OXT基因编辑模型犬的建立方法技术

本发明专利技术涉及用于建立OXT基因编辑模型犬的方法，具体涉及利用基因编辑技术制备OXT基因敲除型疾病OXT基因编辑模型犬的方法，以及获得的OXT基因敲除型OXT基因编辑模型犬及其细胞、组织和器官，使利用犬作为社交行为机制研究动物模型研究变得可行。究动物模型研究变得可行。

【技术实现步骤摘要】
OXT基因编辑模型犬的建立方法


[0001]本专利技术属于基因工程领域，具体涉及OXT基因编辑模型犬的建立方法，尤其是涉及利用基因编辑技术制备OXT基因敲除型模型犬的方法。

技术介绍

[0002]社交认知是开展一系列社会交往(比如配偶选择、伴侣偏好和母子间亲密行为等)的基础。神经肽催产素(oxytocin,OXT)在社会行为中的作用是社会神经科学领域最早和最重要的发现之一。大量的研究发现催产素对诸如人类的信任、共情、情绪识别、自闭特质、社会性信息加工等社会认知与情感行为发挥着重要作用。OXT缺乏导致人的社会记忆和交往行为减弱、暴饮暴食，是引起肥胖的一个重要诱因。有相关研究已经将催产素应用到了精神分裂症、焦虑症、抑郁症和创伤后应激障碍的治疗之中。催产素是社会认知过程的重要调节器，还需要进一步来解析催产素对社会感知、认知和人际行为的调控机制。
[0003]催产素系统可能在犬从狼驯化的过程中发挥重要作用。犬已经进化出独特的人类模拟社交技能，使它们能够有效地与人沟通和合作。犬的类似人类的交流方式，包括相互凝视，可能是在驯养过程中获得的。催产素受本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.用于建立OXT基因编辑模型犬的方法，所述方法包括利用基因编辑技术获得OXT基因敲除的犬受精卵或犬体细胞。2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述基因编辑技术选自BE3单碱基编辑技术、CRISPR、TALEN和ZFN，优选为CRISPR/Cas9。3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述方法包括如下步骤：(1)根据犬OXT基因的1号外显子和2号外显子的序列确定打靶位点；(2)根据步骤(1)确定的打靶位点合成sgRNA序列，将合成的sgRNA序列与骨架载体连接构建sgRNA打靶载体；(3)通过体外转录，分别获得sgRNA和CRISPR/Cas9的体外转录产物；(4)将步骤(3)获得的sgRNA和CRISPR/Cas9的体外转录产物导入犬受精卵或犬体细胞中，获得OXT基因敲除的犬受精卵或犬体细胞。4.根据权利要求3所述的方法，其特征在于，根据犬OXT基因序列的1号外显子和2号外显子的序列确定3个打靶位点，优选地，所述打靶位点的sgRNA序列及其互补序列包括：S1位点：ACCCGCTGTGACCAGCCATGCGG(SEQ ID NO:2)，互补序列为：CCGCATGGCTGGTCACAGCGGGT(SEQ ID NO:3)；S2位点：GCAGTTCTGGATGTAGCAGGCGG(SEQ ID NO:4)，互补序列为：CCGCCTGCTACATCCAGAACTGC(SEQ ID NO:5)；S3位点：TTCGGGCCCAGCATCTGCTGCGG(SEQ ID NO:6)，互补序列为：CCGCAGCAGATGCTGGGCCCGAA(SEQ ID NO:7)。5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述犬体细胞来自如下的组织或器官：胎儿组织、皮肤、肌肉、耳、乳腺、输卵管、卵巢、血液、尿液、脂肪、骨髓、血管和管腔内皮。6.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述方法还包括将获得的OXT基因敲除的犬受精卵移植到受体母犬的输卵管内，从而制备OXT基因编辑模型犬。7.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述方法还包括将获得的OXT基因敲除的犬体细胞的细胞核移植到犬去核卵母细胞中，然后将核移植后的犬去核卵母细胞移植到受...

【专利技术属性】
技术研发人员：米继东，赵建平，张永清，徐惠娟，
申请(专利权)人：中国科学院遗传与发育生物学研究所，
类型：发明
国别省市：