Rbm24在长QT间期综合征的诊断和治疗中的用途制造技术

本发明专利技术公开了Rbm24在长QT间期综合征的诊断和治疗中的用途。具体地，本发明专利技术涉及上调Rbm24或抑制其下游因子CamkⅡδ的可变剪切体δ

【技术实现步骤摘要】
Rbm24在长QT间期综合征的诊断和治疗中的用途


[0001]本专利技术属于生物标志物领域，具体地，本专利技术涉及上调Rbm24或抑制其下游因子CamkⅡδ的可变剪切体δ
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C的试剂在长QT间期综合征(LQT)的诊断和治疗中的用途。

技术介绍

[0002]长QT间期综合征(LQT)是一种以QT延长和心电图t波异常为特征的心脏电生理障碍疾病，患者易发生尖端扭转性室速、室颤和心源性猝死。先天性长QT间期综合征是一种遗传性心脏离子通道病，而获得性长QT间期综合征由外在因素，通常是药物或电解质异常导致离子通道功能的改变而引起，其是儿童和青少年心脏结构正常发生心源性晕厥和猝死的重要原因之一。
[0003]获得性LQTS通常不需要长期治疗，去除引起QT间期延长的原因后，QT间期多可恢复正常。遗传性LQTS患者必须进行长期预防性的治疗以降低猝死的风险，主要的治疗手段是受体阻滞剂。由于遗传性LQTS的治疗和预后有着鲜明的基因特异性，基因学结果指导下的个体化治疗策略将在很大程度上提高LQTS患者及其家族成员的治疗效果。因此，积极寻找LQT发生发展的相关机制，明确LQT的致病基因，为临床诊断提供评价，筛选合适的治疗靶点，是当前国民健康和医疗保障领域极为迫切的需求。

技术实现思路

[0004]本专利技术提供了用于诊断长QT间期综合征的标志物Rbm24及其用途。本专利技术人构建了Rbm24心脏特异性敲除小鼠模型，发现与野生型小鼠相比，Rbm24基因敲除小鼠出现了QT间期延长现象。这提示Rbm24可以作为QT间期延长综合症的生物标志物。进一步通过高通量测序分析，本专利技术人找到了钙/钙调蛋白依赖性蛋白激酶II Delta(CamkⅡδ)，其可以调节L型钙离子通道对钙离子的通透作用，并发现在Rbm24敲除小鼠心脏中，CamkⅡδ的可变剪切形式发生了变化，Rbm24敲除导致δ
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C增多，使用CamkⅡδ的抑制剂KN
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93处理小鼠，发现其可逆转小鼠QT间期延长的现象。因此，Rbm24及其下游因子CamkⅡδ有可能作为治疗QT间期延长综合症的靶点。
[0005]在一个方面，本专利技术提供了Rbm24在长QT间期综合征中作为生物标记物的用途。
[0006]在一个具体实施方案中，本专利技术提供了测定Rbm24水平的物质在制备用于诊断长QT间期综合征的产品中的用途。具体地，其中所述检测Rbm24表达水平的试剂包括检测Rbm24基因mRNA表达水平的试剂，和/或检测Rbm24蛋白表达水平的试剂。在一个具体实施方案中，所述检测Rbm24基因mRNA表达水平的试剂包括实时定量PCR中使用的引物，和/或探针。在一个具体实施方案中，其中所述检测Rbm24蛋白表达水平的试剂包括针对Rbm24蛋白的抗体。在一个具体实施方案中，所述用于诊断长QT间期综合征的产品包括试剂盒、芯片或试纸。
[0007]在第二个方面，本专利技术提供了基于Rbm24及其下游因子CamkⅡδ在预防和治疗长QT间期综合征中作为药物靶点的用途。在一个具体实施方案中，本专利技术提供了增加Rbm24表达
的试剂或者抑制CamkⅡδ可变剪切体δ
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C的试剂在制备用于治疗长QT间期综合征的药物中的用途，在一个具体实施方案中，所述试剂选自δ
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C的抑制剂、siRNA或RNA干扰载体。
[0008]本文中的“样品”是从对象处分离出的生物样品，其可以包括：例如，但不限于，全血、血清、血浆、血细胞、内皮细胞、组织活检、淋巴液、腹水、间质液(也称为“细胞外液”，包括在细胞间隙中发现的液体)、骨髓、脑脊液(CSF)、唾液、粘液、痰液、汗液、尿液或任何其它分泌物、排泄物或其它体液。
[0009]本专利技术文中的“受试者”优选哺乳动物。哺乳动物可以是人、非人的灵长类动物、小鼠、大鼠、狗、猫、马或牛，但不限于这些实例。非人的哺乳动物可以有利地用作代表长QT间期综合征动物模型的受试者。受试者还可以是之前未被诊断或鉴定为患有长QT间期综合征者。例如，受试者可以是表现出一种或多种长QT间期综合征风险因素者，或未表现出长QT间期综合征风险因素的受试者或无长QT间期综合征症状的受试者。受试者还可以是患有长QT间期综合征或具有发展长QT间期综合征风险者。
[0010]可以测量测试样品中Rbm24蛋白、肽、核酸、多态性、代谢物或其它分析物的量并与正常对照水平进行比较。由本专利技术的方法测量的Rbm24的水平或量(可以是“有效量”)的差异可以包括与正常对照水平、参考值、指标值或基准值相比Rbm24水平或量的升高或降低。相对于参考值，Rbm24量的升高或降低可以表明长QT间期综合征的进展；长QT间期综合征的延缓、进展、发展或减轻；发展长QT间期综合征或其相关并发症风险的升高或降低。升高或降低可以指示一种或多种长QT间期综合征治疗方案的成功；或可以指示长QT间期综合征风险因素的改善或消退。升高或降低可以为，例如，参考值或正常对照水平的至少5％、至少10％、至少15％、至少20％、至少25％、至少30％、至少35％、至少40％、至少45％或至少50％。
[0011]可以使用本领域内已知的任何方法在RNA水平上测量Rbm24的基因表达。例如，使用特异地识别一种或多种这些序列的探针的Northern杂交分析可用于测定基因表达。作为另外一种选择，可以使用逆转录PCR测定法(RT
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PCR)测量表达，例如，使用对差异表达序列特异的引物。还可以使用，例如，其它靶扩增法(例如，TMA、SDA、NASBA)或信号扩增法(例如，bDNA)等来定量RNA。优选地，通过实时PCR检测本专利技术生物标志物的表达水平，如还描述在PCT/US02/38806(以WO03/048377公开；Therianos等人，(2004)Am.J.Pathol.164(3)：795
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806，它们的内容以引用方式并入本文)。
[0012]作为另外一种选择，可以测量Rbm24蛋白和核酸的代谢物或片段。可以用本领域的技术人员所已知的多种方法检测代谢物，包括：折射率光谱(RI)、紫外光谱法(UV)、荧光分析、放射化学分析、近红外光谱(near
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IR)、核磁共振光谱(NMR)、光散射分析(LS)、质谱、热解质谱法、比浊法、色散型拉曼光谱(dispersive Raman spectroscopy)、气相色谱
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质谱联用、液相色谱
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质谱联用、基质辅助激光解析电离飞行时间质谱(MALDI
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TOF)、表面加强激光解析电离化(SELDI)质谱、结合质谱的离子喷射光谱、毛细血管电泳、NMR和IR检测。(参见，WO 04/056456和WO04/088309，它们的整体以引用方式并入)。在这点上，可以使用上述检测方法或技术人员已知的其它方法测量其它Rbm24分析物。
附图说明
[0013]图1：Rbm24条件敲除小鼠的构建示意图。
[0014]图2：qPCR检测RB本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.检测Rbm24表达水平的试剂在制备用于诊断长QT间期综合征的产品中的用途。2.根据权利要求1所述的用途，其中所述检测Rbm24表达水平的试剂包括检测Rbm24基因mRNA表达水平的试剂，和/或检测Rbm24蛋白表达水平的试剂。3.根据权利要求2所述的用途，其中所述检测Rbm24基因mRNA表达水平的试剂包括实时定量PCR中使用的引物，和/或探针。4.根据权利要求2所述的用途，其中所述检测Rbm24蛋白表达水平的试剂包括针对Rbm24蛋白的抗体。5.根...

【专利技术属性】
技术研发人员：徐秀琴，刘靖，王珂，
申请(专利权)人：厦门大学，
类型：发明
国别省市：