一种图像激发超微注射方法、系统及设备技术方案

本发明专利技术公开了一种图像激发超微注射方法、系统及设备。该方法包括：通过制备生成液滴，其中液滴包括没有包裹细胞的空包液滴、包裹单个细胞的单包液滴以及包裹多个细胞的多包液滴；将液滴注入微流控芯片并使液滴在微流控芯片的通道中逐个通过；对逐个经过图像捕获区域的液滴进行图像识别处理，输出当前液滴为目标液滴的置信度；当当前液滴为目标液滴时触发激发注射操作，并在目标液滴经过注射区域时向目标液滴注射反应试剂。本发明专利技术将图像处理与超微注射集成，不需要对液滴进行物理标记，避免了实验过程中液滴内容物、细胞污染的风险；通过图像激发的超微注射系统，只有目标液滴经过时才会被注入反应试剂，减少了反应试剂的使用量。减少了反应试剂的使用量。减少了反应试剂的使用量。

【技术实现步骤摘要】
一种图像激发超微注射方法、系统及设备


[0001]本专利技术涉及超微注射
，尤其涉及一种图像激发超微注射方法、系统及设备。

技术介绍

[0002]在基于液滴的微流控系统中，向液滴添加试剂是一项重要的技术。Pico
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injection超微注射是一种强大而实用的微流控技术，可以高通量完成两项微流体的融合。但现阶段应用这项技术时通常是不区分液滴内容物、对所有经过的液滴都进行注射的，这使得它在面对具有不同内容物的液滴时，仍有改良空间。
[0003]现有的微流控系统在单细胞测序分析应用中，由于现有的单细胞测序技术需要保证单测序微珠和单个细胞的配对，所以细胞浓度都会设置成很低来避免出现液滴包裹多个细胞的情况，这样也导致生成的液滴绝大多数的液滴是空包，只有小部分液滴是单包，生成单包液滴效率低；并且在单细胞测序分析中还需要对液滴进行分选、对细胞染色，一定程度上对细胞存在伤害。

技术实现思路

[0004]本专利技术的目的是提供一种图像激发超微注射方法、系统及设备，旨在解决现有微流控系统在单细胞测序分析应用中仍存在本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种图像激发超微注射方法，其特征在于，包括：通过制备生成液滴，其中液滴包括没有包裹细胞的空包液滴、包裹单个细胞的单包液滴以及包裹多个细胞的多包液滴；将所述液滴注入微流控芯片并使所述液滴在所述微流控芯片的通道中逐个通过；对逐个经过图像捕获区域的所述液滴进行图像识别处理，输出当前所述液滴为目标液滴的置信度；当当前所述液滴为目标液滴时触发激发注射操作，并在所述目标液滴经过注射区域时向所述目标液滴注射反应试剂。2.根据权利要求1所述的图像激发超微注射方法，其特征在于，所述通过制备生成液滴，包括：将预设浓度的细胞重悬于细胞培养液中；将所述细胞培养液与氟化油注入液滴生成芯片中进行流聚焦后生成液滴。3.根据权利要求1所述的图像激发超微注射方法，其特征在于，所述将所述液滴注入微流控芯片并使所述液滴在所述微流控芯片的通道中逐个通过，包括：将所述液滴注入所述微流控芯片中；将间隔油注入微流控芯片中并与所述液滴交汇，通过所述间隔油使所述液滴在所述微流控芯片的通道中逐个间隔通过。4.根据权利要求1所述的图像激发超微注射方法，其特征在于，所述对逐个经过图像捕获区域的所述液滴进行图像识别处理，输出当前所述液滴为目标液滴的置信度，包括：获取逐个经过所述图像捕获区域的当前所述液滴的图像；对所述图像进行二值化处理得到二值化图像；对所述二值化图像中的液滴位置进行填充并计算填充位置中的连通域的面积；若存在单个所述连通域的面积大于或等于预设面积，则判定所述液滴为真实液滴，若不存在单个所述连通域大于或等于所述预设面积，则判定所述液滴为噪声。5.根据权利要求4所述的图像激发超微注射方法，其特征在于，所述对逐个经过图像捕获区域的所述液滴进行图像识别处理，输出当前所述液滴为目标液滴的置信度，还包括：对当前所述液滴的所述二值化图像进行边缘提取，得到轮廓图；计算所述轮廓图内的连通域的面积；将面积处在预设像素点范围内的连通域判定为细胞；多次对比所述轮廓图内的细胞数量和所述目标液滴中设定的细胞数量，输出当前所述液滴为所述目标液滴的置信度。6.根据权利要求5所述的图像激发超微注射方法，其特征在于，所述多次对比所述轮廓图内的细胞数量和所述目标液滴中设定的细胞数量，输出当前所述液滴为所述目标液滴的置信度，包括：多次识别所述轮廓图...

【专利技术属性】
技术研发人员：李自达，赵展陶，
申请(专利权)人：深圳大学，
类型：发明
国别省市：