本发明专利技术涉及重组人源胶原蛋白技术领域，具体涉及一种交联重组人源胶原蛋白凝胶的制备工艺，包括：(1)将重组人源胶原蛋白海绵粉碎后溶于氯化钠溶液，制得重组人源胶原蛋白混悬液；(2)采用碱液调重组人源胶原蛋白混悬液pH至7～8，投入单宁酸或HA，加热搅拌，在超声波作用下交联反应制得凝胶；(3)将凝胶采用酸液冲洗至中性，再用氯化钠溶液冲洗得交联重组人源胶原蛋白凝胶。本发明专利技术提供的交联重组人源胶原蛋白凝胶的制备工艺采用天然交联剂单宁酸进行交联反应，单宁酸作为一种天然的多酚类化合物，能够重组人源胶原蛋白大分子氢键多位点结合形成交联凝胶，单宁酸无毒且易降解，解决了现有技术中醛类交联剂具有毒性残留的技术问题。题。
【技术实现步骤摘要】
一种交联重组人源胶原蛋白凝胶的制备工艺
[0001]本专利技术涉及重组人源胶原蛋白
，具体涉及一种交联重组人源胶原蛋白凝胶的制备工艺。
技术介绍
[0002]重组人源胶原蛋白，是利用DNA重组技术制备的胶原蛋白，其氨基酸序列可根据需求进行设计改进，重组的胶原蛋白的基因序列与人的基因序列高度一致，组织相容性较好，可以被人体直接吸收并参与构建胶原，帮助进行组织修复和部位填充。重组人源胶原蛋白采用凝胶的形式进行人体的抗衰应用，制备凝胶时需要用到交联剂原料，现有的交联剂一般为具有毒性的戊二醛，在凝胶制备时清洗不净会有一定的残留，对人体的使用有一定的危害性。
技术实现思路
[0003]针对现有技术的交联剂具有毒性的问题，本专利技术提供一种交联重组人源胶原蛋白凝胶的制备工艺，采用天然交联剂单宁酸，制得的凝胶无毒适用于人体使用。
[0004]本专利技术提供一种交联重组人源胶原蛋白凝胶的制备工艺，包括如下步骤：
[0005](1)将重组人源胶原蛋白海绵粉碎后溶于氯化钠溶液，制得重组人源胶原蛋白混悬液；
[0006](2)采用碱液调重组人源胶原蛋白混悬液pH至7～8，投入单宁酸或HA，加热搅拌，在超声波作用下交联反应制得凝胶；
[0007](3)将凝胶采用酸液冲洗至中性，再用氯化钠溶液冲洗得交联重组人源胶原蛋白凝胶。
[0008]进一步的，步骤(1)、步骤(3)中的氯化钠溶液质量浓度均为0.9％。
[0009]进一步的，步骤(2)中，碱液为氢氧化钠溶液，氢氧化钠溶液的浓度为0.1～0.2mol/L。
[0010]进一步的，重组人源胶原蛋白与单宁酸的质量比为10～15：1；重组人源胶原蛋白与HA的质量比为1～5：1。
[0011]进一步的，步骤(2)中，加热的温度为40～50℃。
[0012]进一步的，步骤(2)中，超声波的功率为300～500W，交联反应时间为10～15h。
[0013]进一步的，步骤(3)中，酸液为盐酸，盐酸浓度为0.5～1mol/L。
[0014]进一步的，所述的交联重组人源胶原蛋白凝胶的制备工艺，具体包括如下步骤：
[0015](1)将重组人源胶原蛋白海绵粉碎后溶于质量浓度为0.9％的氯化钠溶液，制得重组人源胶原蛋白混悬液；
[0016](2)采用0.1～0.2mol/L的氢氧化钠溶液调重组人源胶原蛋白混悬液pH至7～8，投入单宁酸，重组人源胶原蛋白与单宁酸的质量比为10～15：1，加热至40～50℃搅拌，在超声波作用下交联反应制得凝胶，超声波的功率为300～500W，交联反应时间为10～15h；
[0017](3)将凝胶采用0.5～1mol/L的盐酸冲洗至中性，再用质量浓度为0.9％的氯化钠溶液冲洗得交联重组人源胶原蛋白凝胶。
[0018]本专利技术的有益效果在于，本专利技术提供的交联重组人源胶原蛋白凝胶的制备工艺采用天然交联剂单宁酸进行交联反应，超声波可促进交联反应的进行，单宁酸作为一种天然的多酚类化合物，能够重组人源胶原蛋白大分子氢键多位点结合形成交联凝胶，HA(透明质酸钠)亦可提供交联基团，单宁酸、HA无毒且易降解，解决了现有技术中醛类交联剂具有毒性残留的技术问题。
具体实施方式
[0019]为了使本
的人员更好地理解本专利技术中的技术方案，下面将对本专利技术实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本专利技术一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本专利技术中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都应当属于本专利技术保护的范围。
[0020]实施例1
[0021]一种交联重组人源胶原蛋白凝胶的制备工艺，具体包括如下步骤：
[0022](1)将重组人源胶原蛋白海绵粉碎后溶于质量浓度为0.9％的氯化钠溶液，制得重组人源胶原蛋白混悬液；
[0023](2)采用0.1mol/L的氢氧化钠溶液调重组人源胶原蛋白混悬液pH至7，投入单宁酸，重组人源胶原蛋白与单宁酸的质量比为10：1，加热至40℃搅拌，在超声波作用下交联反应制得凝胶，超声波的功率为300W，交联反应时间为10h；
[0024](3)将凝胶采用0.5mol/L的盐酸冲洗至中性，再用质量浓度为0.9％的氯化钠溶液冲洗得交联重组人源胶原蛋白凝胶。
[0025]实施例2
[0026]一种交联重组人源胶原蛋白凝胶的制备工艺，具体包括如下步骤：
[0027](1)将重组人源胶原蛋白海绵粉碎后溶于质量浓度为0.9％的氯化钠溶液，制得重组人源胶原蛋白混悬液；
[0028](2)采用0.2mol/L的氢氧化钠溶液调重组人源胶原蛋白混悬液pH至8，投入单宁酸，重组人源胶原蛋白与单宁酸的质量比为15：1，加热至50℃搅拌，在超声波作用下交联反应制得凝胶，超声波的功率为500W，交联反应时间为15h；
[0029](3)将凝胶采用1mol/L的盐酸冲洗至中性，再用质量浓度为0.9％的氯化钠溶液冲洗得交联重组人源胶原蛋白凝胶。
[0030]实施例3
[0031]一种交联重组人源胶原蛋白凝胶的制备工艺，具体包括如下步骤：
[0032](1)将重组人源胶原蛋白海绵粉碎后溶于质量浓度为0.9％的氯化钠溶液，制得重组人源胶原蛋白混悬液；
[0033](2)采用0.15mol/L的氢氧化钠溶液调重组人源胶原蛋白混悬液pH至7.5，投入HA，重组人源胶原蛋白与HA的质量比为5：1，加热至45℃搅拌，在超声波作用下交联反应制得凝胶，超声波的功率为400W，交联反应时间为13h；
[0034](3)将凝胶采用0.75mol/L的盐酸冲洗至中性，再用质量浓度为0.9％的氯化钠溶
液冲洗得交联重组人源胶原蛋白凝胶。
[0035]取实施例1
‑
3凝胶样品，分别测试其性能，具体数据见表1。
[0036]表1实施例1
‑
3凝胶样品性能测试数据
[0037]项目pH弹性模量G'/Pa粘性模量G"/Pa黏度/mpa
·
s实施例16.453.6127.31370246实施例26.752.3626.11380532实施例36.854.3328.01376215
[0038]由表1可以看出，本专利技术制得凝胶成品应变及流变性能满足使用需求。
[0039]尽管通过优选实施例的方式对本专利技术进行了详细描述，但本专利技术并不限于此。在不脱离本专利技术的精神和实质的前提下，本领域普通技术人员可以对本专利技术的实施例进行各种等效的修改或替换，而这些修改或替换都应在本专利技术的涵盖范围内/任何熟悉本
的技术人员在本专利技术揭露的技术范围内，可轻易想到变化或替换，都应涵盖在本专利技术的保护范围之内。
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【技术保护点】
【技术特征摘要】
1.一种交联重组人源胶原蛋白凝胶的制备工艺，其特征在于，包括如下步骤：(1)将重组人源胶原蛋白海绵粉碎后溶于氯化钠溶液，制得重组人源胶原蛋白混悬液；(2)采用碱液调重组人源胶原蛋白混悬液pH至7～8，投入单宁酸或HA，加热搅拌，在超声波作用下交联反应制得凝胶；(3)将凝胶采用酸液冲洗至中性，再用氯化钠溶液冲洗得交联重组人源胶原蛋白凝胶。2.如权利要求1所述的交联重组人源胶原蛋白凝胶的制备工艺，其特征在于，步骤(1)、步骤(3)中的氯化钠溶液质量浓度均为0.9％。3.如权利要求1所述的交联重组人源胶原蛋白凝胶的制备工艺，其特征在于，步骤(2)中，碱液为氢氧化钠溶液，氢氧化钠溶液的浓度为0.1～0.2mol/L。4.如权利要求1所述的交联重组人源胶原蛋白凝胶的制备工艺，其特征在于，重组人源胶原蛋白与单宁酸的质量比为10～15：1；重组人源胶原蛋白与HA的质量比为1～5：1。5.如权利要求1所述的交联重组人源胶原蛋白凝胶的制备工艺，其特征在于，步骤(2)中，加热的温...
【专利技术属性】
技术研发人员：李明太，
申请(专利权)人：济南之羽医疗科技有限公司，
类型：发明
国别省市：
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