重组微生物及其构建方法和应用技术

本发明专利技术涉及微生物技术领域，具体涉及重组微生物及其构建方法和应用。本发明专利技术提供一种重组微生物，所述重组微生物与其出发菌株相比，具有降低的机械敏感蛋白YnaI或其同源物或其功能变体的表达和/或酶活性。本发明专利技术通过降低微生物中机械敏感蛋白YnaI的表达，显著提高了苏氨酸等氨基酸的产量和转化率。本发明专利技术提供的具有降低的机械敏感蛋白YnaI表达的重组微生物的苏氨酸产量和转化率较出发菌株均显著提高，有利于降低苏氨酸的发酵生产成本，为苏氨酸高产菌株的选育提供了有效的改造靶点和菌株。株。

【技术实现步骤摘要】
重组微生物及其构建方法和应用


[0001]本专利技术涉及微生物
，具体涉及重组微生物及其构建方法和应用。

技术介绍

[0002]氨基酸是蛋白质的基本组成单元，许多氨基酸在人和动物体内发挥重要的生理功能，而且多种氨基酸已成为化工领域重要的精细化学品。以L
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苏氨酸为例，其是人和动物生长所必需的8种氨基酸之一，广泛应用于饲料、食品添加及药物辅助材料制备等。
[0003]微生物发酵法生产氨基酸已成为多种氨基酸生产的主要方法，目前L
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苏氨酸主要通过微生物发酵生产，多种细菌可用于L
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苏氨酸生产，例如：以大肠杆菌、棒状杆菌属、沙雷氏菌属等的野生型菌株经诱变获得的突变株作为生产菌株，包括抗氨基酸类似物突变株或甲硫氨酸、赖氨酸、异亮氨酸等多种营养缺陷型(日本专利申请公开号224684/83；韩国专利申请公开号8022/87)。然而，传统诱变育种由于随机突变造成菌株生长缓慢及产生较多副产物，不易获得高产菌株。
[0004]随着全球苏氨酸需求量的不断增加，高产苏氨酸菌株的构建和改造尤为本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种重组微生物，其特征在于，所述重组微生物与其出发菌株相比，具有降低的机械敏感蛋白YnaI或其同源物或其功能变体的表达和/或酶活性。2.根据权利要求1所述的重组微生物，其特征在于，所述机械敏感蛋白YnaI具有如下任一种氨基酸序列：(1)如SEQ ID NO.1所示的氨基酸序列；(2)如SEQ ID NO.1所示的氨基酸序列经一个或多个氨基酸的替换、缺失或插入得到的具有相同功能蛋白的氨基酸序列；(3)与如SEQ ID NO.1所示的氨基酸序列具有至少80％同源性的氨基酸序列。3.根据权利要求1或2所述的重组微生物，其特征在于，所述表达和/或酶活性的降低通过如下(1)、(2)中的一种或多种方式的组合实现：(1)对所述机械敏感蛋白YnaI的编码基因进行一个或多个碱基的插入、缺失或替换以使得机械敏感蛋白YnaI的表达量降低、酶活性降低或失活；(2)将所述机械敏感蛋白YnaI的编码基因的转录或翻译调控元件替换为活性更低的调控元件以使得其表达量降低、酶活性降低或失活；优选地，通过失活所述机械敏感蛋白YnaI实现其表达和/或酶活性的降低。4.根据权利要求1～3任一项所述的重组微生物，其特征在于，所述出发菌株为能够积累氨基酸或其衍生物的细菌；优选地，所述氨基酸为苏氨酸、甘氨酸或异亮氨酸。5...

【专利技术属性】
技术研发人员：尹春筱，刘慧敏，康培，
申请(专利权)人：李岩，
类型：发明
国别省市：