一种提高单链DNA产量和改善产物比例的方法技术

本申请提供一种提高单链DNA产量和改善产物比例的方法，取鼻咽癌病人血样，针对肿瘤标志片段设计引物，选取Tm较高的引物作为限制性引物L，并制作其3

【技术实现步骤摘要】
一种提高单链DNA产量和改善产物比例的方法


[0001]本专利技术属于生物
，具体涉及一种提高单链DNA产量和改善产物比例的方法。

技术介绍

[0002]现有技术中，生产单链DNA是先设计目标片段，引物，通过改变PCR反应的温度，循环数以及引物比例，可以产生数量较少的单链DNA；生产部分单链DNA：对限制性引物做某种修饰，可以使得该引物牢固得附着在目标单链上，形成部分单链DNA。其单链DNA的生产技术缺点是对不同的DNA片段，引物进行PCR的条件均需反复摸索，一般的实验方案不仅低效而且不通用，修饰磷酸基团的限制性引物封闭性较差，效率仍不够高。
[0003]由于双链DNA难以与SERS标记结合，给血液中的肿瘤标记物检测带来困难，对于单链DNA的需求日益增长。然而现有的制备单链DNA的方法不仅效率极低，而且适配性差。通过对限制性引物进行特异性修饰并改善PCR流程，可以提高制备单链DNA的效率。

技术实现思路

[0004]本专利技术的目的在于提供一种提高单链DNA产量和改善产物比例的方法。
[0005]为实现上述本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种提高单链DNA产量和改善产物比例的方法，其特征在于：包括如下步骤：（1）取鼻咽癌病人血样，针对肿瘤标志片段设计引物；（2）选取Tm较高的引物作为限制性引物L，并制作其3
’
修饰C3基团的阻断引物；（3）将10uM限制性引物L稀释20倍，将稀释后的引物和过量引物R以L:R=1:20的比例进行非对称PCR，第5次循环中止反应，添加与过量引物R等mol的C3修饰的限制性引物L，重新开始新的非对称PCR流...

【专利技术属性】
技术研发人员：陈童，冯尚源，林多，
申请(专利权)人：福建师范大学，
类型：发明
国别省市：