一种多肽的断裂方法技术

本发明专利技术提供一种多肽的断裂方法，涉及多肽断裂技术领域。所述多肽的断裂方法的具体工序包括含有半胱氨酸的多肽在氰基化试剂N

【技术实现步骤摘要】
一种多肽的断裂方法


[0001]本专利技术涉及多肽断裂
，具体涉及一种多肽的断裂方法。

技术介绍

[0002]多肽从头测序是一种利用串联质谱法确定肽氨基酸序列的方法。了解蛋白质中肽的氨基酸序列对研究该蛋白的生物学功能至关重要。过去，我们主要是通过Edman降解来实现。如今，多肽测序更常用到的方法是通过串联质谱仪来进行分析。一般结合数据库搜索或从头测序两种方式。
[0003]数据库搜索相对简单，将未知的肽的质谱数据与数据库数据进行比较，寻找与已知肽相匹配的序列，挑选出匹配得分最高的对应肽即可。该方法无法用于识别新的或未知序列的肽，因为它只能与数据库中已知序列进行匹配。多肽从头测序是指在没有序列数据库的帮助下，利用串联质谱(MS/MS)获取肽的氨基酸序列的分析过程。优势在于，无论有没有理论数据库，或者是新的、未知的多肽均可对其进行序列分析。
[0004]多肽在正离子模式下质子化，质子最初位于N端或碱性残基侧链上，但由于内部裂解，它可以沿着主链移动，在不同的位点断裂，从而生成不同的片段。
[0005]有三种不同类型的主链本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种多肽的断裂方法，其特征在于，所述多肽的断裂方法包括以下步骤：(1)多肽的转化：将含有半胱氨酸的多肽在氰基化试剂作用下转化为氰基化多肽，后经过HPLC纯化后冻干，得到高纯度的氰基化肽；(2)裂解溶液的配置：采用氨水和咪唑为溶液体系，调节pH至9～10，得裂解溶液备用；(3)裂解：将上述高纯度的氰基化肽加入至裂解溶液中进行多肽断裂，并采用HPLC监测断裂过程。2.根据权利要求1所述的一种多肽的断裂方法，其特征在于：所述步骤(1)中含半胱氨酸多肽为通过固相多肽制备获得。3.根据权利要求1所述的一种多肽的断裂方法，其特征在于：所述步骤(1)中所使用的氰基化试剂为N
‑
氰
‑4‑
二甲氨基
‑
吡啶四氟硼酸盐。4.根据权利要求1所述的一种多肽的断裂方法，...

【专利技术属性】
技术研发人员：方葛敏，齐竞泽，张燕妮，万晓翠，
申请(专利权)人：安徽大学，
类型：发明
国别省市：