实现A到C和/或A到T碱基突变的碱基编辑系统及其应用技术方案

本发明专利技术公开了一种实现A到C和/或A到T碱基突变的碱基编辑系统及其应用，采用3

【技术实现步骤摘要】
实现A到C和/或A到T碱基突变的碱基编辑系统及其应用


[0001]本专利技术属于生物
，具体涉及一种实现A到C和/或A到T碱基突变的碱基编辑系统及其应用。

技术介绍

[0002]人类遗传病发生的本质是由于基因突变，60％左右的遗传疾病由单个碱基突变引起，传统的利用基因组编辑技术介导的同源重组进行纠正这类遗传病非常低效(0.1％
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5％)。基于CRISPR系统衍生出来的单碱基编辑器是近年来新兴的高效碱基编辑技术，因不产生DNA双链断裂、无须重组模板、高效编辑等优势使其在基础研究和临床疾病治疗展示了巨大的应用前景。
[0003]经典的碱基编辑器主要分为胞嘧啶碱基编辑器(CBE)和腺嘌呤碱基编辑器(ABE)，前者由活性受损的来源于酿脓链球菌(Streptococcus pyogenes)spCas9n、大鼠来源的胞嘧啶脱氨酶rAPOBEC1和尿嘧啶糖苷酶抑制剂组成，其中Cas9蛋白以NGG作为PAM识别并特异结合DNA，紧接着在脱氨酶以及DNA修复的作用下，最终在NGG(21
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23位)上游靶向序列2本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种实现A到C和/或A到T碱基突变的基因编辑系统，其特征在于，包括腺苷脱氨酶TadA、Cas9核酸酶以及3
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甲基腺嘌呤糖苷酶。2.根据权利要求1所述的实现A到C和/或A到T碱基突变的基因编辑系统，其特征在于，所述3
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甲基腺嘌呤糖苷酶的基因序列如SEQ ID No.1
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4任一个所示。3.根据权利要求1所述的实现A到C和/或A到T碱基突变的基因编辑系统，其特征在于，所述3
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甲基腺嘌呤糖苷酶的氨基酸序列如SEQ ID No.5
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8任一个所示。4.根据权利要求1所述的实现A到C和/或A到T碱基突变的基因编辑系统，其特征在于，所述3
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甲基腺嘌呤糖苷酶来源于人、大鼠、小鼠或枯草芽孢杆菌。5.根据权利要求1所述的实现A到C和/或A到T碱基突变的基因编辑系统，其特征在于，所述腺苷脱氨酶TadA的来源包括大肠杆菌，金黄色葡萄球菌,酱油海洋杆菌和不动杆菌，优选的，所述腺苷脱氨酶TadA来源自大肠杆菌；更优选的，大肠杆菌来源的TadA为TadA
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8e。所述Cas9核酸酶包括来源于酿酒酵母的spCas9、Cas9n以及其变体VQR
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spCas9、VRER
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spCas9、spRY和spNG，以及来源于金黄色葡萄球菌的SaCas9及其突变体SaCas9
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KKH、SaCas9
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NG，也包括来源于毛螺菌科细菌的LbCas12a和来源于酸胺球菌属的enAsCas12a，所述Cas9核酸酶还可用其它能特异识别DNA具备切割功能的核酸酶替代，优选的...

【专利技术属性】
技术研发人员：陈亮，李大力，洪梦佳，栾昌明，
申请(专利权)人：华东师范大学，
类型：发明
国别省市：