【技术实现步骤摘要】
一种同时检测血浆中沙利度胺、来那度胺和泊马度胺的方法
[0001]本专利技术属于血液定量检测
，具体涉及一种同时检测血浆中沙利度胺、来那度胺和泊马度胺方法及应用。
技术介绍
[0002]多发性骨髓瘤(multiple myeloma,MM)是一种浆细胞恶性克隆性增殖疾病，主要病理特征为骨髓浆细胞异常增生，同时还伴有单克隆浆细胞免疫球蛋白或者轻链的过度生成，患者可出现溶骨性损害、高钙血症、贫血、肾功能损害(马成成,柴晔,王鑫等.化疗后免疫状态的改变对初诊多发性骨髓瘤患者的预后价值[J].中国实验血液学杂志,2019,27(6):1869
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1875.)。据统计，2018年全球有18078957例新发癌症病人，同时有9555027人死于癌性疾病。其中死于MM的有106105人，位居癌症死亡原因的第18位。(王得印,郝云良,肖萌等.多发性骨髓瘤流行病学及病因分析[J].国际流行病学传染病学杂志,2018,45(4):277
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280.)。目前，临床上治疗多发性骨髓瘤的主要手段之一是采用免疫...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
1.一种同时检测血浆中沙利度胺、来那度胺和泊马度胺的方法，其特征在于，包括如下步骤：A、血浆预处理精密吸取待测血浆置于离心管中，涡旋混匀后1710
×
g离心8～10min，取上清液，加入体积为血浆体积1/10的内标溶液；B、检测采用超高效液相串联质谱技术进样测定，以标准曲线法计算待测血浆样本中上述三种待测化合物沙利度胺、来那度胺和泊马度胺的浓度，其中，超高效液相色谱条件如下：洗脱液：流动相A：0.1％甲酸水溶液；流动相B：乙腈溶液；柱温为35℃；采用梯度洗脱的方式进行色谱分离，洗脱条件如下表所示：时间(min)A相体积百分比B相体积百分比0.088％12％1.065％35％2.045％55％3.020％80％4.020％80％质谱条件如下：在电喷雾电离离子源下同时采用正离子模式，多重反应监测模式同时检测三种待测化合物沙利度胺、来那度胺、泊马度胺，干燥气温度为350℃，干燥气流速为10L
·
min
‑1，鞘气温度为300℃，鞘气流速为12L
·
min
‑1，喷雾器压力为45psi，毛细管电压为
±
4000V，电子倍增器为600V，各待测化合物的检测离子对、F值、CE值参数如下表所示：名称检测离子对F值CE值沙利度胺259/186.18518来那度胺260.1/149.19510泊马度胺274.1/200.810524内标263.1/190.28519。2.根据权利要求1所述的同时检测血浆中沙利度胺、来那度胺和泊马度胺的方法，其特征在于：所述待测血浆为多发性骨髓瘤患者服用沙利度胺、来那度胺或泊马度胺后30
‑
300分钟内抽取的血浆。3.根据权利要求1所述的同时检测血浆中沙利度胺、来那度胺和泊马度胺的方法，其特征在于：所述内标溶液为含有沙利度胺
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d4的甲醇溶液，浓度为1.00μg
·
mL
‑1。4.根据权利要求1所述的同时检测血浆中沙利度胺、来那度胺和泊马度胺的方法，其特征在于：步骤B中，超高效液相色谱选用的色谱柱为ZORBAX SB
‑
C18柱，尺寸为2.1
×
100mm,3.5μm；洗脱液流速为0.3mL
·
min
‑1，柱温为35℃，进样体积为5μL。5.根据权利要求1所述的同时检测血浆中沙利度胺、来那度胺和泊马度胺的方法，其特征在于：以标准曲线法计算待测血浆样本中沙利度胺、来那度胺和泊马度胺的浓度的方法
如下：将血浆样本检测所得的积分面积与内标峰积分面积的比值带入校正曲线，计算待测血浆样本中上述三种待测化合物沙利度胺、来那度胺和泊马度胺的浓度。6.根据权利要求5所述的同时检测血浆中沙利度胺、来那度胺和泊马度胺的方法，其特征在于：所述校正曲线的构建方法如下：校正曲线的建立包含7个浓度点，分别为：S7、S6、S5、S4、S3、S2、S1；精密吸取200体积，沙利度胺、来那度胺、泊马度胺浓度均为100μg
·
mL
‑1的混合对照品液，加入800体积稀释液1，涡旋混匀，得校正曲线最高浓度点标添样本S7；取750体积S7，加入250体积稀释液1，涡旋混匀后得标添样本S6；取600体积S6，加入300体积稀释液1，涡旋混匀后得标添样本S5；取500体积S5，加入500体积稀释液1，涡旋混匀后得标添样本S4；取200体积S4，加入800体积稀释液1，涡旋混匀后得标添样本S3；取500体积S3，加入500体积稀释液1，涡旋混匀后得标添样本S2；取400体积S2，加入600体积稀释液1，涡旋混匀后得标添样本...
【专利技术属性】
技术研发人员：王志鹏，高守红，王彬，陶霞，陈万生，恽芸蕾，伊佳，
申请(专利权)人：上海长征医院，
类型：发明
国别省市：
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