本发明专利技术提供一种核糖核酸酶的生产工艺，涉及医学领域。该基于自动清洁的锅底烧糊黑垢清除装置，包括牛胰脏，包括以下步骤：S1.酸提处理：将新鲜的牛胰腺搅碎，加入重量为牛胰腺重量的4
【技术实现步骤摘要】
一种核糖核酸酶的生产工艺
[0001]本专利技术涉及医学
，具体为一种核糖核酸酶的生产工艺。
技术介绍
[0002]核糖核酸酶A是内切核糖核酸酶，英文名称Ribonuc l ease A，简称RNaseA，可特异地攻击RNA上嘧啶残基的3'端，切割与相邻核苷酸形成的磷酸二酯键。反应终产物是嘧啶3'磷酸及末端带嘧啶3'磷酸的寡核苷酸。无辅因子及二价阳离子存在时，核糖核酸酶A的作用可被胎盘RNA酶抑制剂或氧钒—核糖核苷复合物所抑制，是催化核糖核酸水解的一种核酸内切酶，可使胞嘧啶核酸解聚，可用于生化研究；测定核酸的结构；核糖核酸(RNA)序列分析；水解蛋白样品中的RNA；纯化DNA。
[0003]核糖核酸酶用于生化研究，测定核酸结构，医药上用于治疗外伤及关节疼痛，抑制流感及疱疹病毒，并适用于急性胰腺炎、流行性脑炎，核糖核酸酶还可作为消炎酶制剂，它能催化核糖核酸降解，能改变宿主细胞新陈代谢。抑制病毒合成。在体外能抑制流感病毒增殖，在鸡胚骨能抑制痘苗、疱疹病毒形成，并适用于急性胰腺炎。其药用油膏局部外用于治疗外伤及关节疼痛。每天肌注180mg、治疗流行性脑炎。另外在新冠核酸检测过程中，样本核酸的提取、纯化或实验的反应体系配制的过程中，均有可能引入核糖核酸酶(RNase)的污染，导致RNA模板被降解，若要避免RNase的污染，则需要RNase抑制剂(RNase Inhibitor)发挥作用，目前还没普及这方面的技术，因此，本领域技术人员提出一种核糖核酸酶的生产工艺。
技术实现思路
[0004](一)解决的技术问题
[0005]针对现有技术的不足，本专利技术提供了一种核糖核酸酶的生产工艺，解决了现有提取工艺的问题。
[0006](二)技术方案
[0007]为实现以上目的，本专利技术通过以下技术方案予以实现：一种核糖核酸酶的生产工艺，包括牛胰脏，包括以下步骤：
[0008]S1.酸提处理：将新鲜的牛胰腺搅碎，加入重量为牛胰腺重量的4
‑
6倍的氯化钠溶液以及助滤剂浸渍16
‑
20h，浸渍至上清液蛋白含量为8mg/mL时，过滤取酸提液，氯化钠溶液的浓度：0.85
‑
0.9％；PH＝2.3
‑
3.3；温度16
‑
20℃；
[0009]S2.硫酸铵分级：将酸提液一次进行70％、95％饱和度硫酸铵盐析，过滤后收集盐析物；
[0010]S3.煮沸去杂处理：将盐析物与水混合，于98
‑
102℃内煮沸2
‑
5min，冷却，过滤得到除杂液,并将除杂液与磷酸缓冲液制备成层析液备用,磷酸盐缓冲液的导电率：1.6
‑
2.1ms/cm；PH＝6.0
‑
6.10；
[0011]S4.离子交换柱层析：用磷酸盐缓冲液平衡CM层析柱，然后将所述层析液上样于所
述CM层析柱后，先用洗脱液a1进行洗脱，至流出液蛋白含量低于1mg/mL时，再用洗脱液a2进行洗脱至流出液蛋白含量低于0.5mg/mL，收集含有核糖核酸酶的洗脱液a1和脱氧核糖核酸酶洗脱液a2，得到收集液；
[0012]洗脱液a1：磷酸盐缓冲液和氯化钠混合；
[0013]氯化钠溶液：浓度：0.05mol/L；电导率：6.0
‑
7.0ms/cm；PH＝7.0
‑
7.1，
[0014]洗脱液a2：磷酸盐缓冲液和氯化钠混合；
[0015]氯化钠溶液：浓度：0.2mol/L；电导率：20.0
‑
22.0ms/cm；PH＝7.0
‑
7.1；
[0016]层析液：蛋白含量：8
‑
14mg/mL；导电率：3.0
‑
4.0ms/cm；PH＝6.0
‑
6.10；
[0017]S5.过滤：将收集液经超滤膜浓缩至蛋白含量大于40mg/mL，然后进行冷冻干燥，得到核糖核酸酶和脱氧核糖核酸酶成品；且具体操作步骤为：提取，过滤，浓缩，离心，纯化，冻干。
[0018](三)有益效果
[0019]本专利技术提供了一种核糖核酸酶的生产工艺。具备以下有益效果：
[0020]1、本专利技术中，通过采用酸提处理、硫酸铵分级、盐析、煮沸去杂处理、离子交换柱层析以及浓缩、干燥等方法将核糖核酸酶从牛胰脏中提取，具有极佳的生物医药特性，能够发挥酶解蛋白的优质作用，形成医药中间体的流程化、规模化、系统化的生产加工，工艺技术先进，强调可持续发展，能够广泛应用于生物试剂、疫苗试剂盒的研制以及医疗疾病的防治等多重领域。
具体实施方式
[0021]下面将结合本专利技术实施例中，对本专利技术实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本专利技术一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本专利技术中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本专利技术保护的范围。
[0022]实施例一：
[0023]本专利技术实施例提供一种核糖核酸酶的生产工艺，包括牛胰脏，包括以下步骤：
[0024]S1.酸提处理：将新鲜的牛胰腺搅碎，加入重量为牛胰腺重量的4
‑
6倍的氯化钠溶液以及助滤剂浸渍16
‑
20h，浸渍至上清液蛋白含量为8mg/mL时，过滤取酸提液，氯化钠溶液的浓度：0.85
‑
0.9％；PH＝2.3
‑
3.3；温度16
‑
20℃；
[0025]S2.硫酸铵分级：将酸提液一次进行70％、95％饱和度硫酸铵盐析，过滤后收集盐析物；
[0026]S3.煮沸去杂处理：将盐析物与水混合，于98
‑
102℃内煮沸2
‑
5min，冷却，过滤得到除杂液,并将除杂液与磷酸缓冲液制备成层析液备用,磷酸盐缓冲液的导电率：1.6
‑
2.1ms/cm；PH＝6.0
‑
6.10；
[0027]S4.离子交换柱层析：用磷酸盐缓冲液平衡CM层析柱，然后将所述层析液上样于所述CM层析柱后，先用洗脱液a1进行洗脱，至流出液蛋白含量低于1mg/mL时，再用洗脱液a2进行洗脱至流出液蛋白含量低于0.5mg/mL，收集含有核糖核酸酶的洗脱液a1和脱氧核糖核酸酶洗脱液a2，得到收集液；
[0028]洗脱液a1：磷酸盐缓冲液和氯化钠混合；
[0029]氯化钠溶液：浓度：0.05mol/L；电导率：6.0
‑
7.0ms/cm；PH＝7.0
‑
7.1，
[0030]洗脱液a2：磷酸盐缓冲液和氯化钠混合；
[0031]氯化钠溶液：浓度：0.2mol/L；电导率：20.0
‑
22.0ms/cm；PH＝7.0
‑
7.1；
[0032]层析液：蛋白含量：8
‑...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
1.一种核糖核酸酶的生产工艺，包括牛胰脏，其特征在于：包括以下步骤：S1.酸提处理：将新鲜的牛胰腺搅碎，加入重量为牛胰腺重量的4
‑
6倍的氯化钠溶液以及助滤剂浸渍16
‑
20h，浸渍至上清液蛋白含量为8mg/mL时，过滤取酸提液，氯化钠溶液的浓度：0.85
‑
0.9％；PH＝2.3
‑
3.3；温度16
‑
20℃；S2.硫酸铵分级：将酸提液一次进行70％、95％饱和度硫酸铵盐析，过滤后收集盐析物；S3.煮沸去杂处理：将盐析物与水混合，于98
‑
102℃内煮沸2
‑
5min，冷却，过滤得到除杂液,并将除杂液与磷酸缓冲液制备成层析液备用,磷酸盐缓冲液的导电率：1.6
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2.1ms/cm；PH＝6.0
‑
6.10；S4.离子交换柱层析：用磷酸盐缓冲液平衡CM层析柱，然后将所述层析液上样于所述CM层析柱...
【专利技术属性】
技术研发人员：扎西，韩阳，韩志凯，
申请(专利权)人：北京佰尔瑞森生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：
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