本发明专利技术涉及微生物领域，具体涉及罗伊氏乳杆菌LRB5及菌剂和应用。本发明专利技术的罗伊氏乳杆菌LRB5能在动物体内定植，并对人工胆盐、人工胃酸、人工肠液有很强的耐受力；可以改善肠道健康，提高肠道免疫力，增加雄性动物精子活力、浓度、怀孕率、产活仔数；该菌株能改善动物机体代谢，增加有益的代谢产物，从而增加睾丸有益代谢产物如视磺酸，提高雄性动物的精子质量和繁殖力。殖力。殖力。
【技术实现步骤摘要】
罗伊氏乳杆菌LRB5及菌剂和应用
[0001]本专利技术涉及微生物领域，具体涉及罗伊氏乳杆菌LRB5及菌剂和应用。
技术介绍
[0002]目前，雄性动物的雄性不孕不育率大幅度提高，主要是因为雄性生殖系统更容易受环境因素的影响。然而现在还没有良好的方法改善精液品质从而治疗雄性不孕不育。近年来研究发现肠道菌群与人及其他动物的健康息息相关，然而肠道菌群与雄性生殖轴的关系还没有确认，虽然已经有研究发现肠道菌群混合物可以改变雄性动物的精液品质，有益的肠道有益菌群可以改善动物的精液品质，但是还没有报道具体是哪种有益菌可以起到改善动物精液品质，提高雄性动物繁殖力，也没有任何文献公开哪种具体的肠道菌可以提高雄性繁殖力。现有罗伊氏乳杆菌 ATCC PTA 6475主要是可以增加动物睾丸中间质细胞的数目，增加睾酮的含量，也提高了精子浓度和活力。但是未表明可以提高精子的顶体完整性、降低精子畸形率，也没有表明可以提高受精能力、动物的怀孕率和产活仔数。而提高动物的精子活力、精子浓度不代表一定能够提高动物的繁殖力。影响动物繁殖力的因素很多，包括精子浓度、精子活力、精子顶体完整性、精子畸形率、精子受精能力以及动物身体的一些生理机能（比如体能等）。申请人之前的研究发现板栗多糖可以提高动物的精子活力和精子浓度但是不能提高动物的繁殖力。许多研究发现类似的结果。
技术实现思路
[0003]本专利技术的目的是提供一种罗伊氏乳杆菌(Lactobacillus reuteri)B5。
[0004]本专利技术的另一目的是提供包含上述罗伊氏乳杆菌(Lactobacillus reuteri)B5的菌剂。
[0005]本专利技术的另一目的是提供上述罗伊氏乳杆菌(Lactobacillus reuteri)B5的应用。
[0006]本专利技术的罗伊氏乳杆菌(Lactobacillus reuteri)B5，该菌株于2022年 7月18日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(简称CGMCC，保藏地址:北京市朝阳区北辰西路1号院3号，中国科学院微生物研究所，邮编100101)，分类命名为罗伊氏乳杆菌Lactobacillus reuteri，保藏编号为CGMCC No.25324。
[0007]本专利技术提供含有罗伊氏乳杆菌(Lactobacillus reuteri)B5的菌剂，所述菌剂可以是液体菌剂或固体菌剂，采用常规技术手段、加入微生物制剂领域允许的辅料制备得到。
[0008]本专利技术提供了罗伊氏乳杆菌(Lactobacillus reuteri)B5用于制备以下用途的制剂的用途，（1）改善肠道健康；（2）改善血液及睾丸代谢组；（3）增加雄性动物精子浓度；（4）增加雄性动物精子活力；
（5）提高雄性动物交配成功率及交配的雌性动物怀孕率；和/或（6）提高雄性动物交配的雌性动物产活仔数。
[0009]本专利技术的罗伊氏乳杆菌LRB5能在动物体内定植，并对人工胆盐、人工胃酸、人工肠液有很强的耐受力。本专利技术的罗伊氏乳杆菌LRB5可以改善肠道健康，提高肠道免疫力，增加雄性动物精子活力、浓度、怀孕率、产活仔数；该菌株能改善动物机体代谢，增加有益的代谢产物，从而增加睾丸有益代谢产物如视磺酸（调控精子发生的起始），从而提高雄性动物的精子质量和繁殖力。同一种菌的不同株系之间的差异很大，通过重测序，发现本专利技术中LRB5的基因序列和已知的罗氏乳杆菌LL7有很多突变位点，87%以上的位点突变。本专利技术分离培养的15株罗氏乳杆菌中只有1株LRB5具有提高精液品质和繁殖力的功效，其他的菌株没有这种功效。
附图说明
[0010]图1为本专利技术的罗伊氏乳杆菌(Lactobacillus reuteri)B5的生长曲线(MRS培养基)；图2显示本专利技术实施例2中试验小鼠在试验周期35天体重变化情况；图3显示本专利技术实施例2中试验小鼠的精子浓度；图4显示本专利技术实施例2中试验小鼠的精子活力；图5显示本专利技术实施例2中试验小鼠的精子顶体完整性；图6显示本专利技术实施例2中试验小鼠的精子顶体畸形率；图7显示本专利技术实施例2中试验小鼠的怀孕率；图8显示本专利技术实施例2中试验小鼠的产活仔数；图9显示本专利技术实施例3中试验公猪的采精量；图10显示本专利技术实施例3中试验公猪精子的浓度；图11显示本专利技术实施例3中试验公猪精子的活力；图12显示本专利技术实施例3中试验公猪精子的顶体完整性；图13显示本专利技术实施例3中试验公猪精子的畸形率；图14显示本专利技术实施例4中试验公山羊精子的浓度；图15显示本专利技术实施例4中试验公山羊精子的活力；图16显示本专利技术实施例4中试验公山羊精子的顶体完整性；图17显示本专利技术实施例4中试验公山羊精子的畸形率。
[0011]本专利技术的罗伊氏乳杆菌(Lactobacillus reuteri)B5菌株，分类命名为罗伊氏乳杆菌Lactobacillus reuteri，该菌株于2022年 7月18日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(简称CGMCC，保藏地址:北京市朝阳区北辰西路1号院3号，中国科学院微生物研究所，邮编100101)，保藏编号为CGMCC No.25324。
具体实施方式
[0012]本专利技术验证了罗伊氏乳杆菌(Lactobacillus reuteri)B5（缩写为LRB5）对雄性动物繁殖力的有益作用，以白消安（Busulfan）建立小鼠弱精、少精症模型，发现该菌株能够提高精子浓度、活力、顶体完整性，降低精子畸形率，提高雄鼠与正常雌鼠交配的成功率，交配
后母鼠的怀孕率、产活仔数。夏季高温高湿会导致公猪、公羊精液品质下降，从而导致母猪、母羊怀孕率和产活仔数减少，可以提高夏季高温高湿状态下公猪和公羊的精子浓度和活力、顶体完整性，降低精子畸形率。
[0013]实施例1罗伊氏乳杆菌(Lactobacillus reuteri)B5的分离1、菌株分离：罗伊氏乳杆菌Lactobacillus reuteri分离自肠道内容物。取肠道内容物，用无菌生理盐水进行10倍梯度稀释，吸取合适稀释度的稀释液0.1mL在BLB琼脂上均匀涂布，37
°
C培养48h后， 将生长出的菌落通过平板划线接种到新的BLB固体培养基进行纯化培养48h。
[0014]2、菌株富集：将纯化培养后的菌株，在无菌操作台上用接种环逐一接种到无菌MRS肉汤培养基中，置于摇床中，37
°
C培养48h后进行16S rRNA鉴定，并将剩余部分与含有25%甘油的生理盐水混合，保存至
‑
80
°
C冰箱。
[0015]3、16S rRNA鉴定：将富集后的菌液，使用细菌通用引物进行菌落PCR扩增后, 送至生工生物工程（上海）股份有限公司进行16S rDNA测序鉴定，在NCBI上将各个菌株的16S rDNA序列与数据库中所有已测定细菌的16S rDNA序列进行比对，其中发现有6株与罗伊氏乳杆菌Lactobacillus reuteri HKU 070513的16S rDNA 序列的同源相似性最高，相似度大本文档来自技高网...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
1.罗伊氏乳杆菌(Lactobacillus reuteri)B5，其特征在于，所述罗伊氏乳杆菌(Lactobacillus reuteri)B5的保藏编号为CGMCC No. 25324。2.包含权利要求1所述的罗伊氏乳杆菌(Lactobacillus reuteri)B5的菌剂。3.根据权利要求2所述的菌剂，其特征在于，所述菌剂为液体菌剂或固体菌剂。4....
【专利技术属性】
技术研发人员：赵勇，钟儒清，陈亮，张宏福，姜岳，张鹏飞，周业勋，郝亚男，卢东欣，房涵涵，
申请(专利权)人：中国农业科学院北京畜牧兽医研究所，
类型：发明
国别省市：
还没有人留言评论。发表了对其他浏览者有用的留言会获得科技券。