马齿苋中一种酰胺酯类生物碱的提取分离方法及其应用技术

本发明专利技术公开从马齿苋中提取、分离和鉴别出的一种新酰胺酯类生物碱化合物及其应用，属于中药提取、分离领域。所述新化合物的分子式为C7H

【技术实现步骤摘要】
马齿苋中一种酰胺酯类生物碱的提取分离方法及其应用


[0001]本专利技术涉及中药提取、分离领域，尤其涉及从马齿苋药材中提取、分离和鉴别出的新化合物及其提取分离方法。

技术介绍

[0002]马齿苋（Portulaca oleracea L.），又名马苋菜、长命菜、蚂蚁菜，为马齿苋科一年生草本植物。马齿苋分布广泛，资源丰富，是我国卫生部规定的78种药食同源的野生植物之一。马齿苋收载于2020版《中华人民共和国药典》，具有清热解毒、凉血止血、止痢等功效，用于热毒血痢、痈肿疔疮、湿疹、丹毒、蛇虫咬伤、便血、痔血、崩漏下血等。
[0003]马齿苋现代药理学研究表明，其具有抗炎止痛、抗菌抗病毒、降血压、降血脂、抗氧化、抗癌、松弛骨骼肌和平滑肌、调节免疫功能等作用。研究表明马齿苋众多化学成分为其多样的药理作用提供了物质基础，马齿苋主要化学成分包括黄酮类、香豆素、萜类、甾类、生物碱、氨基酸、各种色素类和矿物质类等。其中生物碱是马齿苋中一类主要的化学成分，目前已报道的生物碱类成分有去甲肾上腺素、多巴胺、少量多巴、腺苷、尿嘧啶、腺嘌呤、N，N
‑
二环己基脲、尿囊素、N
‑
反式
‑
阿魏酰基酪胺；还有环二肽生物碱和酰胺类生物碱。
[0004]目前从马齿苋中分离出的化学成分大多数是已知的，且结构新颖性较低，因此，对马齿苋中新化合物的开发和分离是亟待需要的。

技术实现思路

[0005]针对上述问题，本专利技术提供从马齿苋中提取分离的新化合物，经研究发现本专利技术的新化合物具有抗炎、抗胆碱酯酶的作用，同时提供一种针对本专利技术新化合物的简便、快速、环保、纯度高的提取分离方法。
[0006]为实现本专利技术的上述目的，本专利技术提供新化合物，分子式为C7H
14
N2O5，经鉴定为ethyl 3
‑
acetamido
‑3‑
(dihydroxyamino) propanoate，命名为oleracone O。化学结构式为：。
[0007]为实现本专利技术的上述目的，本专利技术还提供一种马齿苋中新酰胺酯类生物碱化合物的提取分离方法，具体步骤为。
[0008]步骤1、取马齿苋干燥药材，采用乙醇回流提取，醇提液滤过，合并滤液减压浓缩，放凉至室温，得药液备用；步骤2、将步骤1中浓缩液用乙酸乙酯反复萃取，减压回收乙酸乙酯至浸膏，得到乙酸乙酯萃取物；步骤3、将步骤2中乙酸乙酯萃取物经大孔树脂柱分离，采用乙醇
‑
水梯度洗脱，30%乙醇部分蒸干后上硅胶柱，依次采用乙酸乙酯
‑
甲醇梯度洗脱，得到若干洗脱部位，经薄层
色谱进行检测，显色，合并显色的洗脱部位，将合并后的洗脱部位经减压浓缩至干，备用；步骤4、将步骤3中所得物再经预处理的ODS柱（Octadecylsilyl，十八烷基硅烷键合硅胶填料）层析分离，用甲醇
‑
水梯度洗脱，得到若干洗脱部位，经薄层色谱进行检测，显色，将显色的洗脱部位减压浓缩至干，得浓缩物备用；步骤5、将步骤4中所得浓缩物经预处理的Sephadex LH
‑
20（羟丙基葡聚糖凝胶），以甲醇等度洗脱，经薄层色谱进行检测，显色，将显色的洗脱部位分别减压浓缩至干，得浓缩物备用；步骤6、对步骤5中所得浓缩物进行HPLC(高效液相)分离制备，以甲醇和0.1%甲酸体积比为30:70作为流动相，制备，最终得到本专利技术所述新化合物。
[0009]所述ODS的预处理过程为甲醇浸泡过24小时，上柱，用甲醇洗至滴入水中无混浊，再以初始流动相平衡。
[0010]与现有技术相比本专利技术的有益效果。
[0011]本专利技术中所述马齿苋新酰胺酯类生物碱化合物的分离和药理活性研究未被现有论文期刊所报道；本专利技术提供来源于马齿苋的新酰胺酯类生物碱化合物及一种针对本专利技术新化合物的提取分离方法，依次采用乙醇回流提取、乙酸乙酯萃取、大孔树脂柱层析、硅胶柱层析、ODS中压柱、Sephadex LH
‑
20及高效液相色谱仪进行分离纯化与制备，成功提取分离出新化合物，该方法操作步骤仅为六步，操作方法简便及快速，提取分离过程主要采用乙醇提取及乙酸乙酯萃取，工艺方法环保，且经该方法分离得到的化合物纯度较高均大于90%，此外经研究表明此化合物具有抗炎和抗胆碱酯酶作用，因此本专利技术新化合物及其盐和衍生物可以作为其他化合物合成先导物，以及新药开发和药理活性研究的原料，亦可用于制备抗炎、抗胆碱酯酶的药物。
附图说明
[0012]图1为本专利技术新化合物oleracone O的高分辨质谱图。
[0013]图2为本专利技术新化合物oleracone O的1H
‑
NMR光谱图。
[0014]图3为本专利技术新化合物oleracone O的1H
‑
NMR细节光谱图。
[0015]图4为本专利技术新化合物oleracone O的
13
C
‑
NMR光谱图。
[0016]图5为本专利技术新化合物oleracone O的
13
C
‑
NMR细节光谱图1。
[0017]图6为本专利技术新化合物oleracone O的
13
C
‑
NMR细节光谱图2。
[0018]图7为本专利技术新化合物oleracone O的DEPT135光谱图。
[0019]图8为本专利技术新化合物oleracone O的DEPT135细节光谱图。
[0020]图9为本专利技术新化合物oleracone O的1H
‑1H COSY光谱图。
[0021]图10为本专利技术新化合物oleracone O的1H
‑1H COSY细节光谱图。
[0022]图11为本专利技术新化合物oleracone O的HSQC光谱图。
[0023]图12为本专利技术新化合物oleracone O的HMBC光谱图。
[0024]图13为本专利技术新化合物oleracone O的HMBC细节光谱图。
[0025]图14为本专利技术新化合物oleracone O的ROESY光谱图。
具体实施方式
[0026]本专利技术提供新化合物，分子式为C7H
14
N2O5，命名为oleracone O，化学结式为：。
[0027]所述新化合物根据结构命名为oleracone O，表1为该新化合物的核磁数据：1H
‑
NMR与
13
C
‑
NMR在氘代甲醇中。
[0028]表1 本专利技术新化合物ethyl 3
‑
acetamido
‑3‑
(dihydroxyamino) propanoate的核磁数据。
[0029]本专利技术化合物结构鉴定参阅图1
‑
14。
[0030]Oleracone O：黄棕色粉末，易溶于甲醇本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种从马齿苋药材中分离出的酰胺酯类生物碱化合物，其特征在于，分子式为C7H
14
N2O5，并且根据结构鉴定为ethyl 3
‑
acetamido
‑3‑
(dihydroxyamino) propanoate，命名为oleracone O，其化学结构式为：。2.一种权利要求1所述的酰胺酯类生物碱化合物的提取分离方法，其特征在于，所述提取分离方法的具体步骤包括：步骤1、取马齿苋干燥药材，采用乙醇回流提取，醇提液滤过，合并滤液减压浓缩，放凉至室温，得药液备用；步骤2、将步骤1中药液用乙酸乙酯反复萃取，减压回收乙酸乙酯至浸膏，得到乙酸乙酯萃取物；步骤3、将步骤2中乙酸乙酯萃取物经大孔树脂柱分离，采用乙醇
‑
水梯度洗脱，30%乙醇部分蒸干后上硅胶柱，依次采用乙酸乙酯
‑
甲醇梯度洗脱，得到若干洗脱部位，经薄层色谱进行检测，显色，合并显色的洗脱部位，将合并后的洗脱部位经减压浓缩至干，备用；步骤4、将步骤3中所得物再经预处理的ODS柱（Octadecylsilyl，十八烷基硅烷键合硅胶填料）层析分离，用甲醇
‑
水梯度洗脱，得到若干洗脱部位，经薄层色谱进行检测，显色，将显色的洗脱部位减压浓缩至干，得浓缩物备用；步骤5、将步骤4中所得浓缩物经预处理的Sephadex LH
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20（羟丙基葡聚糖凝胶），以甲醇等度洗脱，经薄层色谱进...

【专利技术属性】
技术研发人员：英哲铭，杨关林，贾连群，田佳音，刘佩山，英锡相，
申请(专利权)人：辽宁中医药大学，
类型：发明
国别省市：