一种生物组织样品成像方法技术

本发明专利技术涉及一种生物组织样品成像方法，所述方法包括：(1)在包埋容器中放入磁性材料片材、凝胶前体溶液和生物组织样品，然后形成凝胶，得到凝胶体，其中包埋有生物组织样品和所述具有铁磁性的多孔片材；(2)将所述凝胶体固定于成像显微镜的样品架的磁性底座上进行成像。像。

【技术实现步骤摘要】
一种生物组织样品成像方法


[0001]本专利技术涉及生物组织样品成像方法
，具体涉及一种包括凝胶包埋步骤的生物组织样品成像方法。

技术介绍

[0002]对生物组织进行高分辨率三维荧光成像是获取生物组织的三维结构，以及在亚细胞、细胞、和组织尺度上研究基因表达、细胞形态、和细胞分布等生物问题的有效手段。
[0003]生物组织透明化技术使生物组织变得透明，从而克服了使用荧光显微镜对生物组织进行高分辨率三维成像的主要障碍，使光片显微镜技术等前沿的三维荧光显微镜成像技术可以被用于高效的获取各种生物组织的细胞级和亚细胞级三维结构信息，从而帮助科研人员更好的了解生物组织、器官的结构和功能。由于这一显著优点，生物组织透明化技术很快的被应用于生命科学研究的各个领域。
[0004]在各种生物组织透明化技术中，例如CUBIC的亲水型透明化方法具有高生物安全性，高内源荧光蛋白保留率，兼容免疫染色，和适合高分辨率成像等优点，因而获得了更多的关注。
[0005]生物组织样品在使用亲水型透明化处理后，组织中的大多数脂质分子被去除，因此生物组织的机械强度变低，生物组织变的柔软，易变形或者破碎，使得生物组织样品的在后续的成像过程中很难保持生物组织的完整性，为使用光学显微镜对透明化处理后的生物组织进行三维成像造成极大的困难。

技术实现思路

[0006]本专利技术人在实践中发现，通过使用琼脂糖等材料对经过透明化处理的生物组织样品进行凝胶包埋可以在一定程度上保护生物组织样品，并解决转移不便的问题。然而，琼脂糖等材料形成的凝胶在移动过程中容易开裂破碎。此外，凝胶包埋的生物样品在成像显微镜的样品架上不易固定，且不容易调整样品位置，从而不便于得到高质量的成像。
[0007]为了解决上述问题，本专利技术提供一种生物组织样品成像方法，其包括：
[0008]1.在包埋容器中放入磁性材料片材、凝胶前体溶液和生物组织样品，然后形成凝胶，得到凝胶体，其中包埋有生物组织样品和所述具有铁磁性的多孔片材；
[0009]2.将所述凝胶体固定于成像显微镜的样品架的磁性底座上进行成像。
[0010]所述生物组织可以是选自脑、脊髓等的生物组织
[0011]所述生物组织样品可以是上述组织的整体或其一部分。
[0012]所述生物可以是选自生物研究模式动物中的一种或多种。所述生物研究模式动物例如可以为线虫、斑马鱼、涡虫、果蝇、爪蟾、蝾螈、小鼠、兔、猪、猴等。
[0013]或者，所述生物可以是脊椎动物，包括哺乳动物、爬行动物、鸟等。所述哺乳动物例如可以是人、鼠、兔、猪、猴等。
[0014]所述磁性材料片材指的是由磁性材料形成的片材。所述磁性材料可以选自硬磁材
料或软磁材料，例如铁磁性材料、铁氧体材料、稀土永磁材料等。
[0015]所述片材可以选自硬质片材、柔性片材、多孔片材和非多孔片材。
[0016]在一些实施方式中，所述生物组织样品为采用亲水型或水凝胶型透明化方法进行透明化处理后的生物组织样品。
[0017]所述凝胶前体溶液为以质量百分浓度计，1.5％至3％，优选1.8％至2.5％，特别是约2％的琼脂糖在折射率匹配溶液中的溶液。
[0018]在一些实施方式中，所得凝胶体中，所述具有磁性材料片材处于下部，以及所述生物组织样品位于所述磁性材料片材上方。
具体实施方式
[0019]为使本领域技术人员更好的理解本公开的技术方案，下面结合具体实施方式对本公开作详细说明。下面结合具体实施例对本公开的实施例作进一步详细描述，但不作为对本公开的限定。
[0020]本公开中使用的“第一”、“第二”以及类似的词语并不表示任何顺序、数量或者重要性，而只是用来区分不同的部分。“包括”或者“包含”等类似的词语意指在该词前的要素涵盖在该词后列举的要素，并不排除也涵盖其他要素的可能。“上”、“下”、“左”、“右”等仅用于表示相对位置关系，当被描述对象的绝对位置改变后，则该相对位置关系也可能相应地改变。
[0021]在本公开中，当描述到特定器件位于第一器件和第二器件之间时，在该特定器件与第一器件或第二器件之间可以存在居间器件，也可以不存在居间器件。当描述到特定器件连接其它器件时，该特定器件可以与所述其它器件直接连接而不具有居间器件，也可以不与所述其它器件直接连接而具有居间器件。
[0022]本公开使用的所有术语(包括技术术语或者科学术语)与本公开所属领域的普通技术人员理解的含义相同，除非另外特别定义。还应当理解，在诸如通用字典中定义的术语应当被解释为具有与它们在相关技术的上下文中的含义相一致的含义，而不应用理想化或极度形式化的意义来解释，除非这里明确地这样定义。
[0023]对于相关领域普通技术人员已知的技术、方法和设备可能不作详细讨论，但在适当情况下，所述技术、方法和设备应当被视为说明书的一部分。
[0024]本专利技术提供一种生物组织样品成像方法，其包括：
[0025]1.在包埋容器中放入磁性材料片材、凝胶前体溶液和生物组织样品，然后形成凝胶，得到凝胶体，其中包埋有生物组织样品和所述具有铁磁性的片材；
[0026]2.将所述凝胶体固定于成像显微镜的样品架的磁性底座上进行成像。
[0027]在根据本专利技术的方法中，所述生物组织没有特别限制，其可以是来自动物的任何组织，例如脑、脊髓等。
[0028]所述生物组织样品可以是上述组织的整体或其一部分。
[0029]所述动物可以是选自生物研究模式动物中的一种或多种。所述生物研究模式动物例如可以为线虫、斑马鱼、涡虫、果蝇、爪蟾、蝾螈、小鼠、兔、猪、猴等。
[0030]或者，所述生物可以是脊椎动物，包括哺乳动物、爬行动物、鸟等。所述哺乳动物例如可以是人、鼠、兔、猪、猴等。
[0031]在上述步骤1中，所述包埋容器没有特别限制，本领域技术人员可以根据所要成像的生物组织样品的尺寸、形状等选用适合的现有容器或模具，或者设计并制作适合的容器或模具。
[0032]所述磁性材料片材指的是由磁性材料形成的片材。所述磁性材料没有特别限制，只要其是能够被永磁性材料(例如磁铁)或者电磁铁等吸附的材料即可。例如，其可以为硬磁材料或软磁材料，例如铁磁性材料、铁氧体材料、稀土永磁材料等，例如铁、钴、镍、钆、铁碳合金、铁镍合金、铁钴镍合金、铁钴合金、铁铝合金、铁硅合金、铁硅铝合金、铁镍锰合金、铁与稀土元素的合金材料，或铁氧体材料等。此外，所述片材可以是完全由磁性材料形成的片材，例如铁片、硅钢片、镍片等，也可以是由非磁性材料和磁性材料共同形成的片材，例如在非磁性材料片材的表面包覆磁性材料形成的片材或者在磁性材料片材的表面包覆非磁性材料形成的片材，但是不限于此。此外，所述片材可以是硬质片材，也可以是柔性片材，可以是多孔片材或非多孔片材，但是不限于此。
[0033]通过在凝胶体形成过程中加入磁性材料片材，更加便于移动凝胶体并减少凝胶体在移动过程中的开裂破碎的发生。
[0034]所述凝胶前本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种生物组织样品成像方法，其包括：(1)在包埋容器中放入磁性材料片材、凝胶前体溶液和生物组织样品，然后形成凝胶，得到凝胶体，其中包埋有生物组织样品和所述具有铁磁性的多孔片材；(2)将所述凝胶体固定于成像显微镜的样品架的磁性底座上进行成像。2.根据权利要求1所述的方法，其中，所述生物组织是选自脑、脊髓的生物组织。3.根据权利要求1所述的方法，其中，所述生物组织样品是生物组织的整体或其一部分。4.根据权利要求1所述的方法，其中，所述生物是选自生物研究模式动物中的一种或多种。5.根据权利要求1所述的方法，其中，所述生物是脊椎动物，包括哺乳动物、爬行动物、鸟；特别地，所述哺乳动物是人、鼠、兔、猪、猴。6....

【专利技术属性】
技术研发人员：高亮，冯瑞丽，陈燕璐，
申请(专利权)人：西湖大学，
类型：发明
国别省市：