专利技术采用以下技术方案：本专利技术提供一种凤梨百合的叶片再生组培繁殖方法，包括以下步骤：步骤a：以凤梨百合新鲜叶片为外植体，消毒后接种于初代培养基上，诱导出1cm以上的芽：步骤b：将步骤a诱导出的芽接种于生根培养基中，培养至生根；步骤c：取步骤b长高至5cm以上的生根苗叶片，剪成1
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2cm小段，接种于再生培养基中，培养30d分化出再生小芽；步骤d：将步骤c的再生苗转接步骤b所用生根培养基培养30d后进行炼苗，半开瓶炼苗2天，洗净培养基，种植于移栽基质中，环境保持湿度80％以上，温度20
‑
30度之间；每天喷一次水，一周后进入正常管理，见干见湿浇水即可。
[0006]在一个技术方案中，步骤a中所述初代培养基为MS+1.5mg/L 6
‑
BA+0.2mg/L NAA+
30g/L白糖+6g/L琼脂，pH值5.8
‑
6.0。
[0007]在一个技术方案中，步骤b中所述生根培养基为1/2MS+墨汁+25g/L白糖+6g/L琼脂，pH值5.8
‑
6.0。
[0008]在一个技术方案中，步骤c中所述再生培养基为MS+1.5mg/L 6
‑
BA+0.2mg/L NAA+30g/L白糖+6g/L琼脂，pH值5.8
‑
6.0。
[0009]在一个技术方案中，所述移栽基质由比例为5:2的泥炭和珍珠岩组成。
[0010]相比现有技术，本专利技术的有益效果在于：本专利技术以凤梨百合叶片为材料，经过初代培养、增殖培养、生根培养、再生培养等试验过程，发现常规生长素IAA或IBA对凤梨百合生根有抑制作用，采用1/2MS+墨汁+30g/L白糖+6g/L琼脂为生根培养基的生根率达100％且价格便宜，还发现叶片再生的增殖方式显著优于芽分孽芽的增殖方式，使本专利技术组培繁殖方法可用于凤梨百合的大规模工厂化繁殖。
附图说明
[0011]图1为本专利技术实施例中初代培养时叶片诱导不定芽前期照片。
[0012]图2为本专利技术实施例中初代培养时叶片诱导出不定芽照片。
[0013]图3为本专利技术实施例中增殖培养基Z1培养畸形芽照片。
[0014]图4为本专利技术实施例中生根培养基S4培养30天生根情况。
[0015]图5为本专利技术实施例中再生培养基Z1培养30天增殖情况。
[0016]图6为本专利技术实施例中再生苗移栽30天生长情况。
具体实施方式
[0017]以下实施例用于说明本专利技术，但不用来限定本专利技术的保护范围。若未特别指明，实施例中所用技术手段为本领域技术人员所熟知的常规手段。下述实施例中的试验方法，如无特别说明，均为常规方法。
[0018]实施例一1.1消毒灭菌试验材料：叶片采集凤梨百合新鲜叶片，流水冲洗10min后，沥干水分，用剪刀剪成约5
×
4cm的大小，然后于超净工作台中，使用75％酒精震荡摇晃灭菌1min，无菌水冲洗1遍后，再用2％(活性氯)次氯酸钠消毒灭菌8min后，无菌水冲洗5遍，滤纸吸干，剪去叶片边缘白化部分，分割成约2
×
2大小的片段备用。
[0019]1.2初代培养将1.1准备叶片平放于MS+1.5mg/L 6
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BA+0.2mg/L NAA+30g/L白糖+6g/L琼脂，pH值5.8
‑
6.0的初代培养基上。培养20天、40天后观察。结果如图1和图2所示。结果显示：培养20d后，叶片边缘失绿，部分叶片整体呈现水渍状。培养40d后，未完全失绿叶片出现愈伤组织和不定芽，统计其污染率达50％，主要为真菌污染，诱导率达22％。
[0020]1.3增殖培养将步骤1.2诱导出的芽接种于下列增殖培养基：
增殖培养基Z1：MS+1.5mg/L 6
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BA+0.2mg/L NAA+30g/L白糖+6g/L琼脂，pH值5.8
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6.0；增殖培养基Z2：MS+1.5mg/L 6
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BA+0.01mg/L IBA+30g/L白糖+6g/L琼脂，pH值5.8
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6.0；增殖培养基Z3：MS+0.5mg/L 6
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BA+0.01mg/L IBA+30g/L白糖+6g/L琼脂，pH值5.8
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6.0。
[0021]培养60天后观察。增殖培养基Z1培养结果如图3所示。结果显示：3个培养基上均可增殖，但分孽芽较少，芽表现出畸形，增殖系数较低为2，增殖周期长达2个月。
[0022]1.4生根培养将步骤1.2所得的单芽接种于下列生根培养基上：生根培养基S0：1/2MS+1mg/L IBA+25g/L白糖+6g/L琼脂，pH值5.8
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6.0；生根培养基S1：1/2MS+0.1mg/L NAA+25g/L白糖+6g/L琼脂，pH值5.8
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6.0；生根培养基S2：1/2MS+0.1mg/L NAA+0.2％活性炭+25g/L白糖+6g/L琼脂，pH值5.8
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【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种凤梨百合的叶片再生组培繁殖方法，其特征在于，包括以下步骤：步骤a：以凤梨百合新鲜叶片为外植体，消毒后接种于初代培养基上，诱导出1cm以上的芽：步骤b：将步骤a诱导出的芽接种于生根培养基中，培养至生根；步骤c：取步骤b长高至5cm以上的生根苗叶片，剪成1
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2cm小段，接种于再生培养基中，培养30d分化出再生小芽；步骤d：将步骤c的再生苗转接步骤b所用生根培养基培养30d后进行炼苗，半开瓶炼苗2天，洗净培养基，种植于移栽基质中，环境保持湿度80%以上，温度20
‑
30度之间；每天喷一次水，一周后进入正常管理，见干见湿浇水即可。2.根据权利要求1所述的一种凤梨百合的叶片再生组培繁殖方法，其特征在于，步骤a中所述初代培养基为MS+1.5mg/L 6

【专利技术属性】
技术研发人员：谢松林，李飞鸿，向明剑，陈泱，岳可，
申请(专利权)人：四川立德种苗科技有限公司，
类型：发明
国别省市：