抗SARS-CoV-2病毒的单克隆抗体6G21H及其制备方法和应用技术

本发明专利技术公开了一种抗SARS

【技术实现步骤摘要】
抗SARS
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CoV
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2病毒的单克隆抗体6G21H及其制备方法和应用


[0001]本专利技术属于生物
，尤其涉及抗SARS
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CoV
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2病毒的单克隆抗体及其制备方法。

技术介绍

[0002]新型冠状病毒被国际病毒分类委员会命名为SARS
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CoV
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2(重症急性呼吸系统综合症冠状病毒2)，人感染了新型冠状病毒后常见体征包括呼吸道症状、发热、咳嗽、气促和呼吸困难等，严重地可导致死亡。
[0003]目前尚无针对新型冠状病毒所致疾病的快速有效治疗方法，对新型冠状病毒及时快速检测对于感染者的及时治疗都是至关重要的。目前已知的检测方法有RT
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PCR法、抗原检测法、血清抗体检测法等。其中，抗原检测法通过使用单克隆抗体检测SARS
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CoV
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2 的相应抗原靶标，具有快速、操作简单和易于使用等优点，对于新型冠状病毒及时快速检测具有重要意义。
[0004]新型冠状病毒包括四种主要的结构蛋白：刺突蛋白(spike protein，也称为S蛋白)、核衣壳蛋白(nucleoca psid protein，也称为N蛋白)、膜蛋白(mem brane protein，也称为M蛋白) 和包膜蛋白(envelope protein，也称为E蛋白)。单克隆抗体技术在近年内得到了迅猛的发展，现有技术已有新型冠状病毒相关单克隆抗体的报道。例如：CN 111704666 A公开了新型冠状病毒N蛋白的配对单克隆抗体及其应用，采用纯化的新型冠状病毒(SARS
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CoV
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2)重组N 蛋白免疫小鼠制备单克隆抗体。新型冠状病毒的S蛋白是病毒进入宿主细胞的关键部位，是宿主中和抗体的重要作用位点。
[0005]现有技术尚未发现针对SAR
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CoV
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2病毒的S蛋白相关检测方法，因此，提供一种针对Spike 蛋白的抗SARS
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CoV
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2病毒的单克隆抗体及其制备方法具有重要意义。

技术实现思路

[0006]为解决现有技术中存在的问题，本专利技术提供针对SAR
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CoV
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2病毒S蛋白的单克隆抗体及相应的制备方法和应用，可实现对SAR
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CoV
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2病毒的快速、特异性检测，操作方便，检测结果的稳定性和准确性好。
[0007]本专利技术的目的将通过下面的详细描述来进一步说明。
[0008]一个方面，本专利技术提供人源化抗SARS
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CoV
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2病毒的单克隆抗体或来源于该单克隆抗体的能够特异性结合SARS
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CoV
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2病毒的生物活性片段，其中，所述单克隆抗体具有如下所示的重轻链CDR1、CDR2及CDR3区
[0009]重链CDR1区：DSPSDDYG；SEQ ID NO.5
[0010]重链CDR2区：ISYNGINK；SEQ ID NO.6
[0011]重链CDR3区：AKDSGPYYDIMIGYYDLNY；SEQ ID NO.7
[0012]轻链CDR1区：QGISNY；SEQ ID NO.8
[0013]轻链CDR2区：AAS；
[0014]轻链CDR3区：QQYNSYPFT SEQ ID NO.9。
[0015]进一步地，所述单克隆抗体抗体的重链可变区氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示： QVQLVESGGGVVSLVDSLCASDSPSDDYGIHWVRQAPGKGLEWVAFISYNGINKYYVDSVKGRFTISRDYSKNTLYLQMQSLRAEDTAVYYCAKDSGPYYDIMIGYYDLNYWGPGTLVTV SS SEQ ID NO:1。
[0016]进一步地，所述单克隆抗体抗体的轻链可变区氨基酸序列如SEQ ID NO:2所示： DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCRASQGISNYLAWFQQKPGKAPKSLIYAASILQSGVPSKFTGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQYNSYPFTFGPGTTVDIKR SEQ ID NO:2。
[0017]另一个方面，本专利技术提供了编码上述单克隆抗体或来源于该单克隆抗体的能够特异性结合SARS
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CoV
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2的生物活性片段的核苷酸序列。
[0018]进一步地，所述核苷酸序列包含编码具有SEQ ID NO:1所示的氨基酸的核苷酸序列；和 /或
[0019]所述基因包含编码具有SEQ ID NO:2所示的氨基酸的核苷酸序列。
[0020]进一步地，编码具有SEQ ID NO:1所示的氨基酸的核苷酸序列如SEQ ID NO:3所示，编码具有SEQ ID NO:2所示的氨基酸的核苷酸序列如SEQ ID NO:4所示。
[0021]SEQ ID NO:3的序列如下所示：
[0022]caggtgcagctggtggagtctgggggaggcgtggtcagcctggtcgactctctgtgcgcgtctgattcaccttcagatgactatggcattcactg ggtccgccaggctccaggcaaggggctggagtgggtggcttttatatcgtataatggaattaataaatactacgtagactccgtgaagggccgattcaccatctccagagactattccaagaacaccctgtatctgcaaatgcagagcctgagagccgaggacacggctgtgtattactgtgcgaaagat tcggggccctattacgatattatgattggttattacgacttgaactactggggcccgggaaccctggtcaccgtctcctca。
[0023]SEQ ID NO:4的序列如下所示：
[0024]gacatccagatgacccagtctccatcctcactgtctgcatctgtaggagacagagtcaccatcacttgtcgggcgagtcagggcattagtaattatt tagcctggtttcagcagaaaccagggaaagcccctaagtccctgatctatgctgcatccattttgcaaagtggggtcccatcaaagttcaccggcagtggatctgggacagatttcactctcaccatcagcagcctgcagcctgaagattttgcaacttattactgccaacaatataacagttacccattcac tttcggccctgggaccacagtggatatcaaacga。
[0025]又一个方面，本专利技术提供了含上述核苷酸序列的载体。...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.人源化抗SARS
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CoV
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2病毒的单克隆抗体或来源于该单克隆抗体的能够特异性结合SARS
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CoV
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2病毒的生物活性片段，其特征在于，所述单克隆抗体具有如下所示的重轻链CDR1、CDR2及CDR3区，重链CDR1区：DSPSDDYG；SEQ ID NO.5，重链CDR2区：ISYNGINK；SEQ ID NO.6，重链CDR3区：AKDSGPYYDIMIGYYDLNY；SEQ ID NO.7，轻链CDR1区：QGISNY；SEQ ID NO.8，轻链CDR2区：AAS，轻链CDR3区：QQYNSYPFT SEQ ID NO.9。2.根据权利要求1所述的单克隆抗体或生物活性片段，其特征在于，所述单克隆抗体抗体的重链可变区氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示：QVQLVESGGGVVSLVDSLCASDSPSDDYGIHWVRQAPGKGLEWVAFISYNGINKYYVDSVKGRFTISRDYSKNTLYLQMQSLRAEDTAVYYCAKDSGPYYDIMIGYYDLNYWGPGTLVTVSS SEQ ID NO:1。3.根据权利要求1所述的单克隆抗体或生物活性片段，其特征在于，所述单克隆抗体抗体的轻链可变区氨基酸序列如SEQ ID NO:2所示：DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCRASQGISNYLAWFQQKPGKAPKSLIYAASILQSGVPSKFTGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQYNSYPFTFGPGTTVDIKR SEQ ID NO:2。4.编码权利要求1
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3任一项所述的单克隆抗体或来源于该单克隆抗体的能够特异性结合SARS
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CoV
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2的生物活性片段的核苷酸序列；优选地，所述核苷酸序列包含编码具有SEQ ID NO:1所示的氨基酸的核苷酸序列；和/或所述基因包含编码具有SEQ ID NO:2所示的氨基酸的核苷酸序列；更优选地，编码具有SEQ ID NO:1所示的氨基酸的核苷酸序列如SEQ ...

【专利技术属性】
技术研发人员：任晓虎，刘建军，许本洪，房师松，刘威，黄新凤，李俊鑫，
申请(专利权)人：深圳市疾病预防控制中心深圳市卫生检验中心，深圳市预防医学研究所，
类型：发明
国别省市：