耶氏酵母属(Yarrowia)的变体和使用其制造脂肪的方法技术

本发明专利技术提供了耶氏酵母属(Yarrowia)变体菌株。更具体地，本发明专利技术提供了耶氏酵母属(Yarrowia)变体菌株，其中磷脂酰乙醇胺N

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】耶氏酵母属(Yarrowia)的变体和使用其制造脂肪的方法


[0001]本专利技术涉及用于提高脂肪含量的酵母改良及其制造方法，特别是一种失活了磷脂酰乙醇胺N
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甲基转移酶(PEMT)或磷脂甲基转移酶活性而增加了脂肪含量的耶氏酵母属(Yarrowia)的变体菌株，以及通过在含有胆碱的培养基中培养上述耶氏酵母属(Yarrowia)变体菌株来增加菌株中脂肪的方法。

技术介绍

[0002]产生游离脂肪酸、脂肪醇、脂肪酸乙酯、烷烃等脂肪酸衍生物的产油酵母在能源、化妆品、食品、饲料等各个领域受到关注，并已进行了相关的各种研究。其中，甘油三酯(TAG)是脂肪酸衍生物的前体，是一种可长期储存的脂肪形式，已被研究用于大量合成。
[0003]作为提高产油酵母中TAG含量的方法，增强TAG生物合成途径(例如，dga1
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2、slc1、acl1
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2、acl、sct1、lro1)、抑制TAG降解(例如，tgl1
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4、faa1、pxa1
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2)和抑制β
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氧化(例如pox1
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6、mfe1、pex1
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32、pot1)主要被许多研究人员使用(US2013
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0344548A1)。
[0004]近年来，已经尝试了各种策略来提高酵母中的脂肪含量，但是脂肪含量没有显着增加。因此，需要一种在防止酵母生长恶化的同时提高脂肪生产水平的替代品。
[0005]【专利技术详述】
[0006]【技术问题】
[0007]本专利技术人发现脂肪产生可以通过磷脂酰乙醇胺N
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甲基转移酶或磷脂甲基转移酶的活性被灭活的变体菌株增加，从而完成了本公开。
[0008]【技术方案】
[0009]本专利技术的一个目的是提供一种耶氏酵母属(Yarrowia)变体菌株，其中磷脂酰乙醇胺N
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甲基转移酶(PEMT)或磷脂甲基转移酶的活性被灭活。
[0010]本公开的另一个目的是提供一种化妆品组合物、食品组合物、饲料组合物或药物组合物，各自包括耶氏酵母属(Yarrowia)变体菌株、菌株的培养物、菌株的提取物、菌株的干燥产物、菌株的裂解物以及从所述菌株、培养物、提取物、干燥产物和裂解物中的至少一种回收的脂肪。
[0011]本专利技术的又一个目的是提供一种增加菌株中脂肪的方法，包括：培养耶氏酵母属(Yarrowia)变体菌株。
[0012]本专利技术的又一目的在于提供一种制造脂肪的方法，该方法包括：培养耶氏酵母属(Yarrowia)变体菌株。
[0013]本专利技术的再一个目的是提供耶氏酵母属(Yarrowia)变体菌株、菌株的培养物、菌株的提取物、菌株的干燥产物、菌株的裂解物、化妆品组合物、食品组合物、饲料组合物、药物组合物或耶氏酵母属(Yarrowia)变体菌株的培养物在脂肪生产中的用途。
[0014]【专利技术效果】
[0015]本公开的耶氏酵母属(Yarrowia)变体菌株可以通过使磷脂酰乙醇胺N
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甲基转移酶(PEMT)或磷脂甲基转移酶的活性失活来增加细胞内脂肪产生。
[0016]本公开的增加菌株中脂肪的方法和制造脂肪的方法可以有效地增加脂肪产量，同时防止菌株的生长恶化。
[0017]本公开的化妆品组合物、食品组合物、饲料组合物和药物组合物可以通过增加脂肪含量来提供改进的功能。
[0018]【用于实施专利技术的最佳形态】
[0019]下面将详细描述本公开。同时，本公开中公开的每个描述和实施例也可以应用于其他描述和实施例。也就是说，本公开中公开的各种要素的所有组合都落入本公开的范围内。此外，本公开的范围不受以下具体描述的限制。
[0020]此外，本领域技术人员将认识到或能够仅使用常规实验来确定本文描述的本公开的特定实施例的许多等效物。此外，这些等价物应被解释为落入本公开内容之内。
[0021]为实现上述目的，本专利技术的一个方面提供了一种耶氏酵母属(Yarrowia)变体菌株，其中磷脂酰乙醇胺N
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甲基转移酶或磷脂甲基转移酶的活性被灭活。
[0022]如本文所用，“磷脂酰乙醇胺N
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甲基转移酶(PEMT)”是将磷脂酰乙醇胺(PE)转化为磷脂酰胆碱(PC)的转移酶。通过PEMT产生的磷脂酰胆碱可用于胆碱合成、膜结构和VLDL分泌，发挥广泛的生理作用。在本公开中，磷脂酰乙醇胺N
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甲基转移酶可以与PEMT互换使用。在本专利技术中，磷脂酰乙醇胺N
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甲基转移酶可以由cho2基因编码。
[0023]如本文所用，“磷脂甲基转移酶”是催化磷脂酰乙醇胺(PE)的甲基化反应的酶，并且可能在合成磷脂酰胆碱(PC)中起作用。在本专利技术中，磷脂甲基转移酶可以由opi3基因编码。
[0024]本公开的磷脂酰乙醇胺N
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甲基转移酶或磷脂甲基转移酶的活性失活是指两种酶之一的活性失活或其组合的失活。
[0025]关于本公开的目的，其中两种酶之一的活性失活或它们两者的活性均失活的耶氏酵母属(Yarrowia)变体菌株可以与野生型相比，具有增加的菌株中的脂肪含量，但不限于此。
[0026]“磷脂酰乙醇胺N
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甲基转移酶”或“磷脂甲基转移酶”的序列可以从公共数据库获得，公共数据库的例子可以包括NCBI的GenBank等。例如，可以是源自耶氏酵母属(Yarrowia sp.)的磷脂酰乙醇胺N
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甲基转移酶和/或磷脂甲基转移酶，具体地，磷脂酰乙醇胺N
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甲基转移酶可以包括SEQ ID NO：2的氨基酸序列，并且磷脂甲基转移酶可以包括SEQ ID NO：12的氨基酸序列，但不限于此。包含SEQ ID NO：2的氨基酸序列的多肽可以与具有SEQ ID NO：2的氨基酸序列的多肽或由SEQ ID NO：2的氨基酸序列组成的多肽互换使用，并且包含SEQ ID NO：12的氨基酸序列的多肽可以与具有SEQ ID NO：12的氨基酸序列的多肽或由SEQ ID NO：12的氨基酸序列组成的多肽互换使用。此外，也可以包括任何与上述氨基酸序列具有相同的活性的多肽序列。
[0027]此外，所述多肽可以包括与磷脂酰乙醇胺N
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甲基转移酶的SEQ ID NO：2的氨基酸序列和/或磷脂甲基转移酶的SEQ ID NO：12的氨基酸序列具有30％或更多的同源性或同一性的氨基酸序列，但不限于此。具体地，多肽可以包括与SEQ ID NO：2的磷脂酰乙醇胺N
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甲基转移酶和/或SEQ ID NO：12的磷脂甲基转移酶具有至少30％、60％、80％、85％、90％、95％、96％、97％、98％或99％或更多同源性或同一性的氨基酸序列。此外，显然任何具有部分序列缺失、修饰、取代或添加的氨基酸序列的多肽也可包括在本专利技术的范围内，只要该氨...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】1.耶氏酵母属(Yarrowia)变体菌株，其中磷脂酰乙醇胺N
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甲基转移酶(PEMT)或磷脂甲基转移酶的活性被灭活。2.根据权利要求1所述的耶氏酵母属(Yarrowia)变体菌株，其中所述磷脂酰乙醇胺N
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甲基转移酶由cho2基因编码，且所述cho2基因由SEQ ID NO：1的多核苷酸序列组成。3.根据权利要求2所述的耶氏酵母属(Yarrowia)变体菌株，其中所述cho2基因缺失。4.根据权利要求1所述的耶氏酵母属(Yarrowia)变体菌株，其中所述磷脂甲基转移酶由opi3基因编码，且所述opi3基因由SEQ ID NO：11的多核苷酸序列组成。5.根据权利要求4所述的耶氏酵母属(Yarrowia)变体菌株，其中所述opi3基因缺失。6.根据权利要求1所述的耶氏酵母属(Yarrowia)变体菌株，其中所述耶氏酵母属(Yarrowia)菌株包括解脂耶氏酵母(Yarrowia lipolytica)。7.根据权利要求1所述的耶氏酵母属(Yarrowia)变体菌株，其中所述耶氏酵母属(Yarrowia)变体菌株是胆碱营养缺陷株。8.根据权利要求1所述的耶氏酵母属(Yarrowia)变体菌株，其中所述耶氏酵母属(Yarrowia)变体菌株与野生型相比脂肪含量增加。9.根据权利要求8所述的耶氏酵母属(Yarrowia)变体菌株，其中所述脂肪包括三酰基甘油(TAG)。10.化妆品组合物，其包含下列之一种或多种：权利要求1～9之任一项所述的耶氏酵母属(Yarrowia)变体菌株、所述菌株的培养物、所述菌株的提取物、所述菌株的干燥产物、所述菌株的裂解物，以及从所述菌株、培养物、提取物、干燥产物和裂解物中的一种或多种中回收的脂肪。11.食品组合物，其包含下列之一种或多种：权利要求1～9之任一项所述的耶氏酵母属(Yarrowia)变体菌株、所述菌株的培养物、所述菌株的提取物、所述菌株的干燥产物、所述菌株的裂解物，以及从所述菌株、培养物、提取物、干燥产物和裂解物中的一种或多种中回收的脂肪。12.饲料组合物，其包含下列之一种或多种：权利要求1～9之任一项所述的耶氏酵母属(Yarrowia)变体菌株、所述菌株的培养物、所述菌...

【专利技术属性】
技术研发人员：张智良，P，
申请(专利权)人：CJ第一制糖株式会社，
类型：发明
国别省市：