人参防病促生菌肥及其应用制造技术

本发明专利技术公开了枯草芽孢杆菌TJ23

【技术实现步骤摘要】
人参防病促生菌肥及其应用


[0001]本专利技术属于微生物菌肥
，具体涉及人参防病促生菌肥及其应用。

技术介绍

[0002]吉林省是我国人参主要的生产地区，全国人参总产量的4/5来源于吉林省。韩国的人参产量不足吉林省的1/3，但人参的产值却是吉林省的4倍。进入21世纪以后，我国的人参产业在对外出口贸易面临着严峻的考验，人参的品质下降，导致我国的环境面临着巨大的压力，致使病害防治变得更加不容乐观。
[0003]为解决这一难题，运用生防菌来防治人参病害引起了越来越多的关注，生防菌广泛存在于人参体内以及根际土壤之中，通过拮抗作用、竞争作用和诱导人参产生抗性来达到减少病害的目的，明确生防菌对人参锈腐病的防治作用具有一定的科学意义。
[0004]随着人们对可绿色、持续农业的不断重视以及对可持续植保观念的认识不断发展，生物防治的地位也不断的升高。为了寻求更加安全有效地人参病害防治方式，生物防治走入了人们的视线。生防菌具有安全环保、繁殖速度快以及部分生防菌还具一定的促生作用等优点，因此微生物菌剂、菌肥等的研发与利用是防治人参病害的必然趋势。
[0005]微生物菌肥是一种具有特定功能或者多种功能的新兴生物肥料制品，其核心是具有特殊功能的微生物通过其生命活动以达到在农业生产中具有改善土壤环境、提高作物产量、减少经济植物病害发生等目的。近年来，随着科研工作者对生物菌肥的研究日益增多，“生物菌肥”已变得耳熟能详。且微生物菌肥无毒副作用、投入成本低，在粮食安全、节约资源、修复土壤等方面均强于化学肥料，更符合绿色农业的发展理念。常见的菌肥有三种，微生物菌剂、生物有机肥、复合微生物菌肥。

技术实现思路

[0006]本专利技术目的是提供人参防病促生菌肥及其应用。
[0007]枯草芽孢杆菌Bacillus subtilis TJ23
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2菌株，保藏编号为CCTCC NO：M 2022750。
[0008]枯草芽孢杆菌Bacillus subtilis TJ23
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2菌株在防止人参病害方面的应用；所述的病害是由锈腐病原菌引起的。
[0009]枯草芽孢杆菌Bacillus subtilis TJ23
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2菌株在人参促生长的应用。
[0010]一种复配菌肥，它是由下述方法制备的：1）苏云金芽孢杆菌B. thuringiensis JJ5
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2菌、贝莱斯芽孢杆菌Bacillus velezensis NT35菌、甲基营养型芽孢杆菌Bacillusmethylotrophicus NJ13菌和所述的枯草芽孢杆菌Bacillus subtilis TJ23
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2菌株分别发酵，制成4种发酵培养液；2）将步骤1）制备的4种发酵培养液等体积复配，按35~45%接种量加入到载体中，混匀，在25~30℃下发酵培养7~10d，干燥，得复配菌肥；所述的载体，是小麦秸秆粉和玉米秸秆粉按体积比1：1~3混合得到的载体；
步骤1）所述的发酵，其发酵培养基为：TJ23
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2发酵培养基：葡萄糖26 g，酵母浸粉12.9 g，氯化钠11 g，硫酸锰0.3 g，蒸馏水1000 mL，pH7.0；JJ5发酵培养基：胰蛋白胨10 g，酵母浸粉5 g，氯化钠10 g，蒸馏水1000 mL，pH7.0；NT35发酵培养基：酵母浸粉25g，玉米粉15g，磷酸氢二钾15g，硫酸铵25g，蒸馏水1000mL，pH7.0；NJ13发酵培养基：葡萄糖30g，淀粉15g，酵母浸粉15g，磷酸氢二钾1g，氯化钠5g，蒸馏水1000mL，pH7.0；步骤2）所述的小麦秸秆粉和玉米秸秆粉体积比为1:3；步骤2）所述的接种量为40%；步骤2）所述的发酵培养温度为28℃；所述的复配菌肥，在人参种植时施用量为8g/m2。
[0011]本专利技术提供了枯草芽孢杆菌Bacillus subtilis TJ23
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2菌株，该菌株已于2022年05月30日在（中国典型培养物保藏中心
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武汉大学）进行保藏，其保藏编号为CCTCC NO：M 2022750。一种复配菌肥，它是由下述方法制备的：1）苏云金芽孢杆菌JJ5
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2菌、贝莱斯芽孢杆菌NT35菌、甲基营养型芽孢杆菌NJ13菌和所述的枯草芽孢杆菌TJ23
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2菌株分别发酵，制成4种发酵培养液；2）将步骤1）制备的4种发酵培养液等体积复配，按35~45%接种量加入到载体中，混匀，在25~30℃下发酵培养7~10d，干燥，得复配菌肥；所述的载体，是小麦秸秆粉和玉米秸秆粉按体积比1：1~3混合得到的载体；所述的枯草芽孢杆菌在人参防病或促生方面的应用。优点在于：通过对菌株与载体的筛选，明确了菌肥发酵工艺与菌肥配方，验证了菌肥的实际应用效果，确定了菌肥C 8 g/m2处理后可以提高土壤细菌丰富度和多样性，改变了人参正常生长的微生物组成变化规律，降低了土壤中锈腐病原菌的丰富度。
附图说明
[0012]图1 不同菌株产蛋白酶试验效果；图2 不同菌株产蛋白酶水解圈直径比较；图3 不同菌株产淀粉酶试验效果；图4 不同菌株产淀粉酶水解圈直径比较；图5 不同菌株产纤维素酶试验效果；图6 不同菌株产纤维素酶水解圈直径比较；图7 不同菌株降解效果比较；（a）木质素透明圈直径；（b）半纤维素透明圈直径；图8 人参离体接种；A：TJ23
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2；B：JJ5；C：NJ13；D：NT35；E：TJ23
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2：JJ5：NJ13：NT35=1：1：1：1；F：清水对照处理组；图9 种子萌发试验；A：TJ23
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2；B：JJ5；C：NJ13；D：NT35；E：TJ23
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2：JJ5：NJ13：NT35=1：1：1：1；F：清水对照处理组；图10 菌株TJ23
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2形态学观察；图11 菌株TJ23
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2系统进化树；图12 不同处理下人参指标统计；A.人参发病情况；B.人参防治效果；C.人参生长
情况；D.人参主根长度情况；E.人参根直径情况；F.增产率结果；图13 0.4 mg/mL人参皂苷标准品峰图；图14 不同生长期各处理组酶活力变化情况；A.蔗糖酶；B.脲酶；C.磷酸酶；D.过氧化氢酶。
具体实施方式
[0013]实施例1 菌肥供试菌株筛选一、试验材料1、供试菌株抗病菌株：NT35、NJ13、FG14、JA26、JA38、TU26；促生菌株：TJ23
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2、JJ5
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2、JI39、JI6，病原真菌人参锈腐菌由吉林农业大学生命科学学院微生物资源开发与利用研究室保存。
[0014]2、供试材料三年生的健康人参，表皮及芦头未染病；充分后熟的人参种子，芽表面无锈斑和萎蔫情况。
[0015]3、供试培养基1）LB液体培养基；LB固体培养基；马铃薯葡萄糖培养基(PDA)；2）蛋白酶初步筛选培养基:脱脂奶粉本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1. 枯草芽孢杆菌Bacillus subtilis TJ23
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2菌株，保藏编号为CCTCC M 2022750。2.枯草芽孢杆菌Bacillus subtilis TJ23
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2菌株在防止人参病害方面的应用。3.根据权利要求2所述的应用，其特征在于：所述的病害是由锈腐病原菌引起的。4.枯草芽孢杆菌Bacillus subtilis TJ23
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2菌株在人参促生长的应用。5.一种复配菌肥，它是由下述方法制备的：1）苏云金芽孢杆菌B. thuringiensis JJ5
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2菌、贝莱斯芽孢杆菌Bacillus velezensis NT35菌、甲基营养型芽孢杆菌Bacillusmethylotrophicus NJ13菌和权利要求1所述的枯草芽孢杆菌Bacillus subtilis TJ23
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2菌株分别发酵，制成4种发酵培养液；2）将步骤1）制备的4种发酵培养液等体积复配，按35~45%接种量加入到载体中，混匀，在25~30℃下发酵培养7~10d，干燥，得复配菌肥；...

【专利技术属性】
技术研发人员：姜云，陈长卿，宋宇，姜程杨，刘婷婷，王佳瑞，李想，
申请(专利权)人：吉林农业大学，
类型：发明
国别省市：