对使用侦察MRM的方法或系统的简化技术方案

在喷射时间处并根据样品顺序喷射一系列样品中的每个样品。对该系列中的每个喷射的样品进行电离，从而产生离子束。接收MRM转变的不同集合的列表。列表中的每个集合对应于不同的样品。从列表中选择一个或多个不同集合的组。最初，为该组选择的每个集合对应于该系列的第一个样品或前几个样品中的不同样品。指示质谱仪对离子束执行该组的每个集合中的每个转变，直到检测到该组的集合中的转变，在此之后，使用检测到的转变的集合和样品顺序从列表中选择要监测的一个或多个接下来的集合。择要监测的一个或多个接下来的集合。择要监测的一个或多个接下来的集合。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】对使用侦察MRM的方法或系统的简化
[0001]相关美国申请
[0002]本申请要求于2020年5月22日提交的美国临时申请No.63/029,226的优先权的权益，其全部内容通过引用并入本文。


[0003]本文的教导涉及操作进样系统和质谱仪以使用多反应监测(MRM)转变对一系列样品进行质量分析。更具体地，提供了用于基于检测到的转变和喷射样品的顺序来选择在高通量进样耦合质谱实验中要监测的接下来的MRM转变的系统和方法。

技术介绍

[0004]采样时间问题
[0005]如下所述，声学液滴喷射(ADE)设备可以用于将样品快速地传递至开放端口接口(OPI)，该OPI继而将分析物通过传输管传输至质谱仪，在该质谱仪处分析物被分析。这种样品分析的方法被称为声学喷射质谱(AEMS)。在AEMS中，存在从发生声学喷射时到检测来自分析物的信号时之间的延迟(若干秒)。分析物从声学喷射行进至质谱仪的入口所花费的时间长度也存在变化。
[0006]当在AEMS中以高速喷射率(每秒1个样品)使用OPI时，有多个样品在传输管内行进。在识别哪个检测的信号属于哪个样品时，检测到最初第一个样品是非常重要的。如果第一个样品的信号丢失或被错误识别，则存在来自第二个样品的信号被识别为来自第一个样品的信号的风险，并且那么之后对样品的所有分析都是不正确的。
[0007]为什么第一个样品可能未被检测到的原因可以包括但不限于用户未将分析物添加到孔(well)中，ADE设备发射了但由于静电荷、不对称的样品表面弯月面或未对齐、或样品孔包含阻止液滴正确喷射的空气泡的原因而液滴未进入OPI。尽管从样品中丢失信号的发生可能是少见的，但其发生的后果是严重的(例如，不正确的数据)。
[0008]AEMS对获取数据提出了一些独特的挑战。尽管它可以以每秒多于一个的速率将样品从不同的样品孔递送到质谱仪的检测器，但难以提前计算样品到达检测器处的确切时间。例如，样品到达检测器处的时间可能会因为ADE设备发射液滴所花费的时间长度而改变(对于每个孔找到孔的中心和找到正确的声学参数可能变化数十到数百毫秒)。如上所述，样品到达检测器的确切时间还会因为通过OPI的传输线的流中的变化而改变。
[0009]对于针对每个样品孔需要不同的检测器设置的试验，使改变这些设置的时间正确可能是具有挑战性的。例如，MRM试验需要不同的MRM转变，并且因此每个样品孔有不同的设置。排定MRM是测量每个孔的不同MRM转变的一种解决方案，但其通常需要预先计算何时应该更改MRM。增加要同时监测的MRM转变的数量也可以扩大对时间设置的容差。然而，由于AEMS产生的尖锐峰形，牺牲了停留时间，并且因此牺牲了跨强度关于时间的质量峰所获得的点的数量。
[0010]作为结果，需要额外的系统和方法来减少在AEMS实验中的任何一次处监测的MRM
转变的数量，以便增加可以跨强度关于时间的质量峰描绘的测量结果的数量。
[0011]ADE和OPI背景
[0012]样品中分析物的存在、识别、浓度和/或数量的准确确定在许多领域中是至关重要的。这种分析中使用的许多技术涉及流体样品中的物质在引入到所采用的分析装备内之前的电离。电离方法的选择将依赖于样品的性质和所使用的分析技术，并且许多电离方法是可用的。电离方法的示例包括例如电喷雾电离(ESI)、基质辅助激光解吸电离(MALDI)、解吸电喷雾电离(DESI)和激光二极管热解吸(LDTD)。质谱是一种完善的分析技术，其中样品分子被电离，并且然后通过质荷比来对所得的离子进行分类。
[0013]将质谱分析(尤其是电喷雾质谱分析)耦合到分离技术(诸如包括高性能液相色谱(HPLC)的液相色谱(LC)、毛细管电泳或毛细管电色谱)的能力意味着可以在单个过程中分离和表征复杂的混合物。HPLC系统设计中的诸如死体积的减少和泵压力的增加之类的改进使得能够实现包含更小颗粒的更小的柱、改进的分离和更快的运行时间的益处。尽管有这些改进，但样品分离所需的时间仍为约一分钟。即使不需要真正的分离，使用具有在进样之间进行一定程度清洁的传统的自动进样器将样品装载到质谱仪中的机制仍然将样品装载时间限制在每个样品大约十秒。
[0014]在改进通量性能上已有一些成功。通过使用固相萃取而不是传统色谱以去除盐分的简化样品处理可以将每个样品的预进样时间从HPLC所需的每个样品数分钟减少至十秒以下。然而，采样速度的增加是以灵敏度为代价的。此外，通过采样速度上的增加所节省的时间被在样品之间进行清洁的需要所抵消。
[0015]当前质谱仪装载过程的另一限制是样品之间残留的问题，这需要在装载每个样品之后进行清洁步骤以避免后续样品被先前样品中的余留量的分析物污染。这需要时间并向过程中添加了步骤，从而复杂化而不是简化了具有传统自动进样器系统的分析。
[0016]在用于处理复杂样品(诸如生物流体)时，当前质谱仪的其他限制是不想要的“基质效应”现象，该“基质效应”现象是由于基质成分(例如，诸如细胞基质成分之类的天然基质成分，或诸如塑料之类的某些材料中固有的污染物)的存在而产生的，并不利地影响了对感兴趣分析物的检测能力、精度和/或准确度。
[0017]已通过使用声学雾电离(AMI)解决了若干前述限制。参见Sinclair等人的(2016)Journal of Laboratory Automation(实验室自动化期刊)21(1)：19
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26和Ellson等人(加利福尼亚州圣何塞市Labcyte公司)的美国专利No.7,405,395，这两者均通过引用整体并入。不幸地，如Sinclair等人所提到的，潜在的基质效应仍然可能是有问题的。此外，对于其中需要或期望一致的液滴尺寸的应用，声学雾方法不太理想，因为由单个声学脉冲产生了具有不同尺寸的液滴。
[0018]在声学液滴喷射(ADE)中，每次喷射是单个良好控制的纳升液滴，而在AMI中，每次喷射产生一缕雾。AEMS和AMI之间的另一区别包括从声学设备到质谱仪的样品传输的类型。AEMS使用液相转移到电喷雾离子源(ESI)，而AMI使用热管将样品雾以气相转移转移到MS。
[0019]为了克服在使用AMI或ADE以将少量流体样品从单个微量滴定板孔递送到质谱仪或其他分析设备时发现的限制，开发了一种将ADE与开放端口接口(OPI)组合的系统，用于高通量质谱。在美国专利申请No.16/198,667(下文称为“'667申请”)中描述了这个系统，该申请被整体并入本文。
[0020]图1A是组合了ADE与OPI的示例性系统，如'667申请中所描述的。在图1A中，ADE设备总体被显示在11处，将液滴49朝向总体在51处显示的连续流OPI喷射并进入其采样末端53。
[0021]ADE设备11包括至少一个储液器：其中在13处显示的第一储液器和可选的第二储液器31。在一些实施例中，可以提供另外的多个储液器。每个储液器被配置为容纳具有流体表面的流体样品，例如，具有分别在17和19处指示的流体表面的第一流体样本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】1.一种用于基于检测到的多反应监测(MRM)转变和样品的顺序选择高通量进样耦合质谱实验中要监测的接下来的转变的系统，包括：进样系统，所述进样系统在喷射时间处并根据样品顺序喷射一系列样品中的每个样品，从而产生与所述系列对应的多个喷射时间，并电离所述系列中的每个喷射的样品，从而产生离子束；串联质谱仪，所述串联质谱仪接收所述离子束；以及处理器，所述处理器执行如下操作：接收一个或多个MRM前体离子到产物离子转变的不同集合的列表，其中所述列表中的每个集合对应于所述系列中的不同样品，从所述列表中选择一个或多个集合的组，其中最初为所述组选择的一个或多个集合中的每个集合对应于所述系列中的第一个样品或前几个样品中的不同样品，指示所述串联质谱仪在多个循环中的每个循环期间对所述离子束执行所述组的每个集合中的每个转变，直到检测到所述组的集合中的转变，和当检测到所述组的集合中的转变时，使用检测到的转变和样品顺序从所述列表中选择要监测的一个或多个接下来的集合。2.如权利要求1所述的系统，其中所述列表是根据所述样品顺序被排序的，其中所述列表的每个集合中的每个转变是侦察转变，所述侦察转变确定紧跟在所述列表上的每个集合之后的一个或多个集合，和其中，当检测到所述组的集合中的转变时，所述处理器通过如下操作选择所述一个或多个接下来的集合：选择所述列表中的由检测到的转变确定为紧跟在所述检测到的转变的集合之后的一个或多个集合。3.如权利要求2所述的系统，其中，如果所选择的一个或多个集合中的任何集合还不是所述组的一部分，则所述处理器还将所述所选择的一个或多个集合添加到所述组，并指示所述串联质谱仪在多个循环中的每个循环期间对所述离子束执行所述组的每个集合中的每个转变，直到检测到所述组的不同集合中的转变。4.如权利要求3所述的系统，其中，在所述处理器指示所述串联质谱仪在多个循环中的每个循环期间对所述离子束执行所述组的每个集合中的每个转变直到检测到所述组的不同集合中的转变之前，所述处理器还从所述列表上移除所述组中的在所述检测到的转变的集合之前的任何集合。5.如权利要求1所述的系统，其中所述列表是根据所述样品顺序被排序的，其中所述列表中的第一个集合和跟随在所述第一个集合之后的每第m个集合是包括标记离子的样品的标记集合，其中每个标记集合包括一个或多个侦察转变，所述一个或多个侦察转变确定所述列表上紧跟在每个标记集合之后的m个集合，其中所述处理器最初为所述组选择仅所述第一个集合，其中，当检测到所述组的集合中的转变时，所述处理器通过如下操作选择所述一个或
多个接下来的集合：选择由检测到的标记转变确定的m个集合。6.如权利要求5所述的系统，其中，所述处理器还执行如下操作：(a)从所述组中移除所有集合，(b)将由检测到的标记转变确定的m个集合添加到所述组，(c)指示所述串联质谱仪在多个循环中的每个循环期间对所述离子束执行所述组的每个集合中的每个转变，直到检测到所述组的集合中的标记转变，以及(d)重复步骤(a)
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(c)，直到所述列表中的所有集合已被添加到所述组。7.如权利要求1所述的系统，其中，当检测到所述组的集合中的转变时，所述处理器通过如下操作从所述列表中选择要监测的一个或多个接下来的集合：根据检测到的转变的集合确定对应的样品，和使用所述样品顺序确定在所述系列中的跟随在所确定的对应样品之后的多个接下来的样品，和将所述列表中的与所述多个接下来的样品对应的多个集合选择为所述一个或多个接下来的集合，以及其中，所述处理器还指示所述串联质谱仪基于对应于所述多个集合的每个集合的样品的喷射时间、根据检测到的转变的对应样品的喷射时间、检测到的转变的检测时间以及样品顺序来排定每个集合中的每个转变的执行。...

【专利技术属性】
技术研发人员：D，
申请(专利权)人：DH科技发展私人贸易有限公司，
类型：发明
国别省市：