【技术实现步骤摘要】
一种线虫试剂盒及其使用方法
[0001]本专利技术涉及生物检测
,具体涉及一种线虫试剂盒及其使用方法。
技术介绍
[0002]随着人民生活质量的提高以及科技的发展,人们对寿命有着更大的期许。因此,从动植物中寻找天然活性成分延缓衰老成为当前的研究热点。构建衰老动物模型,使实验动物呈现与人类相似的衰老表型,是研究人类衰老机制和研发抗衰老活性成分的重要手段。
[0003]目前广泛应用的衰老动物模型,涵盖无脊椎动物、鱼类、啮齿动物和非人灵长类等。其中,秀丽隐杆线虫作为研究衰老的关键模式生物,有着得天独厚的优势:一、培养时间短、繁殖迅速,平均生命周期为2
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3周,为实验研究节约大量时间;二、作为一种真核生物,与高等的生物体有一些相同或相似的细胞和分子结构以及细胞信号控制通路,且基因测序已全部完成,基因组完整,从中所获得的生物学信息或可推广应用至更加复杂的生物体(包括人类);三、线虫结构简单,通体透明,观察方便,譬如采用普通的光学显微镜即可完成对其头部摆动、身体弯曲频率等运动行为。因此,随着对秀丽隐杆线虫 ...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
1.一种线虫试剂盒,其特征在于,包括:96孔板、试剂A和试剂B;所述96孔板中的每个孔含有LB
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胆固醇培养基和秀丽隐杆线虫幼虫;所述秀丽隐杆线虫幼虫为经同步化后饥饿状态的dauer期线虫;所述试剂A为大肠杆菌OP50;所述试剂B为5
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氟脲嘧啶。2.如权利要求1所述的线虫试剂盒,其特征在于,经同步化后饥饿状态的dauer期线虫的制备包括以下步骤:使用M9缓冲溶液将正处于产卵期的雌雄同体的秀丽隐杆线虫从NGM培养基平板上多次冲洗下至50mL离心管中,静止数分钟,待线虫下沉至管底,弃去上清;将线虫液定容至30mL于50mL离心管内,按照线虫液和裂解液2:1的比例,向管中加入裂解液15mL,上下颠倒混合,反应5min后,9000rpm离心3min,弃去上清,收集沉淀;沉淀使用M9缓冲液进行上下混匀,以9000rpm离心3min,重复3次,获得含有虫卵的溶液;将含有虫卵的溶液于25℃的生化培养箱内培养12h,再将培养后的沉淀转到新的培养基平板中培养,不需要添加大肠杆菌OP50,20℃培养12h孵化幼虫L1期;虫卵孵化后不再提供食物,3~4天后线虫进入到饥饿状态,...
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