酸性多糖及从罗勒籽胶中分离酸性多糖的方法技术

本发明专利技术提供一种酸性多糖及从罗勒籽胶中分离酸性多糖的方法，涉及从罗勒籽胶中分离酸性多糖技术领域。包括如下步骤：以罗勒籽为原料，提取罗勒籽胶粉；对罗勒籽胶粉进行去蛋白处理；提取罗勒籽胶酸性粗多糖；分离罗勒籽胶酸性多糖；使用本方法分离酸性多糖，原料来源广泛，节约乙醇用量，方法简单易行，得到的罗勒籽胶酸性多糖具有较强的抗氧化活性和抗糖作用。用。用。

【技术实现步骤摘要】
酸性多糖及从罗勒籽胶中分离酸性多糖的方法


[0001]本专利技术涉及从罗勒籽胶中分离酸性多糖
，具体涉及一种酸性多糖及从罗勒籽胶中分离酸性多糖的方法。

技术介绍

[0002]罗勒籽胶(BSG)是一种果胶基质，由大量未酯化的半乳糖醛酸组成，具有很强的水合能力，属于天然植物水胶体，具有优良的凝胶性、粘性和乳化特性。有研究表明，罗勒籽胶中含有酸性多糖等活性成份，该活性成份具有降胆固醇的作用。为此，罗勒籽胶在食品、工业、医药等领域具有非常广阔的应用前景。
[0003]目前从天然植物水胶体中提取其中的活性成分，常用的方法是把天然植物中溶于水的部分制备成水溶液，然后从其水溶液中再分离活性成分。但是罗勒籽胶因其分子量较大，虽然能够溶于水，但是溶于水后的溶液粘度比较大，因此从罗勒籽胶中分离、纯化酸性多糖比较困难，鉴于此，提供一种从罗勒籽胶中分离酸性多糖的方法成为本领域技术人员亟待解决的技术问题。

技术实现思路

[0004](一)解决的技术问题
[0005]针对现有技术的不足，本专利技术提供了一种酸性多糖及从罗勒籽胶中分离酸性多糖的方法，解决了从罗勒籽胶中分离、纯化酸性多糖比较困难的技术问题。
[0006](二)技术方案
[0007]为实现以上目的，本专利技术通过以下技术方案予以实现：
[0008]一种从罗勒籽胶粉中分离酸性多糖的方法，包括如下步骤：
[0009]S1、以罗勒籽为原料，提取罗勒籽胶粉；
[0010]S2、对罗勒籽胶粉进行去蛋白处理：
[0011]把罗勒籽胶粉溶于水中，使用Sevage试剂去除罗勒籽胶粉中的蛋白质，然后去除Sevage试剂并浓缩后，对罗勒籽胶粉进行醇沉，对沉淀物进行冷冻干燥、粉碎、过60目筛，获得脱蛋白罗勒籽胶粉；
[0012]S3、提取罗勒籽胶酸性粗多糖：
[0013]碱法：将脱蛋白罗勒籽胶粉溶于碱性溶液中，获得脱蛋白罗勒籽胶粉溶液，将所述脱蛋白罗勒籽胶粉溶液于
‑
4℃冷冻10
‑
12小时，再离心处理，取所述脱蛋白罗勒籽胶粉溶液的上清液，调节所述上清液的pH值为7
‑
9，然后除去所述上清液中的离子及小分子，再对所述上清液进行醇沉得到沉淀，对所述沉淀进行冷冻干燥、粉碎、过60目筛处理，获得罗勒籽胶酸性粗多糖；或
[0014]CTAB法：将脱蛋白罗勒籽胶粉于80℃温水中搅拌30min，12000r/min离心20min，取上清液，加入10％CTAB溶液，可使酸性多糖沉淀，4℃过夜，12000r/min离心15
‑
20min，去上清，收集沉淀，加入10％NaCl溶液，搅拌3
‑
4h，再加入3倍体积96％的乙醇进行沉淀，同样
12000r/min离心15
‑
20min，蒸馏水复溶，冷冻干燥，得到酸性粗多糖；或
[0015]微孔滤膜法：将脱蛋白罗勒籽胶粉于80℃温水中搅拌30min，12000r/min离心20min，取上清液，过0.45um的水系微孔滤膜，冷冻干燥，得到酸性粗多糖；
[0016]S4、分离罗勒籽胶酸性多糖：
[0017]将罗勒籽胶酸性粗多糖溶于水中，使用纤维素柱进行层析得到至少一种酸性多糖组分洗脱液，使用苯酚
‑
硫酸法检测所述洗脱液的吸光度，选择吸光度为明显单峰的洗脱液，对所述吸光度为明显单峰的洗脱液进行分离纯化，浓缩并冻干，获得至少一种罗勒籽胶酸性多糖，于
‑
20℃保存。
[0018]在一实施例中，所述步骤S2中，罗勒籽胶粉与水的质量体积比为1:5g/L。
[0019]在一实施例中，所述步骤S2中，Sevage试剂的组成为：正丁醇与氯仿的体积比为1/4，罗勒籽胶粉与Sevage试剂的质量体积比为1：1
‑
1：1.5g/L。
[0020]在一实施例中，所述步骤S3中，碱性溶液选自NaOH或KOH溶液，所述NaOH或KOH溶液的浓度为0.5mol/L，脱蛋白罗勒籽胶粉与碱性溶液的质量体积比为1：1g/L。
[0021]在一实施例中，所述步骤S3中，还包括向脱蛋白罗勒籽胶粉溶液中加入硼氢化钠溶液，所述硼氢化钠溶液的浓度为20mmol/L，脱蛋白罗勒籽胶粉与硼氢化钠溶液的质量体积比为10：1g/L。
[0022]在一实施例中，所述步骤S3中，用醋酸调解上清液的pH＝7。
[0023]在一实施例中，所述步骤S4中，罗勒籽胶酸性粗多糖与水的质量体积比为1：5g/L。
[0024]一种使用所述的分离方法从罗勒籽胶中分离的酸性多糖，所述的酸性多糖具有α
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淀粉酶抑制活性及抗氧化活性。
[0025](三)有益效果
[0026]本专利技术提供了一种酸性多糖及从罗勒籽胶中分离酸性多糖的方法。与现有技术相比，具备以下有益效果：
[0027]1、以罗勒籽为原料，原料来源广泛，从罗勒籽中提取罗勒籽胶，经过复溶和洗涤步骤，不仅除去了杂质，而且具有节约乙醇用量的效果。
[0028]2、使用碱性溶液再次把脱蛋白罗勒籽胶粉溶解，提供氢氧根离子减弱脱蛋白罗勒籽胶粉分子之间的水合作用，降低溶液粘度，提高脱蛋白罗勒籽胶粉中多糖的溶解；添加硼氢化钠NaBH4溶液，促进脱蛋白罗勒籽胶粉中多糖的溶解，并于
‑
4℃冷冻，以促进脱蛋白罗勒籽胶粉中的多糖在碱性条件下与氢氧根离子进行充分结合，再通过调节pH，使上清溶液中的与氢氧根离子结合的多糖能够与氢氧根离子脱离，以独立的多糖分子形式存在于溶液中，采用柱层析技术，再经过洗脱分离浓缩处理得到罗勒籽胶酸性多糖，方法简单易行。分离得到的罗勒籽胶酸性多糖具有较强的抗氧化活性和抗糖作用。
附图说明
[0029]为了更清楚地说明本专利技术实施例或现有技术中的技术方案，下面将对实施例或现有技术描述中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图仅仅是本专利技术的一些实施例，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他的附图。
[0030]图1、实施例1制备罗勒籽胶粉过程示意图；
[0031]图2、实施例1制备脱蛋白罗勒籽胶粉过程示意图；
[0032]图3、实施例1制备罗勒籽胶酸性粗多糖过程示意图；
[0033]图4、实施例1制备罗勒籽胶酸性多糖过程示意图；
[0034]图5、实施例1脱蛋白罗勒籽胶粉溶解在碱性溶液中的状态及粘度示意图；
[0035]图6、对比例1脱蛋白罗勒籽胶粉溶解在蒸馏水中的状态及粘度示意图；
[0036]图7、实施例1中用DEAE纤维素分离纯化罗勒籽胶多糖的洗脱图。
具体实施方式
[0037]为使本专利技术实施例的目的、技术方案和优点更加清楚，对本专利技术实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例是本专利技术一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本专利技术中的实施例，本领域普通技术人员在没本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种从罗勒籽胶粉中分离酸性多糖的方法，其特征在于，包括如下步骤：S1、以罗勒籽为原料，提取罗勒籽胶粉；S2、对罗勒籽胶粉进行去蛋白处理：把罗勒籽胶粉溶于水中，使用Sevage试剂去除罗勒籽胶粉中的蛋白质，然后去除Sevage试剂并浓缩后，对罗勒籽胶粉进行醇沉，对沉淀物进行冷冻干燥、粉碎、过60目筛，获得脱蛋白罗勒籽胶粉；S3、提取罗勒籽胶酸性粗多糖：使用碱法、CTAB法或微孔滤膜法从所述脱蛋白罗勒籽胶粉中提取罗勒籽胶酸性粗多糖；S4、分离罗勒籽胶酸性多糖：将罗勒籽胶酸性粗多糖溶于水中，使用纤维素柱进行层析得到至少一种酸性多糖组分洗脱液，使用苯酚
‑
硫酸法检测所述洗脱液的吸光度，选择吸光度为明显单峰的洗脱液，对所述吸光度为明显单峰的洗脱液进行分离纯化，浓缩并冻干，获得至少一种罗勒籽胶酸性多糖，于
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20℃保存。2.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述步骤S2中，罗勒籽胶粉与水的质量体积比为1:5g/L。3.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述步骤S2中，Sevage试剂的组成为：正丁醇与氯仿的体积比为1/4，罗勒籽胶粉与Sevage试剂的质量体积比为1：1
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1：1.5g/L。4.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述步骤S3，碱法包括：将脱蛋白罗勒籽胶粉溶于碱性溶液中，获得脱蛋白罗勒籽胶粉溶液，将所述脱蛋白罗勒籽胶粉溶液于
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4℃冷冻10
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12小时，再离心处理，取所述脱蛋白罗勒籽胶粉溶液的上清液，调节所述上清液的pH值为7
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9，然后除去所述上清液中的离子及小分子，再对所述上清液进行醇沉得到沉淀，对所述沉淀进行冷冻干燥、粉...

【专利技术属性】
技术研发人员：官玲亮，张亚娇，于福来，元超，刘雷，陈晓鹭，谢小丽，黄梅，陈振夏，王凯，胡璇，
申请(专利权)人：中国热带农业科学院热带作物品种资源研究所，
类型：发明
国别省市：