SOAT1蛋白靶向抑制剂及应用制造技术

本发明专利技术公开了SOAT1蛋白靶向抑制剂及应用，属于医药技术领域。所述抑制剂包括包括化合物A或/和化合物B，包括化合物A或/和化合物B，所述的SOAT1蛋白靶向抑制剂在制备预防和治疗肝癌药物中的应用。本发明专利技术发现化合物A和化合物B对SOAT1蛋白高表达的Hep3B和PLC/PRF/5肝癌细胞活力的抑制作用显著。此外，这两个化合物还能抑制肝癌细胞迁移及克隆形成，并降低肝癌细胞中SOAT1蛋白表达。在SOAT1沉默的肝癌细胞中，两个化合物对肝癌细胞活力的抑制作用均显著减弱。因此，化合物A和化合物B在细胞水平上能通过抑制SOAT1蛋白表达发挥抗肝癌作用，可应用于制备预防和治疗肝癌药物中。可应用于制备预防和治疗肝癌药物中。可应用于制备预防和治疗肝癌药物中。

【技术实现步骤摘要】
SOAT1蛋白靶向抑制剂及应用


[0001]本专利技术属于医药
，具体涉及SOAT1蛋白靶向抑制剂及应用。

技术介绍

[0002]肝癌是一种高发的，危害极大的疾病，全球每年新增确诊病例约90万。我国是肝癌大国，每年新发病例约40万。肝癌的常见治疗方案包括手术切除、肝移植、射频消融、化疗和靶向药物治疗等。手术或射频消融疗法适用于早期原位癌患者，然而大部分病人在疾病中晚期才被确诊，因此不适合手术或射频消融治疗。中、晚期肝癌治疗的原则是以化疗、靶向治疗等为主的综合治疗，但肝癌对于化疗的敏感性并不高，目前常用靶向药物包括仑伐替尼和索拉非尼等，但毒副作用和耐药性的发生限制了现有靶向药物的应用，亟需开发新型靶向药物治疗肝癌。
[0003]甾醇O
‑
酰基转移酶1(SOAT1)蛋白已被证明是肝癌特异性表达分子，肝癌组织中SOAT1蛋白的含量明显高于正常组织，是潜在的肝癌治疗新靶点。抑制SOAT1蛋白表达能有效抑制癌细胞的增殖和迁移能力，从而发挥抗肝癌作用，但目前针对该靶点的抑制剂研发尚不成熟。近年来，天然产物及其衍生物在抗肿瘤药物的开发中发挥着越来越重要的作用。为找到可能靶向到SOAT1蛋白的苗头化合物，本专利技术采用基于蛋白结构的虚拟筛选与体外实验验证相结合的研究策略，从天然产物中找到两个有显著抗肝癌效果的化合物，以期为新型SOAT1蛋白抑制剂的开发提供先导化合物。

技术实现思路

[0004]本专利技术的目的在于克服现有技术的缺点，提供涉及SOAT1蛋白靶向抑制剂及应用。
[0005]本专利技术的目的通过以下技术方案来实现：SOAT1蛋白靶向抑制剂，所述抑制剂包括化合物A或/和化合物B，化合物A的结构式为：
[0006][0007]化合物B的结构式为：
[0008][0009]上述的SOAT1蛋白靶向抑制剂在制备预防和治疗肝癌药物中的应用。
[0010]上述的SOAT1蛋白靶向抑制剂在抑制肝癌细胞活力中的应用。
[0011]上述的SOAT1蛋白靶向抑制剂在抑制肝癌细胞迁移和克隆中的应用。
[0012]进一步地，所述的肝癌细胞为Hep3B或PLC/PRF/5。
[0013]进一步地，化合物A对肝癌细胞Hep3B和PLC/PRF/5的IC
50
分别为2.633
±
0.445μM，8.605
±
0.579μM；
[0014]化合物B对肝癌细胞Hep3B和PLC/PRF/5的IC
50
分别为4.246
±
0.594μM，6.245
±
0.613μM。
[0015]本专利技术具有以下优点：本专利技术发现化合物A和化合物B对SOAT1蛋白高表达的Hep3B和PLC/PRF/5肝癌细胞活力的抑制作用显著。此外，这两个化合物还能抑制肝癌细胞迁移及克隆形成，并降低肝癌细胞中SOAT1蛋白表达。在SOAT1沉默的肝癌细胞中，两个化合物对肝癌细胞活力的抑制作用均显著减弱。因此，化合物A和化合物B在细胞水平上能通过抑制SOAT1蛋白表达发挥抗肝癌作用，可应用于制备预防和治疗肝癌药物中。
附图说明
[0016]图1为SOAT1三维结构及空腔及Docking box的示意图，其中，A
‑
SOAT1三维结构及空腔；B
‑
Docking box展示；边框为Docking box，框中标记为6L47结构中的CI
‑
976。
[0017]图2为化合物A和化合物B的化学结构及与SOAT1蛋白的相互作用图，其中，A
‑
化合物A的化学结构式；B
‑
化合物B的化学结构式；C
‑
SOAT1蛋白与化合物A的相互作用图；D
‑
SOAT1蛋白与化合物B的相互作用图。
[0018]图3为化合物A和化合物B对细胞迁移的影响(n＝3)，其中，化合物A对A
‑
Hep3B和C
‑
PLC/PRF/5细胞迁移的影响；化合物B对B
‑
Hep3B和D
‑
PLC/PRF/5细胞迁移的影响；左侧为代表性图片，右侧为定量结果；*P<0.05与对照组相比。
[0019]图4为化合物A和化合物B对细胞克隆形成的影响(n＝3)，A
‑
化合物A和B
‑
化合物B对Hep3B和C
‑
PLC/PRF/5细胞克隆形成的影响；左侧为代表性图片，右侧为定量结果；*P<0.05与对照组相比。
[0020]图5为化合物A和化合物B对SOAT1蛋白水平的影响(n＝3)，A
‑
化合物A及B
‑
化合物B对Hep3B和PLC/PRF/5细胞SOAT1蛋白水平的影响；上侧为代表性印迹，下侧为定量结果；*P<0.05与对照组相比。CI
‑
976为阳性对照，在Hep3B中浓度为20μM，在PLC/PRF/5中浓度为60μM。
[0021]图6为化合物A和化合物B对细胞活力的影响(n＝3)，A
‑
转染NC或SOAT1 siRNA后PLC/PRF/5细胞中SOAT1蛋白的表；左侧为代表性图片，右侧为定量结果；B
‑
化合物A和化合物B对SOAT1沉默的PLC/PRF/5细胞活力的影响；*P<0.05。
具体实施方式
[0022]下面结合附图及实施例对本专利技术做进一步的描述，本专利技术的保护范围不局限于以下所述：
[0023]1材料和方法
[0024]1.1细胞
[0025]人肝癌细胞株Hep3B和PLC/PRF/5购于ATCC细胞库。
[0026]1.2试剂与仪器
[0027]化合物A(货号：STOCK1N
‑
11730)，化合物B(货号：STOCK1N
‑
98880)纯度≥98％)购于Interbioscreen；RPMI1640培养基(货号：11875101)、MEM培养基(货号：41500034)、胎牛血清(货号：10099141C)均购于Gibco公司；SOAT1抗体(货号：DF7778)购于Affinity；GAPDH抗体(货号：ab181602)购于Abcam；Lipofectamine 2000转染试剂购于ThermoFisher；SOAT1 siRNA2条SOAT1特异性siRNA均由北京擎科生物科技有限公司合成，靶序列为：CUCUUCAUGUUCUUUGGAA。酶标仪(BioRad iMark)，凝胶成像仪(Bio
‑
Rad Gel Doc XR+)。
[0028]1.3方法
[0029]1.3.1分子对接
[0030]从蛋白质数据库(Protein Data Bank，PDB)中下载SOA本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.SOAT1蛋白靶向抑制剂，其特征在于，所述抑制剂包括化合物A或/和化合物B，化合物A的结构式为：化合物B的结构式为：2.如权利要求1所述的SOAT1蛋白靶向抑制剂在制备预防和治疗肝癌药物中的应用。3.如权利要求1所述的SOAT1蛋白靶向抑制剂在抑制肝癌细胞活力中的应用。4.如权利要求1所述的SOAT1蛋白靶向抑制剂在抑制肝癌细胞迁移和克隆中的应用。5.根据权利要求3或4所述的应用，其特征在于，所述的肝癌细胞为Hep3B或PLC/PRF/5。6.根据...

【专利技术属性】
技术研发人员：刘雨溪，张红，李晔，刘洋，陈志永，
申请(专利权)人：陕西省中医药研究院，
类型：发明
国别省市：