一种白果活性成分的综合提取分离方法技术

一种白果活性成分的综合提取分离方法，其包括如下步骤：(1)脂溶性成分提取；(2)水溶性成分提取；(3)白果油的分离；(4)白果烷基酚酸的分离；(5)白果黄酮与内酯的分离；(6)白果多糖的分离；(7)白果蛋白的分离；(8)白果淀粉的提取分离。一种白果活性成分的综合提取分离方法，解决现有白果提取单一成分问题，本发明专利技术从全部产品的集成化提取分离考虑，从整体上发明专利技术了白果中活性成分的综合提取分离方法，不只是注重单个产品的提取分离，做到了银杏叶的“吃干榨尽”，是资源综合利用的价值取向。在追求资源“吃干榨尽”的同时，对生产过程中产生的废弃物，变废为宝，化害为利，以达到综合利用的目的，促使循环经济的发展，实现资源节约，环境友好的经济模式。好的经济模式。

【技术实现步骤摘要】
一种白果活性成分的综合提取分离方法


[0001]一种白果活性成分的综合提取分离方法。

技术介绍

[0002]白果(学名：Ginkgo biloba)，本品为银杏科植物银杏(白果树、公孙树)Ginkgo biloba L.的干燥成熟种子。秋季种子成熟时采收，除去肉质外种皮，洗净，稍蒸或略煮后，烘干。生于海拔500～1000m的酸性土壤，排水良好地带的天然林中。分布于北自沈阳，南达广州，东起华东，西南至贵州、云南都有栽培。干燥的种子呈倒卵形或椭圆形，一端稍尖，另端钝，略扁，长径1.5～3.0cm，短径1～1.5cm。外壳(外种皮)白色或灰白色。外壳(中种皮)骨质，光滑，表面黄白色或淡棕黄色，基部有一圆点状突起，边缘各有1条棱线，偶见2～3条棱线。壳内有长而扁圆形的种仁，剥落时一端有淡棕色的薄膜。内种皮膜质，红褐色或淡黄棕色。种仁扁球形，宽卵球形或椭圆形，胚乳肥厚，粉质，中间有空隙，胚极小，一端淡棕色，另一端金黄色，横断面外层黄色，胶质样，内层白色、淡黄色或淡绿色，粉质，中心有空隙，靠近顶端有子叶2枚或更多。气微，味甘、微苦涩。以外壳白色、种仁饱满、断面色淡黄、里面色白者佳。全国大部分地区有产。主产广西、四川、河南、山东、湖北、辽宁等地。功能主治：敛肺气，定喘嗽，止带浊，缩小便。治遗精，淋病，小便频数，痰多喘咳，带下白浊，遗尿尿频、无名肿毒、皶鼻、癣疮。
[0003]1.化学成分
[0004]《中药大辞典》中记载种子含少量氰甙、赤霉素和动力精样物质，内胚乳中还分离出两种核糖核酸酶，一般组成为：蛋白质6.4、脂肪2.4、碳水化物36％，钙10毫克、磷218毫克、铁1毫克％，胡萝卜素320微克、核黄素50微克，以及多种氨基酸，外种皮含有毒成分白果酸、氢化白果酸、氢化白果亚酸、白果酚和白果醇，尚含天门冬素、甲酸、丙酸、丁酸、辛酸、廿九烷醇
‑
10等，花粉含多种氨基酸、谷氨酰胺、天门冬素、蛋白质、柠檬酸、蔗糖等，雄花含棉子糖可达鲜重的4％。《中华本草》中记载种子含有毒成分为4
‑
O
‑
甲基吡哆醇，称为银杏毒素，还含6
‑
(8
‑
十五碳烯基)
‑
2，4
‑
二羟基苯甲酸，6
‑
十三烷基
‑
2，4
‑
二羟基苯甲酸，腰果酸和钾、磷、镁、钙、锌、铜等25种无素，种仁含蛋白质，脂肪、碳水化合物、糖等。夏梦雨等报道白果的化学成分主要有黄酮类化合物有银杏双黄酮、异银杏黄素、松柏苷等、萜内酯类化合物有银杏内酯A、银杏内酯B和银杏内酯C等、酚酸类化合物有白果酸、白果酚和白果二酚、有机酸类化合物有油酸、亚油酸和二十碳三烯酸(中国药房，2020，31，123
‑
128)。周梦怡等报道白果中粗蛋白含量为18.06～20.96g/100g，氨基酸总含量为38.69～62.13g/100g蛋白，其中必需氨基酸总含量为15.85～24.08g/100g蛋白，白果第一限制性氨基酸为Lys(河北农业大学学报，2019，42，74
‑
80)。周桂生对银杏外种皮、中种皮和种仁化学成分进行了系统分离，外种皮中分离得到(7S，8R，11S)
‑
二十九烷三醇、(10R，12R，15S)
‑
二十九烷三醇、二十八烷酸、二十四烷酸、二十烷酸、二十九烷
‑
10
‑
醇、β
‑
谷甾醇、6
‑
(十五烷基)
‑
水杨酸、6
‑
(8
‑
十五碳烯)
‑
水杨酸、6
‑
(10
‑
十七碳烯)
‑
水杨酸、二十烷酸
‑1‑
甘油酯、芹菜素、槲皮素、山奈酚、金松双黄酮、银杏黄素、异银杏黄素、银杏内酯A、银杏内酯B、银杏内酯C、白果内酯、胡萝卜
苷、D
‑
葡萄糖、蔗糖；中种皮分离得到十八烷酸、棕榈酸、二十九烷
‑
10
‑
醇、β
‑
谷甾醇、正三十二烷醇、正二十二烷醇、6
‑
(十五烷基)
‑
水杨酸、6
‑
(8
‑
十五碳烯)
‑
水杨酸、正二十二烷酸
‑1‑
甘油酯、正二十烷酸
‑1‑
甘油酯、正十六烷酸
‑1‑
甘油酯、1，3
‑
十六烷酸
‑
甘油酯、1，3
‑
二亚油酸
‑
甘油酯、三硬脂酸甘油酯、三棕榈酸甘油酯、银杏内酯B、银杏内酯C、胡萝卜苷。种仁中分离得到二十六烷酸、棕榈酸、二十九烷
‑
10
‑
醇、β
‑
谷甾醇、正十六烷酸
‑1‑
甘油酯、熊果酸、金松双黄酮、银杏黄素、异银杏黄素、胡萝卜苷、银杏内酯A、银杏内酯B、银杏内酯C、尿嘧啶、松柏苷、daphnenosid、甘草苷、腺苷、葡萄糖和蔗糖(2013，南京中医药大学)。黄文等报道白果中含类胡萝卜素总量约489μg/100g；其中叶黄质、β
‑
胡萝卜素和α
‑
胡萝卜素，分别占总类胡萝卜素的69.20％、15.80％和7.45％(营养学报，2003，25，324
‑
326)。陈金铭等从银杏种子的乙酸乙酯部位分离鉴定出芹菜素、槲皮素、山奈酚、银杏内酯A、银杏内酯B、银杏内酯C、β
‑
胡萝卜苷、3
‑
咖啡酸酰基
‑2‑
甲基
‑
D
‑
赤藓糖酸
‑
1，4内酯、7，8，3
′
，4
′‑
四羟基二氢黄酮醇、山奈酚
‑3‑
O
‑
α
‑
L
‑
鼠李糖苷、丁香酚
‑
O
‑
β
‑
D
‑
呋喃芹糖(1
″‑6′
)
‑
O
‑
β
‑
D
‑
吡喃葡萄糖苷(辽宁中医药大学学报，2015，17，46
‑
49)。
[0005]2.药理作用
[0006]①
抗菌作用白果肉、白果汁、白果酚，尤其是白果酸体外试验时对人型结核杆菌和牛型结核杆菌有抑制作用，油浸白果之果浆含有的抗菌成分对若干种革兰氏阳性及阴性细菌均有作用(葡萄球菌、链球菌、白喉杆菌、炭疽杆菌、枯草杆菌、大肠杆菌、伤寒杆菌等)，对结核杆菌作用极显着，此菌成分经加热85℃则对大肠杆菌失去作用，而经100℃ 30分钟对结核扦菌仍有抑制性的作用，白果的水浸液(1∶2)在体外对堇色毛癣菌、奥杜盎氏小本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种白果活性成分的综合提取分离方法，其包括如下步骤：(1)脂溶性成分提取；(2)水溶性成分提取；(3)白果油的分离；(4)白果烷基酚酸的分离；(5)白果黄酮与内酯的分离；(6)白果多糖的分离；(7)白果蛋白的分离；(8)白果淀粉的提取分离。2.如权利1所述的制备方法，其特征在于，步骤(1)中所述的脂溶性成分提取，白果装入超声提取釜中进行物料超声提取，合并各次收集的滤液，并将最后合并的滤液放置于旋转蒸发仪减压浓缩至浸膏状，制备出白果脂溶性成分浸膏I和最后收集的滤渣I；所述的超声提取溶剂为90～95％乙醇；所述的料液比，第一次超声提取为1∶10～15(g∶mL)，第二次超声提取为1∶8～12(g∶mL)，第三次超声提取为1∶6～10(g∶mL)，第四次超声提取为1∶4～8(g∶mL)；所述的超声发生方式，它激式超声发声装置，径向振动柱状换能器；所述的超声波功率位1000W，超声频率位30～60KHZ；所述的提取方式，间隔2min，超声作用一次，超声作用时间3min，总提取时间30min；所述的提取温度：50～60℃；所述的搅拌方式：气升式搅拌。3.如权利1所述的制备方法，其特征在于，步骤(2)中所述的水溶性成分提取，滤渣I采用亚临界水提取，亚临界水提取装置中通入高纯氮气，以脱氧蒸馏水为萃取剂，料水比为1∶10～20(g∶mL)，提取温度100～150℃，提取时间30～60min，压力控制在3～10Mpa，得到含白果多糖和白果蛋白的萃取液及滤渣II，将得到含白果多糖和白果蛋白的萃取液离心，浓缩，醇沉，得到粗品，粗品用水溶解，加入叔丁醇和硫酸铵构成三液相体系，得到上相I、中相I和下相I；所述的离心，以转速3000～5000r/min离心10～20min；所述的浓缩，用10～50kD截留分子量的超滤膜浓缩至原体积的1/3～1/10；所述的醇沉，将含白果多糖和白果蛋白粗提浓缩液加入95～100wt％乙醇，使乙醇最终浓度为70～80wt％，搅拌均匀后，静置沉淀5～10h，抽滤，得到沉淀物，用无水乙醇洗涤1～3次，得到粗品；所述的粗品用水溶解，将上述粗品加入去离子水溶解，配制成白果多糖和白果蛋白总浓度为30～50wt％的溶液，得到含糖和蛋白溶液；所述的叔丁醇和硫酸铵构成三液相体系，含糖和蛋白溶液与叔丁醇体积比1∶1～1∶3，硫酸铵质量分数30～50wt％，温度35～40℃，时间30min，pH值7，得到上相I、中相I和下相I。4.如权利1所述的制备方法，其特征在于，步骤(3)中所述的白果油的分离，将浸膏I加入石油醚回流提取四次，得到滤渣VI和滤液I～IV，滤液I～IV浓缩成浸膏II，将正己烷、乙醇和磷酸氢二钾水溶液按一定比例混和均匀，加入浸膏II中，搅拌均匀，静置一定时间后，分为三相，上相II、中相II和下相II，收集上相II，加入活性炭脱色，减压浓缩，得到白果油；所述的提取温度60～100℃，提取时间60～90min；所述的每次提取石油醚用量，5～10倍(mL∶g)；所述的滤液I～IV，在压力为
‑
(0.08～0.1)MPa，温度为30～60℃下，浓缩成相对比重1.10～1.15，得到浸膏II；所述的正己烷、乙醇和磷酸氢二钾水溶液的操作条件为正己烷
‑
乙醇
‑
磷酸氢二钾
‑
水(10∶20∶20∶50，w/w/w/w)，白果脂肪油和白果烷基酚酸分别富集于三液相体系的上相II和
中相II；所述的活性炭脱色，加入3～5％(w/w)活性炭回流脱色30min，抽滤，收集滤液；所述的浓缩，滤液在真空减压浓缩设备的浓缩压力为
‑
(0.08～0.1)MPa，浓缩温度为30～60℃下，浓缩成相对比重1.10～1.15。5.如权利1所述的制备方法，其特征在于，步骤(4)中所述的白果烷基酚酸的分离，将收集的中相II在真空减压浓缩设备的浓缩压力为
‑
(0.08～0.1)MPa，浓缩温度为30～60℃下，浓缩成相对比重1.10～1.15，得到白果烷基酚酸粗品；粗品中加入石油醚(60～90℃)溶解，加入碱液反应，分层，收集水相，酸化，沉淀，抽滤，水洗，干燥，溶解，脱色，浓缩，结晶，得到白果烷基酚酸精品；所述的加入碱液反应，石油醚溶解液中，加入10～20wt％的碱液在60～90℃反应30～60min，反应液分层，收集水相；所述的碱液为氢氧化钠水溶液、氢氧化钾水溶液、碳酸钠水溶液、碳酸氢钠水溶液或甲醇钠中之一；所述的水相，加入盐酸或硫酸调节pH值2～4，放置，产生沉淀，抽滤，滤饼用纯化水洗至抽滤液pH值7左右；所述的干燥，将滤饼在温度40～50℃，真空度
‑
(85.7～93.6)KPa条件下，干燥5～10h，得到干燥物；所述的溶解、脱色，将干燥物加入3～5倍(w/w)石油醚(60～90℃)溶解，溶解液中按料液比0.1～0.5∶1(g∶mL)加入凹凸棒石吸附剂脱色；所述的脱色液在真空度
‑
(0.08～0.1)MPa，温度30～60℃下，浓缩至原体积1/3～1/4，放置，结晶，抽滤，结晶物以少量石油醚洗涤，在温度40～50℃，真空度
‑
(85.7～93.6)KPa条件下，干燥5～10h，得到干燥物。6.如权利1所述的制备方法，其特征在于，步骤(5)中所述的白果黄酮与内酯的分离，步骤(3)中所得的滤渣V用乙醇溶解，过滤，加30～45℃的温水均匀分散成50～100mg/mL的液体，以0.5mL/min的上样速...

【专利技术属性】
技术研发人员：李玉山，
申请(专利权)人：李玉山，
类型：发明
国别省市：