玉米种子内生菌B.sediminisYB-1574、生防菌剂及其应用制造技术

本发明专利技术公开了一种玉米种子内生菌B.sediminisYB

【技术实现步骤摘要】
玉米种子内生菌B.sediminis YB
‑
1574、生防菌剂及其应用


[0001]本专利技术涉及生物防控
，具体涉及一种玉米种子内生菌B. sediminis YB
‑
1574、生防菌剂及其制备与应用。

技术介绍

[0002]小麦和玉米是我国重要的粮食作物，其生产能力及供需状况始终关系到我国国民经济发展和粮食安全等重大战略问题。近年来，由于种植模式单一，秸秆还田造成病原菌积累，导致一些主推品种抗病性差，玉米茎腐病和小麦茎基腐病等土传病害发生日趋严重，给我国的粮食安全生产带来严重威胁。
[0003]目前，防治玉米茎腐病和小麦茎基腐病以化学药剂为主，化学杀菌剂具有高效、成本低、操作简便，但在防治病害的威胁生态环境安全和人类健康。采用生防菌剂防治玉米茎腐病和小麦茎基腐病对环境友好，可以避免化学防治带来的一系列问题。生防菌剂可减少或替代化学药剂的使用，从而达到防治玉米茎腐病和小麦茎基腐病的目的。
[0004]因此，如何筛选得到高效的病原菌拮抗微生物进行生物防治，并进一步优化使用方法是本领域技术人员亟需解决的问题。
[0005]公开于该
技术介绍
部分的信息仅用于加深对本公开的
技术介绍
的理解，而不应当被视为承认或以任何形式暗示该信息构成本领域技术人员所公知的现有技术。

技术实现思路

[0006]专利技术人通过研究发现，从玉米种子中分离到的一种内生菌—Brevibacterium sediminis YB
‑
1574，能够诱导玉米和小麦植株的系统抗病性，对玉米茎腐病和小麦茎基腐病具有良好的生物防治效果，另一方面其还能够促进作物的生长发育，还兼具改善作物籽粒品质的作用。
[0007]根据本公开的一个方面，筛选得到一种玉米内生菌YB
‑
1574，其分类命名为Brevibacterium sediminis，于2022年 4 月 18 日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心（地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号，邮编：100101），其保藏编号为 CGMCC No. 24704。
[0008]根据本公开的另一个方面，提供一种含有所述内生菌B.sediminisYB
‑
1574或/和其代谢产物的生防菌剂。
[0009]根据本公开的另一个方面，提供一种生防菌剂的制备方法，包括如下步骤：将所述短杆菌YB
‑
1574接种于LB液体培养基，于28～30℃，180～200 rpm条件下，培养24～30 h，至OD 600 nm 达至0.8～0.9，所得发酵菌液即为生防菌剂。
[0010]在本公开的一些实施例中，所述LB液体培养基含：胰蛋白胨10 g/L，酵母提取物5 g/L，氯化钠10 g/L，pH 7.0。
[0011]根据本公开的另一个方面，将所述玉米种子内生菌B. sediminis YB
‑
1574或所述生防菌剂应用于小麦茎基腐病或玉米茎腐病的防治当中。
[0012]根据本公开的另一个方面，将所述玉米种子内生菌B. sediminis YB
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1574或所述生防菌剂应用于促进植物生长中。
[0013]根据本公开的另一个方面，将所述玉米种子内生菌B. sediminis YB
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1574或所述生防菌剂应用在作物产量的提高当中。
[0014]根据本公开的另一个方面，将所述玉米种子内生菌B. sediminis YB
‑
1574或所述生防菌剂应用在作物籽粒品质改善、提高方面，例如，提高小麦的蛋白质含量、容重和湿面筋含量，并提高稳定时间和面团形成时间。
[0015]本申请实施例中提供的一个或多个技术方案，至少具有如下技术效果或优点：1. 目前利用Brevibacterium sediminis防治作物病害的研究报道较少，且尚未见用Brevibacterium sediminis防治层出镰孢菌（Fusarium proliferatum）引起的玉米茎腐病以及假禾谷镰孢（F. pseudograminearum）引起的小麦茎基腐病，且来源不同菌株的生物学特性、抗菌谱等存在明显差异，具有菌株特异性；本专利技术Brevibacterium sediminisYB
‑
1574是从玉米种子中分离得到的内生菌，该菌株能够诱导玉米和小麦植株的系统抗病性，对玉米茎腐病和小麦茎基腐病的防治效果良好，且能够提高作物的籽粒产量和品质。
[0016]2. 利用本专利技术菌株制备的生防菌剂可以替代或减少化学农药的使用，进而提高食品和生态环境安全，兼具良好的经济和社会效益。
附图说明
[0017]图1 为本申请一实施例中YB
‑
1574菌株的鉴定图谱；(a) YB
‑
1574的菌落特征；（b）YB
‑
1574的菌体形态；（c）YB
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1574的革兰氏染色；（d）YB
‑
1574菌株基于16S rDNA基因序列的系统发育树。
具体实施方式
[0018]在以下实施例中所涉及的仪器设备如无特别说明，均为常规仪器设备；所涉及的试剂及原料如无特别说明，均为市售常规市售产品；所涉及的检测、测试、实验方法等，如无特别说明，均为常规方法。
[0019]为了更好的理解本申请技术方案，下面将结合说明书附图以及具体的实施方式对上述技术方案进行详细的说明。
[0020]实施例一：菌株获取及种类鉴定从玉米种子上分离得到一株内生菌（2020年7月，由梁娟分离于玉米，品种：B104），命名为YB
‑
1574，在NA培养基上生长速度较慢，菌落为橙黄色不透明，表面光滑凸起，边缘规则；革兰氏染色阳性，菌体呈杆状（图1中a
‑
c）。
[0021]以该菌株的基因组DNA为模板，以细菌16S rDNA序列通用引物27F(5
’‑
AGAGTTTGATCCTGGCTCAG
–3’
)、1492R(5
’‑
TACGGCTACCTTGTTACGACTT
‑3’
)为引物PCR扩增16S序列并测序，在NCBI数据库进行BLAST比对分析，相似性最高的属种为Brevibacterium sediminis，序列相似度达到99%。
[0022]从NCBI数据库下载其近缘序列构建系统发育树（见图1d），结果显示菌株YB
‑
1574与B. sediminis的亲缘关系最近，结合形态学鉴定，将菌株YB
‑
1574鉴定为B. sediminis。
[0023]实施例二：生防菌剂的制备挑取YB
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1574菌株单菌落接种于LB液体培养基（配方：胰蛋白胨10 g/L，酵母提取物5 g/L，氯化钠10 g/L，pH 7.0），于28～30℃，180～本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种玉米种子内生菌B.sediminisYB
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1574，其特征在于，其保藏编号为CGMCC No. 24704。2.一种生防菌剂，其特征在于，含权利要求1所述短杆菌YB
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1574或/和其代谢产物。3.权利要求2所述生防菌剂的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：将权利要求1所述短杆菌YB
‑
1574接种于LB液体培养基，于28～30℃，180～200 rpm条件下，培养24～30 h，至OD 600 nm 达至0.8～0.9，所得发酵菌液即为生防菌剂。4.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于，所述LB液体培养基包括：胰蛋白胨10 g/L、酵母提取物5 g...

【专利技术属性】
技术研发人员：张洁，杨丽荣，夏明聪，梁娟，孙润红，徐文，武超，柴秋源，
申请(专利权)人：河南省农业科学院植物保护研究所，
类型：发明
国别省市：